Наркомания. Нейропептид Морфиновые рецепторы - Зайцев С.В.
ISBN 5-211-02349-8
Скачать (прямая ссылка):
а) стабильность опиоидных рецепторов по отношению к процессу комплексообразования 6-лиганда D-Ala2, Б-Ьеи5-энкефалина выше, чем в случае /i-агониста морфина, что лишний раз подтверждает различие процессов связывания /i- и 6-лигандов;
б) инертная среда (атмосфера аргона) резко повышает сохранность опиоидных рецепторов. Последнее в свою очередь позволяет заключить, что при хранении препаратов мембран помимо термоинактивации протекают инактивационные процессы с участием, по всей видимости, кислорода и, вероятно, связанные с окислением SH-групп рецепторов.
Итак, препараты лиофилизованных мембран обладают высокой стабильностью. В ампуле, в атмосфере аргона, лиофилизо-ванньи г>избраны могут храниться по крайней мере в течение года лаже при комнатной температуре, в то время как мембранные препарат1-!, хранящиеся в замороженном состоянии при -13° и —Зо&С, инактивируются уже в течение месяца. Таким образом, препараты лиофилизованных мембран обладают всеми свойствами =' щецифичностью к лигандам, чувствительностью
'Г а б л и ц а 5 . (> Стабильность лиофьлпэованных Ait л(прапных пре пар* тпри гранении в различных условиях « тс'ание 4 Met (в от уровня исходной активности)
Лиганд Условия хранения
5° С, комнат пая ампула, ампула IIо.1
ВОЗДу X температура, воздух, аргоном,
воздух комнатная комнатн ал
темнерату ри т гмперагу ра
Н алоксон 72 31 100
Морфин 80 48 100
D-Ala2,
D-Leu5- 100 59 54 100
=ШК<?Ф АЛИН
иенам, высокими значениями констант связывания), необходи .!ыми для качественного и количественного радиорсценторногг анализа опиатов и опиоидных пептидов.
VI. ФАРМАКОКИНЕТИКА МОРФИНА И НЕЙРОПЕПТИДОВ ЭНКЕФАЛИНОВОГО РЯДА В ОРГАНИЗМЕ ЖИВОТНЫХ И ЧЕЛОВЕКА
О I вет организма на действие опиатов и опиоидных пептидов определяется концентрацией комплексов этих соединений с рецепторами. Концентрация лиганд-рецепторных комплексов в свою очередь зависит как от концентрации рецепторов и сродства лигандов к ним, так и ох концентрации лиганда вблизи рецепторов Следовательно, это ставит задачу изучения распределения кон-цен граций данных соединений в различных тканях организма, их изменения во времени, т.е. проведения фармакокинетических исследований.
Вопросы изучения распределения и выведения опиатов, в частности морфина, кз организма животных у к • давно лежат в центре внимания различных групп исследователей (Wood, 1954; Сер-ге.>в. Сейфулла, Осняк, 1974; Fink et al., 1977, Gurkan, 1978; Catliri. 1977; Misra. 1978; Hug, 1984) Установлен факт метаболизма морфина в печени, выведение опиата с почками. Показано, что только 2% опиата проникает через гематоэнцефалический барьер (ОЫеп-dorf et al., 1972). При изучении фармакокинетики морфина, как и многих других физиологически активных веществ, основное внимание исследователей было обращено прежде всего на анализ изменения концентрации опиата в крови в зависимости от времени, прошедшего после введения препарата (Сергеев, Сейфулла, Осняк, 1974; Berkowitz et al., 1974; Stanski et al., 1978). Это обусловлено как исключительной важностью системы крови как ткани, омывающей все остальные органы и ткани организма и транспортирующей вещес!ва и .метаболиты к ним, так и удобством крови как тест-ткани, что в свою очередь связано с относительной легкостью отбора проб крови для анализа в процессе исследования без нарушения целостности организма и его функционирования.
Число рлбо"- но изучению кинетики изменения в организме концентрации опиоидных пептидов значительно меньше, чем работ по они ягам. Описаны результаты исследования изменения во вре. . гг. концентрации /2-эндорфина в крови при внутривенном введен; и ¦ Aronin ч al., 1981; Sato et al., 1984), данные no фармакокинетике ..-‘Чцин- >нкефалина (Begley, Chain, 1981).
VI. 1. ФАРМАКОКИНЕТИКА. МОРФИНА В ПЛАЗМЕ КРОВИ СОБАК
При изучении фармакокинетики опиатных лигандов ключевую роль играет выбор метода анализа концентраций данных соединений. Основные требования, предъявляемые к методу, - оысокал чувствительность и специфичность. К сожалению, обычно применяемый при фармакокинетических исследованиях радиоиммуно-логический метод анализа (Spector, 1971; Gatlin, 1977) не специфичен к “физиологически активному” морфину, поскольку измеряет также концентрации некоторых метаболитов, в частности мор-фин-3-глюкуронида, не взаимодействующих с рецепторами. В то же время получение сывороток, не чувствительных к основному метаболиту морфина - морфин-3-глюкурониду, представляется достаточно сложной задачей (Berkowitz et al., 1974).
Для изучения фармакокинетики опиатных лигандов авторами (Зайцев с соавт., 1986; Сергеева с соавт., 1986) предложен радиорецепторный метод анализа на основе препаратов лиофилизо-ванных мембран (Зайцев с соавт., 1983; Сергеева с соавт., 1986). Преимущество этого метода заключается в том, что с помощью него измеряются только те формы лиганда, которые обладают “рецепторной активностью”. К морфин-3-глюкорониду данный метод, например, не чувствителен. При этом если в системе находится несколько опиатных лигандов, то метод дает их эффективную суммарную концентрацию, выражаемую в эквивалентах (единицах) концентрации соединения, по которому производится калибровка (Варфоломеев, Зайцев, Мевх, 1985).
