Молекулярная биология клетки - Уилсон Дж.
ISBN 5-03-001999-5
Скачать (прямая ссылка):
количеств фермента (мол. масса 19000) с ДНК, содержащей 0,26 пмоль
мутагенного основания, меченного тритием. В разные моменты инкубации
отбирали пробы и анализировали в них ДНК на остаточное содержание
мутагенного основания (рис. 5-14). Когда опыт повторили при 5°С вместо 37
°С, начальные скорости репарации были более низкими, а конечные теми же
самыми.
А. Какой метилированный пурин ответствен за мутагенное действие МННГ?
Рис. 5-13. Хроматографическое разделение меченых метилированных пуринов
из ДНК необработанных бактерий и из ДНК бактерий, обработанных мутагеном
МННГ в низкой концентрации, (задача 5-19). Сплошная линия-спектр
метилированных пуринов из ДНК необработанных бактерий; штриховая-спектр
метилированных пуринов из ДНК бактерий, обработанных мутагеном.
22 Глава 5
Рис. 5-14. Удаление меченных тритием метальных групп из ДНК с помощью
очищенного фермента метилтрансферазы (задача 5-19). Количество очищенного
фермента указано над каждой кривой.
Б. В чем состоит особенность кинетики удаления метильной группы из
мутагенного основания? Связана ли эта особенность с нестабильностью
фермента?
В. Рассчитайте число метальных групп, удаляемых каждой молекулой
фермента. Поможет ли этот расчет объяснить особенность кинетики?
Механизмы репликации ДНК (МБК 5.3)
5-20 Заполните пропуски в следующих утверждениях.
A. Фермент, ответственный за синтез ДНК как при репликации, так
и при репарации, называется_____________
Б. Активный участок хромосомы, участвующий в репликации, представляет
собой Y-образную структуру, называемую_________________
B. У Е. coli новосинтезированная ДНК кратковременно обнаруживается в
молекулах длиной 1000-2000 нуклеотидов, называемых
Г. Фермент, который сшивает разрывы в ДНК во время синтеза ДНК или ее
репарации, называется________________
Д. Та дочерняя цепь ДНК, которая при репликации синтезируется
непрерывно, называется_____________, а та цепь, которая синтезируется с
перерывами, ______________.
Е. Для ДНК-полимеразы в отличие от РНК-полимеразы совершенно необходим
свободный З'-ОН-конец_________________, спаренной с рас-
плетенной ДНК, чтобы присоединять к нему новые нуклеотиды.
Ж. Если ДНК-полимераза ошибочно присоединит неправильный нуклеотид к
З'-концу, ее отдельный каталитически активный домен, обладающий (3' ->
5')-______________ активностью, удалит не-
подходящее основание.
3. Для инициации синтеза ДНК на отстающей цепи нужны короткие
праймеры, возникающие благодаря работе фермента______________,
которая в качестве субстратов использует рибонуклеозидтрифос-фаты.
И. Расплетание двойной спирали ДНК в зоне репликативной вилки
катализируется ____________, использующей для направленного
движения по ДНК энергию гидролиза АТР.
К. Способствующие расплетанию ДНК _________________ связываются
с одноцепочечной ДНК таким образом, что основания становятся
доступными для реакции матричного синтеза.
JI. Если ДНК-полимераза ошибается при образовании пары оснований,
соединенных друг с другом водородными связями, то ошибка исправляется
специальной системой ________________ (репарации по-
вреждений), которая отличает новые цепи от старых по признаку
метилирования.
М. Для бактерий и некоторых вирусов, инфицирующих эукариотические
клетки, было показано, что репликационные глазки образуются в тех
участках молекулы ДНК, где находятся специальные последовательности,
называемые__________________
Н. можно рассматривать как "обратимые нуклеазы",
которые создают либо кратковременный одноцепочечный разрыв (тип I),
либо кратковременный двухцепочечный разрыв (тип II).
5-21 Укажите, какие из следующих утверждений правильные, а какие -нет.
Если утверждение неверно, объясните почему.
___А. У Е. coli репликативная вилка продвигается вперед со скоростью
Основные генетические механизмы 23
5' 3'
¦ - Р НО
Рис. 5-15. Фрагмент ДНК с одноцепочечным участком, образовавшимся
вследствие разрыва в нижней цепи (задача 5-22).
500 п. н. в секунду, а цепи ДНК перед вилкой вращаются с круговой
скоростью почти 3000 об/мин.
__Б. Полуконсервативная репликация означает, что родительские цепи
ДНК служат матрицами для синтеза новых, дочерних, цепей ДНК, так
что новые двухцепочечные молекулы ДНК оказываются составленными из одной
старой и одной новой цепи.
__В. При считывании в том же направлении (от 5'- к З'-концу)
последовательность нуклеотидов новосинтезированной цепи ДНК получается
такой же, как в родительской матричной цепи.
__Г. Синтез ДНК в направлении от 5'- к З'-концу означает, что удлинение
цепи происходит за счет присоединения дезоксинуклеозид-трифосфатов к
свободной З'-ОН-группе (с отщеплением пирофосфата).
__Д. Синтез ДНК происходит в направлении от 5'- к З'-концу на
ведущей цепи и в направлении от 3'- к 5'-концу на отстающей цепи.
__Е. Если бы полимеризация ДНК происходила в направлении от
