Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Медицина -> Зайцев С.В. -> "Наркомания. Нейропептид Морфиновые рецепторы " -> 44

Наркомания. Нейропептид Морфиновые рецепторы - Зайцев С.В.

Зайцев С.В., Ярыгин К.Н., Варфоломеев С.Д. Наркомания. Нейропептид Морфиновые рецепторы — МГУ, 1993. — 256 c.
ISBN 5-211-02349-8
Скачать (прямая ссылка): narkomaniya1993.djvu
Предыдущая << 1 .. 38 39 40 41 42 43 < 44 > 45 46 47 48 49 50 .. 108 >> Следующая

RH+ + LH RH+LH
01+
I R L" (4.9)
| v\Me V\KL
i КМе^ч
[ ЛMe + LH ~ RMeLH
где константа ионизации ионогенной группы реценто-
I ра, Ко “истинная” константа диссоциации лиганд-рецепторпого
| комплекса.
Нетрудно показать, что в соответствии со схемой (4.9) выражение для К2набл запишется следующим образом:
Г
у _ у (‘ + I^l) {Кмс2 (‘ + $?) + [Ме)} п ,П1
К2набл - к2----------- -----ffppj —-------------------------. (4.10)
Кме2 к~ + [Me]
Выражение (4.10) приводится к виду (4.3), если положить, что в уравнении (4.3) параметры
[Н+]
1+га
К FU
Рис. 4.13. Влияние ионов Са“^" на pH-зависимость константы диссоциации комплекса 3H-D-Ala2, D-Leu5 -энкефалина с высокоаффинным центром связывания. 1 - препарат, преинкубированный с ЭГТА; 2 - то же, что и (Л+6 мМ СаСЬ; 3 - то же, что и (У)+5 мМ СаС12; буфер Г, 37 С
Таблица 4.6
Истинные равновесные константы диссоциации комплексов ионов металлов с 6-р ецептор ом
Ион металла KMe21 mkM
Са'2+ 370±32
Sr2+ 510±67
Мп2+ 75±20
Mg2+ 850±220
La3+ 17±4
Nd3+ 4±1
Sm3+ 0,9±0,2
Eu3+ 1,0±0,16
Gd3+ 0,54±0,18
Co2+ 5000
Ni2 + 5000
Кме2 — Кме2 ^1 + —. (4.12)
Ki = K2^^(l + |ij). (4.13)
“R2
При этом параметры о и К^е2 характеризуют состояние
110
ионизации <5-рецептора, параметр - <5-рецептора и лиганда.
Вычисленное с использова- ^ нием выражения (4.11) зна- j
чение 1/а равно 3,95 и близко к значениям 1/а, приве- ’ денным в табл. 4.5. В пользу схемы (4.9) свидетельствуют также экспериментальные данные, представленные на рис. 4.14. В соответствии с уравнением (4.12) константа К^е2 должна линейно зависеть от концентрации ионов водорода. Согласно рис. 4.14, К^а2 действительно линейно возрастает с увеличением [Н+]. Последнее дает возможность определить величину “истинной” , независимой от pH константы Кса2, а также значение константы Kr2. Вычисленное с помощью этой кривой значение Ки равно 7,0, Рис. 4.14. Зависимость коне
социации комплекса Са с
что совпадает со значени-
танты дис-высокоаф-
фипным центром связывания 3Н-Г)-А1а~, ем, найденным при изуче- Д,
IT D-Leu -эикефалина „ от концентрации
нии влияния pH на связыва-
, ионов водорода в среде инкубации: буфер
ние энкефалина в отсутствие р 37°с
ионов металлов. Подобным
же образом можно определить величины Кса2 и для ряда других ионов (табл. 4.6). С использованием выражения (4.10) и данных, приведенных в табл. 4.6, можно рассчитать теоретические кривые зависимостей рК^набл от pH в отсутствие и в присутствии ионов металлов. Из рис. 4.13 видно, что теоретические кривые хорошо описывают экспериментальные результаты. Это говорит в пользу справедливости схемы (4.9) в диапазоне значений pH 6,2-8,3.
Итак, ионы металлов по-разному влияют на взаимодействие D-Ala2. D-Leir’-энкефалина с высоко- и низкоаффинными центрами связывания. В случае низкоаффинпого центра параметр а характеризует эффект усиления ионами сродства рецептора к лиганду. В случае высокоаффинного центра связывания параметр а отражает катионные равновесия рецешора. При этом как К л |, .. т;и< и K\(i„3 зависят не только от сродства иона к ре-П'чито; KDTft'ibiM взаимодействуют ионы металлов, но и от
к«шц< птпаиии ионов водорода.
IV.3. ИОНЫ Zn2+ И ВЕРАПАМИЛ КАК ИНГИБИТОРЫ СВЯЗЫВАНИЯ 3H-D-Ala2, Б-Ьеи5-ЭНКЕФАЛИНА С 6-РЕЦЕПТОРОМ
Выше были подробно рассмотрены механизмы активирующего влияния двух- и трехвалентных ионов на высоко- и низкоаф-финлые т итры связывания D-Ala2, 0-Ьеи5-энкефалина. Интерес представляет также изучение влияния ионов-ингибиторов на связывание лиганда. С этой целью нами было исследовано влияние ионов Zni+ на комплексообразование D-Ala2, 0-Ьеи5-энкефалина с д- и //-рецепторами (Породенко, Зайцев, Варфоломеев, 1985).
Рис. 4.15. Эффект ионов Zn“^“ на \ровеиь связывания 3H-D-Ala2, D-Leu'r'-ункефалина с высокоаффинным и низкоаффинным центрами (в % от связывания в отсутствие ионов); буфер В, :! 7 0 С
Рис. 4.16. Влияние ионов Zn2+ на константу диссоциации ком-плекса иона Са2+ с высокоаффинным центром связывания 3Н-D-Ala2, D-Leu5 -энкефалина Кг1,,?; буфер В, 37°С
Соогв* I "твующие экспериментальные результаты приведены па |)И'- 1 15 и позволяют сделать следующее заключение:
ионы Zip' вплоть до концентраций 25 мкМ практически не оказываю! влияния на уровень связывания лиганда с //-рецептором, обратимо ингибируя связывание лиганда с «5-рецептором мк.М). Проведенное в дальнейшем исследование влияния ионов Zip'* на действие селективных активаторов связывания лигандов с (Vpeuc нторами ионов Са2+ показало (рис. 4.16), что ионы Zip"' не изменяют значение константы К'Са2, а значит, и не конкурируют с ионами Са2+. Отсюда можно сделать вывод, чю ионы Zm*'4" не взаимодействуют с описаипым выше регуляторным 1-U ! бывающим уЧаеТКОМ рецептора ! "Л‘'дует
Предыдущая << 1 .. 38 39 40 41 42 43 < 44 > 45 46 47 48 49 50 .. 108 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed