Руководство по экспериментальной хирургии - Шалимов С.А.
Скачать (прямая ссылка):
Подлежащее вскрытию павшее или забитое животное укрепляют на секционном столе в положении на спине, максимально растянув его конечности. Разрезом по средней линии от мечевидного хряща до лонного сочленения вскрывают брюшную полость. Разрез дистальнее пупочного рубца нужно вести, оттянув переднюю брюшную стенку кверху или введя под нее в брюшную полость брюшное зеркало — иначе будет поврежден мочевой пузырь, обычно растянутый и заполненный мочой. Для обеспечения более широкого доступа к органам брюшной полости срединную лапаротомию дополняют поперечным разрезом,
6*
83
идущим на уровне пупочного рубца перпендикулярно срединному. Образовавшиеся лоскуты захватывают зажимами Кохера, максимально отводят и фиксируют к коже. Крупные кожные и мышечные сосуды лигируют.
Далее разрезом, идущим параллельно грудной кости и отступив от нее на 3 см вправо, от диафрагмы в краниальном направлении вскрывают грудную полость, пересекая хрящевые концы ребер, мышцы, продлевая разрез по средней линии на шею и нижнюю челюсть. Диафрагму не пересекают, стараясь сохранить ее в целости. При вскрытии грудной полости, как правило, повреждают внутреннюю грудную артерию. Найти и перевязать ее обычно не удается и в грудную полость изливается большое количество крови. Поэтому исследование внутренних органов нужно начинать с легких и сердца, быстро извлекая их наружу, а сохраненная диафрагма препятствует изли-тию крови в брюшную полость.
После исследования грудных органов изучают состояние органов, подвергавшихся экспериментальному воздействию, за* тем органы пищеварения, мочевыделения, шеи и головной мозг. Учитывая, что кости свода черепа у собак достаточно плотные, рекомендуем пользоваться для их распила дисковой фрезой, насаженной на электродрель.
По ходу патологоанатомического изучения внутренних органов из них иссекают фрагменты для последующего микроскопического исследования.
Опыт показывает, что посмертные изменения в тканях собак развиваются очень быстро. Если с момента смерти прошло более 45—60 мин, ткани уже не пригодны для электронно-микроскопического и авторадиографического изучения, позже чем через 3 ч они не пригодны для гистоэнзиматического исследования, позже чем через 6 ч — для гистохимических реакций. Если с момента смерти прошло более 12 ч, ткани полностью не пригодны для окраски обычными гистологическими методами, а также для инъекции и импрегнации. По нашим данным, оптимальный срок взятия материала не превышает 2 ч, а для электронной микроскопии и авторадиографии ткани должны быть взяты сразу же после забоя животного. Для проведения гистоэнзи-матических исследований ткани желательно брать непосредственно после забоя животного, помещая их в тающий лед.
Обязательное патологоанатомическое исследование животных ценно не только тем, что позволяет наиболее полно изучить изменения, происшедшие в организме после соответствующего воздействия, выявить истинную причину смерти, обнаружить пороки и аномалии развития тех или иных органов, более полно взять материал для микроскопического изучения. На его основе постепенно создается макроархив лаборатории, который может быть впоследствии использован для проведения дополнительных исследований, при планировании новых работ, учебных и демон страционных целей.
84
Предназначенные для длительного хранения фрагменты тканей и органов, размерами не более 1 X 1 см, хранят в фиксирующей жидкости (лучше всего 10—12% раствор нейтрального формалина) при соотношении объемов ткани и жидкости не менее чем 1 : 10, в стеклянных, герметически закупоренных сосудах, емкостью до 50 мл, снабженных соответствующей этикеткой. Емкости помещают в темное прохладное место и осматривают не реже раза в год. Там же в специальном шкафу хранят материал, залитый в парафиновые или целоидиновые блоки, снабженные соответствующими этикетками.
Подобный архив представляет большую ценность еще и потому, что препараты на стеклах быстро выцветают, особенно после проведения гистохимических и гистоэнзиматических реакций, и сохранять их более 2 лет нецелесообразно. В то же время фрагменты тканей, залитые в парафиновые или целоидиновые блоки, вполне пригодны для изготовления гистологических препаратов на протяжении не менее 5—10 лет.
Наряду с иссечением кусочков тканей для микроскопического анализа существенную помощь в изучении и объективной оценке результатов эксперимента оказывает изготовление макропрепаратов органов или систем, подвергшихся воздействию в процессе операции или моделирования. Мы рекомендуем также иметь в лаборатории анатомические препараты органов, взятых от животных того вида, который преимущественно используют в эксперименте. Постепенно накапливаясь, такой макроархив, отражая деятельность лаборатории, служит для учебных и демонстрационных целей, может использоваться при планировании научных исследований и, наконец, является дополнительным источником материала для микроскопического анализа.
.Органы, предназначенные для создания макроархива (или музея), берут во время патологоанатомического вскрытия и подвергают консервированию. Наиболее полная сводка применяющихся с этой целью методов представлена в монографиях М. Г. Привеса (1956) и Т. Б. Богуславской (1959). Каждый из описанных методов имеет достоинства и недостатки и при наличии определенного опыта может дать хорошие результаты, но универсального способа еще не создано. Практика показывает, что некоторые из этих методов обладают свойствами, делающими их базовыми, т. е. наиболее приемлемыми для повседневной работы.
