Биология развития млекопитающих - Манк М.
ISBN 5-03-001333-4
Скачать (прямая ссылка):
3.1. Подготовка камеры.................................286
3.2. Подготовка инструментов...........................287
3.3. Инъекция в пронуклеус.............................287
3.4. Возможные затруднения.............................291
3.5. Трансплантация эмбрионов..........................291
4. Скрининг трансгенного потомства..........................292
4.1. Аутопсия хвоста и прищипывание пальца . . . 292
4.2. ДНК из плодов................................... . 294
4.3. Анализ ДНК...........................................295
4.4. Трансгенные мыши и замораживание эмбрионов 296
5. Перенос генов с помощью ретровирусов .... 296
Литература................................................298
Глава 12 Трансплантация ядер в оплодотворенные и пар-теногенетически
активированные яйца. Ш. Бартон, М. Норрис, А.
Сурани...............................................300
1. Введение.................................................300
2. Основная экспериментальная техника..................300
2.1. Культивирование......................................300
2.2. Приготовление препарата вируса Сендай . . . 301
2.3. Оборудование.........................................304
2.4. Изготовление мнкроинструментов.......................305
2.5. Яйца и эмбрионы......................................309
3. Перенос ядер.............................................311
3.1. Установка камеры..................................311
3.2. Установка инструментов...............................312
3.3. Извлечение и перенос ядер............................313
3.4. Другие варианты переноса ядер........................316
3.5. Карпопласты с минимальным количеством цитоплазмы
...................................................318
3.6. Разделение яиц.......................................319
4. Оценка результатов.......................................319
5. Перспективы и ограничения техники трансплантации ядер
яиц млекопитающих.........................................320
Литература................................................321
Глава 13. Низкотемпературная консервация яиц и эмбрионов мыши. Маури Вуд,
Дэвид Уиттингхэм, Уильям
Ролл.............................................................323
1. Введение.................................................323
2. Стадии развития..........................................324
2.1. Источник ооцитов и эмбрионов.........................325
2.2. Сбор ооцитов и эмбрионов.............................325
3. Замораживание ... 326
3.1. Приготовление образца................................327
3.2. Криопротектор........................................330
Оглавление
405
3.3. Индукция образования льда в суспензионной среде:
"сидинг"...................................................332
3.4. Охлаждение...........................................334
3.5. Размораживание.......................................336
3.6. Удаление ДМСО после оттаивания.......................337
3.7. Техника безопасности.................................338
4. Витрификация.............................................338
4.1. Витрификационный раствор.............................339
4.2. Осмотическое уравновешивание (эквилибрация) эмбрионов в
витрификационном растворе .... 340
4.3. Охлаждение.......................................341
4.4. Хранение витрифицированных образцов . . . 342
4.5. Нагрев...............................................342
4.6. Разведение витрификационного раствора . . 342
4.7. Техника безопасности.................................343
5. Хранение образцов........................................343
5.1. Длительность хранения................................344
5.2. Регистрация..........................................344
5.3. Номенклатура........................................ 344
6. Оценка жизнеспособности консервированного материала 345
6.1. Ооциты...............................................345
6.2. Оплодотворение in vitro..............................345
6.3. Эмбрионы.............................................349
6.4. Перенос эмбриона.....................................350
6.5. Общая выживаемость...................................355
7. Криоконсервация ооцитов и эмбрионов человека . 355
Литература................................................355
Глава 14. Оплодотворение ооцитов человека и культивирование человеческих
предимплантационных эмбрионов. Питер
Брауде......................................................357
1. Введение...................................................357
2. Источники ооцитов и эмбрионов человека для проведения исследований
............................................... 357
2.1. Получение ооцитов и эмбрионов........................357
2.2. Донорские ооциты.....................................358
3. Сбор ооцитов..............................................359
3.1. Лапароскопический сбор ооцитов.......................359
3.2. Инструменты для сбора ооцитов путем лапароскопии 360
3.3. Подготовка инструментов для лапароскопии . 362
