Генная инженерия растений. Лабораторное руководство - Дрейпер Дж.
ISBN 5-03-001854-9
Скачать (прямая ссылка):
этого Курса исходила в значительной степени от него.
И наконец, нам бы хотелось поблагодарить за финансовую поддержку
Управление биотехнологии Комиссии по научно-техническим исследованиям
Великобритании и Отдел биотехнологии Министерства труда и промышленности.
Мы также благодарны за щедрость многим компаниям, перечисленным в конце
руководства, которые предоставляли материалы и оборудование, используемые
в Курсе.
Руководство предназначено для исследователей, имеющих некоторый навык
в работе с культурами растительных тканей и знакомых с методами
молекулярной биологии и технологии рекомбинантных ДНК, которые хотели бы
использовать свой опыт в фундаментальных или прикладных исследованиях с
применением трансгенных растений. В целом нами сделана попытка
представить сбалансированный обзор подходов, которые исполь-
Предисловие
7
зуются в генетической инженерии растений, а именно культуры тканей и
клеток растений, манипуляций с векторами и некоторых основных приемов
технологии рекомбинантных ДНК, техники переноса генов и современных
молекулярных аналитических методов "зучеиия белков .и нуклеиновых кислот.
В каждой области мы старались изложить теоретические основы методов,
чтобы помочь опытному исследователю, однако учебник представляет собой
прежде всего практическое руководство.
Мы постарались представить исчерпывающий обзор современных методов
генетической трансформации растений и, насколько это возможно, подходов к
анализу экспрессии генов. Представляя читателю громадное число видов
растений и широкую область молекулярных технологий, неизбежно пришлось
опустить некоторые важные методы. Чтобы внести ясность, следует также
отметить, что для описания различных приемов трансформации и
разнообразных молекулярных процедур были использованы вполне определенные
растительные системы. Следует иметь в виду, что большинство протоколов
предназначено в качестве руководства для разработки аналогичных методик
для других типов растительного материала.
Генетическая инженерия растений возникла из небытия десятилетие назад,
чтобы превратиться в основной предмет как фундаментальной молекулярной
генетики эукариот, так и коммерческой биотехнологии. Возможности будущего
использования этой технологии огромны, и следующее десятилетие обещает
быть захватывающим.
Джон Дрейпер
Список авторов
/. Draper, R. Scott, Ph. Armitage, G. Dury, L. Jacob
Botany Department, University of Leicester, University Road,
Leicester LEI 7RH UK R. Walden
Leicester Biocentre, University of Leicester A. Kumar
Department of Genetics, University of Leeds, Leeds LS2 9JT UK
R. Jefferson
Department of Molecular Genetics, Plant Breeding Institute, Maris
Lane, Trumpington, Cambridge CB2 2LQ UK /. Hamil
Institute of Food Research, Colney Lane, Norwich NR4 7UA UK
Список сокращений
АБК - абсцизовая кислота
6-БАП - 6-бензиламинопурин
БЭ - бромистый этидий
ВМЦК - вирус мозаики цветной капусты
ДМА - диметилаллил
2,4-Д - дихлорфеноксиуксусная кислота
ДСН - додецилсульфат натрия
ДТТ - дитиотреитол
ИПТГ - изопропилтио-р-О-галактопиранозид
ИУК - индолилуксусная кислота
л - линейная форма молекулы ДНК
МС - малая субъединица
МЭ - меркаптоэтанол
НУК - нафтилуксусная кислота
ПААГ - полиакриламидный гель
п. н. - пары нуклеотидов
РБФКО - рибулозобисфосфаткарбоксилаза/оксигеназа
РБФК/О/МС - ген малой субъединицы рибулозобисфосфат-
карбоксилазы/оксигеназы ТАЭ - буфер,
содержащий 400 мМ трис-ацетат и
10 мМ ЭДТА
ТНС - триизопропилнафталинсульфонат
т. п. н. - тысячи пар нуклеотидов
ТХУ - трихлоруксусная кислота
ТЭ-буфер - буфер, содержащий 10 мМ трис-НС1 (pH 7,5)
и 1 мМ ЭДТА ФМСФ -
фенилметилсульфонилфторид
ЭДТА - этилендиаминтетрауксусная кислота
Ас - ацетосирингон
acs - ген агроцинопинсинтазы
Ар - ампициллин
Арг - устойчивость к ампициллину
В1 - блеомицин
Cab - хлорофилл а/Ь-связывающий белок
