Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Медицина -> Зайцев С.В. -> "Наркомания. Нейропептид Морфиновые рецепторы " -> 45

Наркомания. Нейропептид Морфиновые рецепторы - Зайцев С.В.

Зайцев С.В., Ярыгин К.Н., Варфоломеев С.Д. Наркомания. Нейропептид Морфиновые рецепторы — МГУ, 1993. — 256 c.
ISBN 5-211-02349-8
Скачать (прямая ссылка): narkomaniya1993.djvu
Предыдущая << 1 .. 39 40 41 42 43 44 < 45 > 46 47 48 49 50 51 .. 108 >> Следующая

заметить, что ингибирующее действие ионов Zn2+ на опиоид-ные рецепторы ряд авторов объясняют взаимодействием ионов с SH-группами рецепторов (Mantullo et al., 1978; Jivanni, Bromfield, 1980; Stengard-Pedersen, 19&2).
-Ц [берапанал],м -Iq [Ьераламил], И
Рис. 4.17. Эффект верапамила на
уровень связывания 3H-D-Ala2, D-Leu5-анкефалина с высокоаффинным и низкоаффинным центрами; Д - уровень
связывания 3H-D-Ala2, 0-Ьеи5-анкефа-лина с высокоаффинным центром после отмывки от верапамила (в % от связывания в отсутствие верапамила); буфер В, ЗТ°С
Рис. 4.18. Влияние верапамила на константу диссоциации комплекса иона Са2+ с высокоаффинным центром связывания 3Н-D-Ala2, 0-Ьеи5-анкефалина К^-,а2; буфер В, 37°С
Ранее нами было показано активирующее влияние ионов Са2+ на связывание D-Ala2, 0-Ьеи5-знкефалина с 6-рецептором. В этой связи большой интерес представляло выяснить, как будет влиять антагонист ионов Са2+, классический блокатор Са2+-каналов ве-рапамил на связывание D-Ala2, 0-Ьеи5-энкефалина с рецепторами (Породенко с соавт., 1985). Соответствующие результаты приведены на рис. 4.17 и говорят о том, что верапамил обратимо ингибирует только связывание D-Ala2, 0-Ьеи5-энкефалина с 6-рецепторами (IC5o=0,3-10~4 М). При этом, как видно из рис. 4.18, верапамил не препятствует проявлению активирующего эффекта ионов Са2+: константа активирующего влияния ионов Са2+ на 6-рецептор не изменяется в присутствии верапамила,. Полученные данные позволяют заключить, что антагонист ионов Са2+ верапамил не конкурирует с ионами Са2+ за катионсвязывающий участок 6-рецептора.
IV.4. МЕХАНИЗМ РЕГУЛЯЦИИ ДВУХ- И ТРЕХВАЛЕНТНЫМИ ИОНАМИ МЕТАЛЛОВ СВЯЗЫВАНИЯ 3Н-МОРФИНА С ОПИОИДНЫМИ РЕЦЕПТОРАМИ
Таблица 4.7
Параметры связывания 3Н-морфина с супервысоко- и высокоаффинными центрами связыв ания * в различных условиях инкубации.
Температур а 37° С
Условия Константа Концентрация цент
диссоциации ров связывания,
пмоль/мг белка
^1набл К 2 набл [R-i]o tR2lo
Контроль 0,87 13,20 0,0068 0,160
(буфер В) (1)
Препарат, пре- 0.85 14,50 0,0060 0,155
инкубирован-
ный с ЭГТА (2)
То же, что 0,80 2,85 0,0054 0,143
(2) + 1 мМ Мп2+
То же, что 0,69 2,97 0,0049 0,160
(2)+0,1 мМ Ni2+
То же, что 0,77 3,40 0,0059 0,150
(2)+Л,5 мМ La3+
То же, что 0,80 25,30 0,0058 0,155
(2)4-10 мМ Са2+
П р имсчание.* В силу высокой ошибки определения параметров низкоаффинного центра связывания морфина параметры этого центра в таблице не приводятся.
Таблица 4.8
Поглощение растворов комплексов ионов металлов с индикаторами (D) в присут ствии 3 мМ морфина (I) и в его отсутствие (II) в буфере В при 37° С
Ион Индикатор Х\, нМ I*) II**) Концентрация
металла ионов, дейст
вующая на свя
зывание морфина
Са2'*’, 20 мкМ Арсеназо-Ш, 50 мкМ 655 0,18 0,16 1-5 иМ
Мп2"*", 20 мкМ Арсеназо-Ш, 50 мкМ 622 0,360 0,361 50-100 мкМ
Ni2+, 20 мкМ Цинкон, 0,5 мМ 660 0,223 0,214 1-5 мкМ
La2+, 20 мкМ Арсеназо-Ш, 50 мкМ 611 0,564 0,577 0,1-0,5 мМ
*) В кювете сравнения - индикатор.
**) В кювете сравнения - индикатор+морфин.
С самого момента открытия рецепторов морфина вопросы ионной регуляции рецепции опиатов приковывали пристальное
внимание исследователей (Abood et al., 1977; Blume, 1978; Snyder, Childers, 1979: Балашев с соавт., 1981; Bowen et al., 1981; Pfeiffer et al., 1981; Pfeiffer et al., 1982; Hoffman et al., 1982; Sadee et al., 1982), однако механизм этого процесса до настоящего времени не был установлен. В связи с этим нами была поставлена задача изучения механизма влияния ионов щелочноземельных и переходных металлов на процесс комплексообразования 3Н-морфина с опиоидными рецепторами головного мозга крыс (Порденко, Зайцев, Варфоломеев, 1985; Чичен-ков с соавт., 1985). С ••этой целью были использованы подходы, разработанные выше для анализа процесса связывания 3H-D-Ala2, D-Leu5-3H-кефалина. Результаты проведенного исследования представлены в табл.
4.7-4.9 и позволяют сделать следующие выводы. Во-первых, преинкубация мембранных препаратов с ЭГТА и последующее добавление ионов металлов не влияет на параметры связывания 3Н-морфина с супервысокоаффинным ц\- центром (табл. 4.7). Во-вторых, ионы двух- и трехвалентных металлов значительно изменяют сродство //-рецептора к этому лиганду, практически не оказывая влияния на концентрацию рецептора (табл. 4.7). Поскольку, как это следует из табл. 4.8, исследуемые ионы не связываются с морфином при действующих концентрациях, эффекты ионов можно отнести к их взаимодействию с катионсвязывающим участком рецепторного комплекса. Обратимость эффектов ионов, гиперболический характер зависимости наблюдаемой константы диссоциации комплекса металла с высокоаффинным центром (К2 набл) °т концентрации иона металла (рис. 4.19, 4.20), влияние ионов металлов на pH-зависимость связывания 3Н-морфина с высокоаффинным центром (рис. 4.21) говорят о том, что механизм влияния ионов на этот центр описывается схемой (4.5), предложенной выше для процесса комплексообразования 3H-D-Ala2, Б-Ьеи5-энкефалина с его низкоаффинным центром связывания. В табл. 4.9 приведены значения К^е2 и а> полученные для линеари-
Предыдущая << 1 .. 39 40 41 42 43 44 < 45 > 46 47 48 49 50 51 .. 108 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed