Жидкостная хроматография при высоких давлениях - Энгельгардт Х.
Скачать (прямая ссылка):
В табл. VI. 1 приведены порядки величин концентраций вода в различных элюентах [15, 17, 18]. Степень покрытия окиси алюминия в СКВ соответствует степени активности по Брокману [13]. Кроме того, систему можно дополнительно характеризовать с помощью значений к' некоторых стандартных веществ.
Если из-за особенностей применяемых систем адсорбент — элюент или аппаратуры СКВ применить нельзя, разделительную систему следует стандартизовать только по хроматографическим данным. Для этого берут стандартную смесь с пробами веществ, у которых к'
8*
116
Глава VI
14-Ю'*Х HjO
-/V
0
гЛ-
мин 12 11 10 9
8
Рис. VI.7. Разделение ароматических соединений при различном содержании воды в элюентах, установленном с помощью системы контроля влажности (СКВ).
СКВ: нейтральная окись алюминия вольм для колоночной хроматографии с 4,5, 6 и 9% воды;
Т, °С: 25; объем сосуда для элюента: 500 мл.
Разделительная колонка: нейтральная окись алюминия вольм, df а 5 мкм; Т, °С: 25; элюент: н-гептан с добавками 45-10"4, 35 - Ю"4 и 14воды; f * 2,8 мл/мин; и - 4,2 мм/с; Ар - 100 атм. Проба: / — инертное вещество (тетрахлорэтклен); 2 — бензол; 3 — нафталин; 4 ~ дифеннл; 5 — антрацен;
6 — парен; 7 — флуорантен; 8 - 1,2-бенэантрацен.
лежат в интервале 1 —10. Для каждой новой порции элюента определяют значение к' этой стандартной смеси после приведения колонки в равновесие. Если полученное значение больше предыдущего, то это означает, что новая порция элюента суше, чем предыдущая. Добавляя насыщенный водой элюент, можно понизить значение к' до требуемого значения. Если же полученное значение к' меньше, чем предыдущее, то таким же образом, используя более сухой элюент, следует понизить содержание воды. Особо осторожно и тщательно следует проводить разделение в таких системах, в которые входит адсорбент с большой удельной поверхностью и неполярные элюенты с относительно небольшим содержанием воды.
Адсорбционная хроматография
117
Таблица VI. 1
Концентрация воды в элюеитах (10~4%), находящихся в равновесии с окисью алюминия, содержащей определенное количество воды
Элюент Содержание воды I AljOi, % Литература
0 3 6 10 15
н-Г ептан <5 15 35 55 60 17
Четыреххлористый углерод <5 40 120 150 160 18
Бензол < 5 100 340 400 460 18
Диизопропиловый эфир < 1C 250 1050 2400 3200 18
Хлороформ < 10 140 700 900 1200 18
Хлористый метилен < 10 700 1200 1500 1800 17
Как следует из табл. VI.1, для каждого растворителя характерно свое равновесное содержание воды для определенной степени активности. Особенно сложно выявить оптимальное соотношение вода при градиентном элюировании. В этом случае количество адсорбированной воды постоянно меняется. В зависимости от содержания воды и полярных растворителях вода или вымывается из адсорбента, или адсорбируется на нем. При иозвращении к исходному растворителю первоначальные условия равновесия устанавливаются только по прошествии какого-то времени, тем не менее начинать новое разделение можно только после того, как эти условия будут достигнуты. Химически модифицированная неподвижная фаза типа «щеток», по-видимому, обладает некоторыми преимуществами по сравнению с «голыми» адсорбентами. Поскольку поверхностные сила но льны е группы в «щетках» замещены, содержание воды в элюен-те меньше влияет на удерживание. Поэтому на таких неподвижных фазах можно проводить также анализ с программированием температуры (см. гл. VI, разд. III.2).
Между полярным соединением, растворимым в элюенте, и носителем быстро устанавливается адсорбционное равновесие, поэтому такие вещества можно в больших или меньших количествах наносить на неподвижную фазу. В конечном итоге можно разделительную колонку с активным адсорбентом сделать «распределительной» колонкой. Иногда это — единственный способ получить систему для распределительной хроматографии. Практически таким образом можно нанести на активную твердую фазу любую полярную разделяющую жидкость. Из тройных смесей при этом адсорбируются прежде всего полярные растворители, которые образуют неподвижную жидкую фазу (см. гл. VII).
Добавляя незначительные количества воды или других полярных соединений (например, спиртов) к адсорбенту или к элюенту, снижают объем удерживания. Полярные соединения на таких адсорбентах перестают удерживаться. Если адсорбент «активируют» в колон-
118
Глава VI
ке (лучше всего пропуская сухие или очищенные элюенты), то неудерживаемые в «мокрой» системе вещества удерживаются и разделяются; элюотропный ряд при этом чаще всего не меняется. Состав элюента остается постоянным, меняется только «активность» адсорбента в колонке.
Г. Влияние растворителя на разделение
Правильный выбор растворителя при разделении часто имеет более важное значение, чем выбор неподвижной фазы. На заданном адсорбенте в зависимости от свойств элюента проба может удерживаться очень сильно, вообще не удерживаться или удерживаться требуемое время. К применяемым в жидкостной хроматографии злюен-там предъявляются следующие требования.
Элюент должен позволять опознать пробу. Так, например, при УФ-детектировании пробы элюент не должен поглощать в заданном диапазоне длин волн.
