Наркомания. Нейропептид Морфиновые рецепторы - Зайцев С.В.
ISBN 5-211-02349-8
Скачать (прямая ссылка):
В связи с тем что да-ларгин предназначался для лечения людей, данные, полученные на собаках, сопоставлялись с результатами, полученными при одноразовом введении 1 мг двум здоровым добровольцам. Анализ изменения опиатной активности у людей проводили по той же схеме, что и в эксперименте с собаками.
Введение испытуемым даларгина сопровождалось кратковременным ощущением жара в области лица, тяжести в затылке, чувством кол'ка в горле. Указанные ощущения не носили явно выраженного характера и полностью исчезали через 1-2 мин после введения npenapaia. Фармакокинетические кривые даларгина у людей, полученные с использованием радиорецепторного метода, как и в -н сиеримепге на собаках, хорошо описываются двумя эк-спонеы тыльными членами (рис. 6.4) Соответствующие кривым фармакокинетические параметры представлены в табл. 6.3.
Проведенное налш сравнительное изучение фармакокинетики даларгина у людей и собак позволяет сделать следующие вы-
1п[С]
Рис. 6.3. А. Кинетическая кривая изменения опиатной активности в плазме крови собаки при внутривенном введении даларгина в дозе 50 мкг/кг, определение Cj2- Б. Определение Cjj
Таблица 6.2 Параметры двухэкспоненциальной кривой, описывающей изменения опиатной активности в плазме крови собак от времени при внутривенном введении даларгина
Доза, Количест (-Al)"1, Сц, (-W1, * ' О
мкг / кг во экспе мин нМ мин ........
риментов
10 1 изменений опиатной активности не наблюдается
20 2 2,6 500 - -
50 3 1,54±036 960±810 104±50 0,92±0,37
60 1 5,9 6300 80 234
80 1 3,0 1585 54 5,0
100 3 5,0±1,1 2605±1895 85i5 19,6±10,5
Таблица 6.3
Кинетические параметры изменения опиатной активности в плазме крови человека при внутривенном введении даларгина
Доза, Количество (-Al)"1, Сц, (-А2Г1, С12,
мг испытуемых мин нМ мин нМ
1 2 4,1 235 88 40
Таблица 6.4
/С50 вытеснения опиатных лигандов даларгином и его N-концевыми фрагментами, нМ
Исследуемый пептид Морфин D-Ala2, D-Leu5- Налоксон Налоксон
энкефалин -Na+ + Na+
Tyr-D-Ala-Gly-Phe 98 18 56 100
Тут-D-Ala-Gly-Phe-Leu 56 32 45 100
Тут-D- ASa-Gly-Phe-Leu- Arg 15 28 24 65
воды: характеристические времена и параметры у человека и
собаки удовлетворительно совпадают (табл. 6.2, 6.3). Основное изменение радиорецепторной активности (> 85%) в обоих случаях протекает быстро, с характеристическими временами порядка
1-6 мин. ]\Денее 15% общей исходной радиорецепторной активности “выводится” относительно медленно, со временем порядка
1-2 ч. Полученные данные говорят о том, что либо вводимое вещество действует на организм при высоких концентрациях, но очень быстро, включая какие-то триггерные механизмы ответа, либо основное воздействие даларгина обусловлено его продолжительным (до нескольких часов) действием при низких концентрациях, либо, наконец, основное влияние на организм связано с метаболитами этого вещества.
Кинетические кривые рис. б.З, 6.4 отражают изменение радиорецепторной активности. Опиатной активностью помимо самого гексапептида даларгина обладают также пентапептид Tyr-D-Ala-Gly-Phe-Leu и тетрапептид Tyr-D-Ala-Gly-Phe, образующиеся при отщеплении С-концевых Arg и Leu-Arg (другие возможные продукты гидролиза даларгина опиатной активностью не обладают, так как для связывания с рецепторами необходимо одновременное наличие N-концевого Туг и в четвертом положении Phe (Ariens et al., 1979;
Kosterlitz, 1982). Проведен- Рис, 6.4. А. Кинетическая кривая изме-НОе нами исследование С нения опиатной активности в плазме кро-целью выявления ВОЗМОЖ- *и человека при внутривенном введении
1 мг даларгина, определение Oi2- ?>. (Jn-НОСТИ раздельного специ- ределение Сп
фического вклада даларгина и его отдельных метаболитов с использованием лигандов, специфичных к тем или иным рецепторам (табл. 6.4), показало, что указанные три пептида не обладают выраженной специфичностью к какому-либо одному типу рецепторов и по опиатной активности сравнительно мало отличаются друг от друга. Последнее не позволяет в рамках разработанного нами метода прямого определения опиатной активности в плазме крови животных проводить раздельное измерение концентрации даларгина и пента- и тетрапептида.
С целью выяснения, в какой степени фармакокинетические кривые отражают изменение концентрации даларгина или же его метаболитов, параллельно с изучением фармакокинетики даларгина у людей радиорецепторным методом было проведено измерение концентрации вводимого вещества радиоиммуноло-гическим методом, с использованием сывороток, специфичных только к самому даларгину (Зайцев с соавт., 19866). Использование радиоиммуноанализа не позволило зафиксировать значимые количества даларгина уже через 2 мин после введения пептида в дозах 1 и 5 мг. После инъекции 10 мг препарата на 2-й мин концентрация даларгина составила 50 нг/мл, на 4-й мин - 2 нг/мл, на 6-й мин и в последующие промежутки времени даларгин в крови не определялся. Следовательно, после внуг-
