Жидкостная хроматография при высоких давлениях - Энгельгардт Х.
Скачать (прямая ссылка):
Довольно просто также менять концентрацию компонентов в элюирующей смеси, используя поршневые мембранные насосы с двумя головками. Каждая головка насоса подает свой элюент. С помощью шагового мотора ход поршня в обеих головках насоса меняется противоположным образом. Результирующий поток элюента при этом должен оставаться постоянным, его контролируют двумя расходомерами, соединенными обратной связью с шаговым мотором. Обеспечить синхронное изменение хода поршней, а также воспроизводимость и точность градиентного состава можно с помощью электронных устройств.
При градиентном элюировании целесообразно использовать насосы с меняющейся частотой хода поршня, снабженные шаговыми моторами или моторами постоянного тока. С помощью электронных устройств работой двух насосов можно управлять таким образом, чтобы при постоянном общем количестве подаваемого на колонку элюента количества отдельных его компонентов, подаваемых каждым насосом, менялись противоположным заранее выбранным способом. Таким образом можно приготовить элюент из двух компонентов, отвечающий любой выбранной программе.
В настоящее время решены еще не все задачи, связанные с практическим осуществлением градиентного элюирования. Например, при смешении двух органических растворителей выделяется тепло, которое следует отводить. Далее, если у смешиваемых компонентов сильно различается вязкость, то в процессе разделения могут меняться скорость элюента (в системах с постоянным давлением) или давление (в системах с постоянным подаваемым объемом). Наконец, до сих пор не разработан детектор, предназначенный специально для градиентного элюирования (В принципе для этой цели пригоден транспортный детектор; см. разд. У1.Г.)
Кроме программирования состава элюента, в жидкостной хроматографии применяется программирование скорости элюента (путем программирования давления на входе в колонку) и температуры разделения [18].
Аппаратура для жидкостной хроматографии
59
Для программирования потока или давления могут служить уже названные регуляторы потока (см. стр. 26) [7]. Если позволяет система подачи элюента, то объемная скорость элюента увеличивается соответственно увеличению давления на входе в колонку. Любое программируемое увеличение линейной скорости элюента ведет к сокращению длительности анализа. Большинство детекторов в известных пределах объемных скоростей (0,5-8 мл/мин) не откликается на увеличение потока элюента через измерительную ячейку (ДР-и УФ-детекторы). При работе с такими детекторами для сокращения времени анализа можно использовать программирование скорости потока.
Программирование температуры (постоянное увеличение температуры) не относится к числу универсальных методов. Во-первых, при изменении температуры только УФ-детектор работает достаточно стабильно, а дифференциальный рефрактометр вообще не пригоден. Во-вторых, при повышении температуры нарушается (см. разд. VI. III.2) равновесие, например, между водой, адсорбированной на поверхности адсорбента, и водой, растворенной в элюенте. Как и в газовой хроматографии, линейному градиенту температур соответствует экспоненциальный градиент давления или скорости потока.
Элюент необходимо нагреть до требуемой температуры перед тем, как он поступит в разделительную колонку. В качестве теплообменника вполне пригоден капилляр длиной примерно 1 м (внутренний диаметр 0,25 мм), который помещают в тот же самый термостат, в котором находится и разделительная колонка. (При работе с циркуляционными термостатами достаточно рубашки типа холодильника Либиха.)
Л. Меры безопасности
Используемое в аппаратуре давление не представляет опасности, так как в жидкостном хроматографе циркулируют несжимаемые жидкости. Однако большинство элюентов легко воспламеняются При плохом уплотнении соединений, особенно часто в месте установления прокладки в дозаторе, может появиться сильная струя подвижной фазы. Воздушный термостат следует снабдить устройством для промывки инертным газом. Особенно внимательно необходимо -еледить за тем, чтобы термостат не перегревался, так как при слишком высокой температуре и высоком давлении возможен переход элюента в сверхкритическую область.
Для того чтобы при случайном засорении аппаратуры отдельные части прибора не были испорчены в результате повышения давления, в установке обязательно должен быть предусмотрен предохранительный вентиль. Целесообразно устанавливать предохранительный вентиль непосредственно за насосом, т. е. там, где достигается самое высокое давление.
60
Глава III
В заключение напомним, что практически все органические растворители вредны, так, например, хлороформ является канцерогеном.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
Обзорная статья:
Генри Р. в кн. Современное состояние жидкостной хроматографии. — М.: Мйр, 1974, 325 с.
1. Schrenker Н., CZ-Chemie-Technik, 1, 73 (1972).
2. Нире К.-Р., Schrenker Н., Chromatographia, 5, 44 (1972).
3. Orlita F., kaiser R., Chemiker-Ztg., 95, 84 (1971).
4. Waters Assoc., Chromatography Notes, Vol. 2, No. 1 (Feb. 1972).
5. Karger B. L., Berry L. V., Anal. Chem., 44, 93 (1972).
