Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Медицина -> Зайцев С.В. -> "Наркомания. Нейропептид Морфиновые рецепторы " -> 15

Наркомания. Нейропептид Морфиновые рецепторы - Зайцев С.В.

Зайцев С.В., Ярыгин К.Н., Варфоломеев С.Д. Наркомания. Нейропептид Морфиновые рецепторы — МГУ, 1993. — 256 c.
ISBN 5-211-02349-8
Скачать (прямая ссылка): narkomaniya1993.djvu
Предыдущая << 1 .. 9 10 11 12 13 14 < 15 > 16 17 18 19 20 21 .. 108 >> Следующая

Ки+[Л,]
АМ
;_ j (^1 + [Lr-т]) + A[Lj]
(2.14)
где A[Lj]—[Ljj-[LCT].
Выражение (2.14) no виду аналогично урапнению (2.3), описываю и {ему изотерму связывания лиганда с системой i-независимых рецепторов.
Разница лишь в том, что общая концентрация i-x рецепторов [R,]o в выражении (2.14) нормирована на величину (K|4-[LCrj). * константа диссоциации представляет собой сумму (К, + [LCT])• Ясно, что чем больше величина К,, тем меньше будет эффективная концентрация центров связывания лиганда, в соотношении
(2.14). Таким образом, относительный вклад низкоаффинных рецепторов (большие значения К) в выражении (2.14) будет значительно меньше их относительного вклада в выражение (2.3). И' пользуя тля анализа экспериментальных данных по связыванию лигандов с рецепторами выражение (2.14), мы уменьшаем, в ряде случаен даже исключаем из рассмотрения, низкоаффинни - рецепторы за счет
Рис. 2 8. И ютерма спеиифичегкого связывания лиганда в координатах разностного метода
снижения
значительного, а именно в число раз, равное
их вклада и выделяем тем самым процесс вьк и;<оаф4 инного свя-
зывания. Используя методы нелинейной ре* •><•«• ии и ? у равнения
(2.14), можно оценить параметры высокоабфитиых рецепторов. В целях более наглядного представления получ^-нш/х результатов можно использовать, например, следующие hoof. 1инаты, аналогичные широкоизвестным координатам Скэтчар ча
[Вст] [Bj] [Bc7]/[Lcr] — [Bj]/[L, \
[LCT] [JLj] ’ A[L.j]
На рис. 2.8 приведена изотерма специфического связывания лиганда в указанных координатах. Точки, расположенные левее оси ординат, отвечают отрицательным значениям разности (2.14) и [Lj]. Вычитая вклад высокоаффинного связывания из выраже-Рис. 2.9. Модельный эксперимент: распреде- НИЯ (2 3) И аналИЗИ-ление экспериментальных точек изотерм специ- и „
фического связывания в координатах Скэтчар- РУ^ ОСТаТОЧНОе да, связывание лиганда низкоаффинным центром связывание лиганда
проявляется плохо с рецепторами, МОЖ-
НО найти число и параметры низкоаффинных рецепторов. Такой раздельный анализ вкладов высоко- и низкоаффинного связывания позволяет определенно увидеть более двух независимых рецепторов в изучаемой системе.
Достоинства разностного подхода можно проиллюстрировать следующим образом. Обозначим отношение вкладов двух центров в связывание через а:
[Rh]o • L/(Kh + [L])
_ [R,]o - L/(K, + [L]) ' ^1!>'
Максимальное значение а принимает при [L]<CKh:
[Rh]o/Kh
[Ri]o/Ki ’
(2.16)
Если amax С 1, то в уравнении (2.3) можно пренебречь слагаемым, которое описывает взаимодействие с высокоаффинным рецептором, для любых значений [L]:
W = trlf (2Л7)
В этих случаях бывает довольно сложно увидеть в распределении экспериментальных точек в координатах Скэтчарда отклонения от линейности (Зайцев, Курочкин, Варфоломеев, 1987).
Запишем соотношение двух центров для разностного метода. При [L]<CKh и [Ьст]—*¦ 0 имеем
(<*Т)тах = [Rib/КГ (2Л8)
Если Kh/Ki^ amax, то наряду с условием a max ^ 1 будет выполняться условие (aT)max > 1) т.е. вклад высокоаффинного центра будет сравним или даже больше; вклада низко аффинного рецептора. Функция от A[Lj], в отличие от [B]([LJ), в ко-
ординатах Скэтчарда будет явно нелинейной в области [L]<CKh-Это и будет указанием на присутствие в системе высокоаффинного центра. Аналогичное рассуждение можно провести и для случая, когда в системе присутствует более двух типов низкоаффинных центров связывания. Это обстоятельство делает полезным разностный подход при решении проблем дискриминации модели связывания и выявления новых высокоаффинных рецепторов (Зайцев, 1985; Зайцев, Курочкин, Варфоломеев, 1987).
Для иллюстрации преимуществ разностного метода при выявлении гетерогенности рецепторной системы было проведено численное моделирование с параметрами:
[Rh]0 = 0, 006, Kh = 0,2;
[R,]o = 6, К, = 20;
К„с = 0,0825; Л[Вобщ] = 10%; AL = 5%; N = 30, N„c = 30.
На рис. 2.9 показана изотерма специфического связывания в координатах Скэтчарда; на основании только этих данных нельзя сделать достоверный вывод о присутствии в системе высокоаффинного центра. Однако обработка данных по разностному методу позволяет увидеть явную нелинейность зависимости t(i) з координатах Скэтчарда при значениях —0.; 7 ;
(рис. 2.10). Ана ;<>’ :ч-
НЫЙ ВИД HMtK’i i р.'фИКИ,
построенные ( ,де для трех ьнач>-*ний [Lcx] в области Kh- Э'ГО ВаЖНО, так ка? из-за значительной погрешности на начальном участке кривой
-----mjf ,н"
v
*
X
1,QY
-0,22
0,22
Предыдущая << 1 .. 9 10 11 12 13 14 < 15 > 16 17 18 19 20 21 .. 108 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed