Наркомания. Нейропептид Морфиновые рецепторы - Зайцев С.В.
ISBN 5-211-02349-8
Скачать (прямая ссылка):
Первая точка зрения впервые получила подтверждение в опытах по ингибированию связывания /i-лигандов лигандами 6-рецепторов и наоборот (Chang, Cuatrecasas, 1979). Оказалось, что морфин и его аналоги способны подавлять специфическое связывание тритированного 6-агониста pH] Туг1, D-Ala2, 0-Ьеи5-энкефалина с мембранами, выделенными из мозга. При этом кривая ингибирования сдвинута вправо по сравнению с кривыми для 6-лигандов. Наоборот, энкефалины способны ингибировать связывание /х-аго-ниста 3Н-дигидроморфина, хотя и хуже, чем это делает морфин. На основании этих данных была выдвинута гипотеза о двух типах относительно специфичных центров связывания (двухцентровая модель). Согласно этой модели, морфин с относительно высокой аффинностью взаимодействует с /i-рецепторами и с относительно низкой аффинностью - с 6-рецепторами. Энкефалины, наоборот, предпочтительно связываются с 6-центрами и менее прочно - с центрами типа //. Селективность по отношению к //- и 6-рецепторам у разных наркотических анальгетиков-производных морфина неодинакова.Такал же картина наблюдается в ряду энкефалинов и их аналогов. В частности, используемый в цитируемой работе стабильный аналог D-Ala2, 0-Ьеи5-энкефалин обладает более выраженной 6-селективностью, чем природные энкефалины. На основе энкефалинов были синтезированы пептиды, обладающие еще более высокой избирательностью по отношению к 6-рецеп-торам, например Thr2, Leu5, ТЬг6-энкефалин (DTLET), а также пептиды с очень высокой избирательностью к //-рецепторам, например, Tyr-D-Ala-Gly-(NMe)Phe-Gly-ol (DAGO, RX-783006) (Handa et al., 1981; Zajac et al., 1983). С другой стороны, были синтези-
рованы непептидные опиоиды, избирательно взаимодействующие с 6-центрами. Так, N-циклопропилметил-Т-а-метилфумароилами-до-6,14-эндоэтенотетра-гидронорорипавин (NIH 10236) является необратимым антагонистом этих центров (Jacobson et al., 1983). Гипотеза двух центров в первом приближении удовлетворительно объясняет криволинейность изотерм связывания морфина, дигидроморфина и энкефалинов, а также закономерности ингибирования этими веществами вызванных электрической стимуляцией сокращений ПКМС и СПМ.
Наряду с гипотезой двух относительно специфичных центров связывания //- и 6-лигандов существуют и другие. Было предположено, что /х- и 6-рецепторы представляют собой две конформации одного белково-липидного надмолекулярного комплекса (Lee, Smith, 1980). Этот комплекс несет два центра связывания. Центр, специфически связывающий энкефалины, находится на белковой части комплекса, а участок, избирательно взаимодействующий с опиатными алкалоидами, локализован в липидной области. Длинные пептиды типа /?-эндорфина, обладающие амфифильными свойствами (Taylor, Kaiser, 1986), могут взаимодействовать с двумя центрами. Данные, полученные при работе с солюбилизированными рецепторами, противоречат этой гипотезе.
Roth man и Westfall (1982) предложили модель гллостерическо-го взаимодействия //- и 6-рецепторов (Rothman, Westfall, 1982а. b). Предположив, что энкефалины связываются лишь с 6-рецепторами. а опиаты с //-рецепторами, авторы утверждают, что ингибирование комплексообразования меченый энкефалин-рецептор в присутствии опиатов можно объяснить тем, что последние, занимая //-центры, уменьшают количество 6-рецепторов по аллосте-рическому механизму. Энкефалины аналогично влияют на мор-финовые рецепторы. Слабость этой модели заключается в ее недостаточной обоснованности с точки зрения кинетики лиганд-рецепторного взаимодействия.
Пастернак с соавт. (Pasternak et al., 1983; Pasternak, Wood, 1986) предложили трехцентровую модель, суть которой заключается в следующем. Наряду с морфин-сел ективными /Хг- рецепт о рами и энкефалин-селективными 6-рецепторами, существуют общие для морфина и энкефалинов рецепторы //ь с которыми названные лиганды связываются с аффинностями, более высокими, чем при взаимодействии с //2 и 6-центрами. Доказательства существования //i-рецепторов основываются на результатах биохимических и фармакологических экспериментов с использованием необратимых опиатных антагонистов налоксазона и налоксоназина. При проведении экспериментов по связыванию 3Н-дигидроморфи-на или 3H-D-Ala2, Г)-Ь и°-энкефалина в присутствии налоксазона наблюдали исчезновение высокоаффинного компонента в обоих случаях. Этот результат не может быть объяснен на основании двухцентровой модели, в соответствии с которой вещество, по-
давляюпее высокоаффинный компонент связывания /i-агониста, должно было бы ингибировать низкоаффинное связывание ^-селективного лиганда. Дальнейшее обоснование трехцентровой модели было получено в опытах по ингибированию связывания меченых fj.-лигандов 6-лигандами и наоборот. Морфин в низких концентрациях конкурировал лишь за высокоаффинные центры связывания 3H-D-Ala2, 0-Ьеи5-энкефалина. Ингибирование низкими концентрациями морфина связывания 6-лигандов подавлялось на-локсазоном. D-Ala2, Б-Ьеи5-энкефалин в низких концентрациях ингибировал только высокоаффинное связывание /г-лигандов, и этот эффект также подавлялся налоксазоном. Справедливость трехцентровой модели была также подкреплена в опытах по защите /ii-центров от разрушения N-этилмалеимидом. Было показано, что /ii-рецепторы, с одной стороны, и /хг- и 6-рецепторы - с другой, появляются в разных стадиях онтогенеза. Все три типа центров по-разному распределены в центральной нервной системе. Математический анализ изотерм насыщаемого связывания //- и 6-рецепторов с применением компьютера показал Что экспериментальные данные описываются трехцентровой моделью лучше, чем двухцентровой (Goodman et al., 1985; Lutz et ai 1985; Torawa et al.. 1984). Фармакологические эксперименты с использованием налоксазона и налоксоназина дали авторам право утверждать, что /«i-рецепторы опосредуют такие эффекты морфина, как супраспинальная анальгезия, выброс пролактина, влияние на обмен ацетилхолина, каталепсия, гипотермия, влияние на свободное потребление пищи. Такие важные проявления действия морфина, как спинальная анальгезия, респираторная депрессия и большинство признаков физической зависимости при хроническом введении опиатов, а также выброс гормона роста, влияние иа обмен дофамина, брадикардия опосредованы активацией других рецепторов. На периферии /ii-рецепторы опосредуются его взаимодействием с /i2'PeUenTOPaMil ауэрбаховского сплетения.
