Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Медицина -> Зайцев С.В. -> "Наркомания. Нейропептид Морфиновые рецепторы " -> 51

Наркомания. Нейропептид Морфиновые рецепторы - Зайцев С.В.

Зайцев С.В., Ярыгин К.Н., Варфоломеев С.Д. Наркомания. Нейропептид Морфиновые рецепторы — МГУ, 1993. — 256 c.
ISBN 5-211-02349-8
Скачать (прямая ссылка): narkomaniya1993.djvu
Предыдущая << 1 .. 45 46 47 48 49 50 < 51 > 52 53 54 55 56 57 .. 108 >> Следующая

ть
\ i*I X 2S3
Inin А/'ТЧЧ ] МАХ

W-
[//]¦*¦ A [l]
Рис. 5.2. Определение чувствительности ([L]mjn), точности (A[L]/[L]) и максимальной достоверно определяемой концентрации [L]max радиорецепторного анализа
дента (Rodbard, 1978; Зайцев, Сергеева, Варфоломеев, 1985) . [В*]0 - [B*]i
/_1_ + _L
• V По П1
где По, ni _ количество измерений концентраций [В*]о и [B*]i соответственно, ta - граница одностороннего критерия Стьюдента с соответствующим уровнем значимости а и степенями свободы np + ni — 2. Из соотношения (5.3) видно, что наименьшее отличие [B*]i от [В*]о будет наблюдаться при t = ta. В этом случае:
Д[В*]0 = [В*]0 - [В*],
t«s и/- + —
По щ
(5.4)
и при фиксированных значениях ta, По, ni определяется в первую очередь величиной Si. Во многих случаях, в частности, как установлено нами, при радиорецепторном анализе опиатов и опиоидных пептидов, относительная ошибка измерения [В*] постоянна (см. гл. II), в силу чего S прямо пропорциональна [В*]:
S = е[В*],
где ? - относительная ошибка определения [В*]. Следовательно,
где
Д[В*]0 = [B*]0ta?
71 = ta?
- + -7 = ti!B']o, По ni
1 1
-------1--------,
n0 ni
(5.5)
(5.6)
(5.7)
и чувствительность радиорецепторного метода анализа равна (рис. 5.2)
Иг
д[в*; о _
dCB‘] 0 d[B*]
d[L] dtL]
(5.8)
где
d[Lf
- абсолютное значение производной зависимости [В*]
от [L] при [L]=0. Полученное' выражение показывает, что [L]m;n тем ниже, т.е. чувствительность анализа тем выше, чем больше
(т.е. чем круче кривая) и меньше величи-
значение
ёШ
dL
на [В*]0. Дифференцирование уравнения (5.8) по [L] позволяет найти выражение для производной:
d[Bi _ ради (?)
dW [К* (l + + [L*]2 ’
129
подставляя которое совместно с уравнением (5.2) в соотношение
d[Lf
концентра-
(5.8) и учитывая, что при определении [В*] и
ция лиганда [L] равна нулю, можно легко получить выражение для чувствительности анализа в случае простейшей схемы (5.1):
[Ljmir
71
1 +
К* тг*
НС
[R]o
1 +
[L1
К*
1 +
[L1
К*
(5.10)
mi к*
Анализ уравнения (5.10) позволяет сделать следующие выводы: 1) чувствительность анализа возрастает с уменьшением ошибки определения [В*], характеризуемой параметром 7i; 2) [L]min прямо пропорциональна константе диссоциации немеченого лиганда К, поэтому ра-диорецепторный анализ необходимо проводить в условиях, обеспечивающих максимальное сродство немеченого лиганда, т.е. при оптимальных значениях температуры, pH и определенном ионном составе среды; 3) чувствительность анализа тем выше, чем меньше отношение
Рис. 5.3. Зависимость чувст- ]/^ ¦ Последнее говорит о це-вительности анализа от концен- лесообразности проведения анализа трации меченого лиганда при ПрИ концентрациях меченого лиган-К-К =5 нМ, [R]0=0,2 нМ, Гт«1 г-» Т-, ,r tn*
Кнс*=о,005 да [L J <с К . Выражение (5.10) дает
тенденцию изменения [L*] с целью оптимизации чувствительности. Однако практически нет необходимости. а иногда и возможности использовать концентрацию [L*] меньше 0,1—0,2 величины К*, поскольку, с одной стороны, это реально не дает сколь-нибудь существенного увеличения чувствительности метода (рис. 5.3), а с другой - при низкой удельной радиоактивности меченого соединения приведет к тому, что регистрация радиоактивного счета с заданной точностью, связанного с мембранами меченого лиганда, окажется слишком длительной (табл. 5.2). В этой связи в радиорецептор -ном анализе следует отдавать предпочтение лигандам, меченным йодом-125 или тритием. При этом в случае трития желательно, чтобы лиганды имели специфическую радиоактивность не ниже 10-20 Ки/ммоль.
Из соотношения (5.10) также следует, что чувствительность радиорецепторного метода анализа тем выше, чем меньше от-к* к*
ношение -fl?i—. и зависит, в частности, от величины константы
jrljo
Таблица 5.2
Зависимость времени счета радиоактивности образца от удельноЪ активности меченого лиганда
Удельная [L*], нМ [L*]/K* Уровень радиоактив Io/% Время Время
активность ности связанного ме счета счета
(Кюри/ ченого соединения образца, фона,
расп/мин имп/мин
15 0,05 0,01 50 20 2 135 100
Предыдущая << 1 .. 45 46 47 48 49 50 < 51 > 52 53 54 55 56 57 .. 108 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed