Переключение генов. Регуляция генной активности и фаг - Пташне М.
ISBN 5-03-000854-3
Скачать (прямая ссылка):
Гипотеза о существовании репрессора .................................. 84
Прозрачные и вирулентные мутанты 84
Наблюдения 84
Объяснение 86
Иммунность и гетероиммунность 86
Наблюдения 86
Объяснение 87
Асимметрия бактериальной конъюгации 87
Наблюдения 87
Объяснение 88
Проблема репрессора в начале 60-х гг.................................. 89
Выделение репрессора и его связывание с ДНК .......................... 90
Получение большого количества репрессора ............................. 93
Основные положения гл. 1 и 2 ......................................... 94
Репрессор состоит из двух глобулярных доменов, соединенных мостиком примерно из 40 аминокислот 94
Репрессор димеризуется главным образом благодаря взаимодействию С-концевых доменов 96
Димер репрессора связывается своими N-концевыми доменами с операторным участком длиной 17 пар оснований 97
156
Один операторный участок связывает один димер репрессора 97
Димер образуется до связывания с ДНК 100
С ДНК контактирует N-концевой домен 102
Правый оператор состоит из трех участков связывания репрессора длиной 17 пар оснований каждый Репрессор и белок Сго связываются с одной и гой же стороны двойной спирали в каждом участке связывания 104
Химическое зондирование 105
Мутантные операторы 105
Связывание со сверхспиральной и линейной ДНК 106
Репрессор связывается с тремя операторными участками 0R прояв-тяя при -этом альтернативную попарную кооперативность Кооперативность обеспечивается взаимодействиями между С-концевыми доменами соседних димеров 107
В лизогенных ктегках репрессор обычно связан с 0R 1 и 0R 2 Связанные молекулы репрессора выключают транскрипцию гена а о осуществляющуюся слева направо, и стимулируют транскрипцию гена (I и 1ущую справа налево При более высоких концентра циях репрессор связывается cORl и выктючает транскрипцию с/ 108
Сго вначале связывается с 0R 3 а затем с 0R1 и 0R 2 таким образом он вначале выктючает PRM а затем PR 114
Некоторые общие сведения о бечке Сго 114
Белок Cro in vivo 116
Беток Cro in vitro 117
Белок RecA расщепляет репрессор и тем самым запускает индукцию 118
Связывание Сго с 0R 3 запускает механизм переключения 118
Репрессор и Сго связываются с оператором так как это показано на рис 2 6 2 8 и 2 10 119
Рентгеноструктурный анализ 119
Потучение и свойства «гибридных спиратей» 120
Ро 1ь «рук» л-репрессора 122
Специфические контакты аминокистот с основаниями 123
Репрессор активирует транскрипцию гена d связываясь с Ок2 и контактируя с полимеразой своим N-концевым доменом 124
Мутации нарушающие позитивную регутяцию 124
Позитивная регу 1яция in vitro 127
Заключение ....................................................... 128
Литература ....................................................... 130
Об юры 130
Оригинатьныс статьи 130
Приложение 1 Конструирование белка, эффективно связывающегося с ДНК .......................................... 134
Резюме 134
Специфическое и неспецифическое связывание 134
Увеличение специфичности 137
Увеличение концентрации бе жа 137
Повышение специфичности 1 М
Испо 1ьзование кооперативное™ 138
ДНК-белковые взаимодействия у эукариот 140
Литера!ура: оригинальные статьи .................................. 141