Инфекции в акушерстве и гинекологии - Макаров О.В.
ISBN 5-98322-263-5
Скачать (прямая ссылка):
Известно, что некоторые виды микроорганизмов обладают протеолитиче-ской активностью. Источником пептидов является эпителиальная слизь, которая со структурной точки зрения представляет собой молекулы, в которых к полипептидному остову прикреплены боковые поли- и олигосахаридные звенья. Некоторые представители аэробной микрофлоры обладают наибольшей протеолитической активностью (кишечные палочки, стрептококки, некоторые бациллы). Некоторые виды анаэробов (Bacteroides fragitis, Bacteroides rumi-nocola, Bacteroides melaninogenicus) также предпочитают пептиды в качестве источника азота, но обладают низкой способностью к протеолизу. Анаэробные микроорганизмы, продуцирующие КЖК, представлены в таблице 2.14.
Количественный и качественный состав КЖК позволяет судить о функциональной активности конкретных представителей вагинальной микрофлоры и об изменении аэробно-анаэробного баланса микрофлоры, что было продемонстрировано в работах О.Н.Минушкина, М.Д.Ардатской (1999).
Хроматографические методы исследования микробных метаболитов в вагинальном содержимом включают: газожидкостную, ионно-обменную, высокоэффективную жидкостную хроматографию (Говорун В.М., Митрохин С.Д., Ардат-ская М.Д., 2000; Кудрявцева Л.В., Ильина Е.Н., Говорун В.М., 1999), методы, способные дать быстрый результат исследования. В связи с тем, что эти методы исследования проводятся с использованием дорогостоящих приборов, они не могут быть использованы при скрининговых исследованиях.
В медицинской, в частности гинекологической, практике ранее использовался метод газожидкостной хроматографии для определения летучих и нелетучих органических кислот. Для анализа летучих жирных кислот готовятся их эфирные экстракты. Для анализа нелетучих компонентов образец подвергается метилированию. Для экстракции летучих эфиров используется 1 мл хлороформа. В качестве эталона используются экстракты водных растворов летучих жирных
инфекции и факторов реактивности организма в клинике, диагностике и лечении
^йолее часто встречающихся воспалительных заболеваний женских половых органов 163
кислот и нелетучих органических кислот (Говорун В.М., Митрохин С.Д., Ардат-ская М-Д-: 2000). Интерпретация результатов проводится в соответствии с руко-водствами по микробиологии и хроматографии. Метод газожидкостной хрома-тографии позволяет сравнить содержание в вагинальном отделяемом основных продуктов метаболизма лактобактерий и облигатно-анаэробных микроорганизмов - уксусную, пропионовую, масляную кислоты, а также молочную и янтар-ную кислоты. В норме соотношение янтарной и молочной кислот составляет 0 ,4, а при БВ — более 0,4. По данным А.С.Анкирской и соавт. (1999), чувствительность и специфичность метода составляют 80 и 88,6% соответственно. На практике этот метод используется редко из-за высокой степени сложности методики подготовки проб (экстракция, метилирование) с потерей 20% общего пула КЖК, неудовлетворительного разделения изомеров кислот (Кудрявцева Л.В., Ильина Е.Н., Говорун В.М., 1999) и дороговизны исследования.
Недавно разработан способ разделения смеси жирных кислот фракции С2-С6 методом газожидкостной хроматографии (Говорун В.М., Митрохин С.Д., Ардатская М.Д., 2000; Кудрявцева Л.В., Ильина Е.Н., Говорун В.М., 1999), который дает возможность определять КЖК в жидких средах без потерь КЖК. Предусматривалась возможность использования данного метода в скрининге. Однако были выявлены недостатки, которые побудили исследователей переработать данный метод для определения КЖК в биосубстратах, содержащих очень малое количество кислот (удлинение колонки, нанесение большей толщины пленки, содержащей большее количество фазы для определения КЖК) (Кудрявцева Л.В., Ильина Е.Н., Говорун В.М., 1999).
В дальнейшем М.Д.Ардатской, О.Н.Минушкиным, О.В.Макаровым, З.З.Хашукоевой (2004) был разработан способ определения микрофлоры влагалища методом газожидкостной хроматографии по содержанию КЖК (патент на изобретение №2270447), который может быть использован в диагностике бактериального вагиноза (Макаров О.В., Хашукоева А.З., Хашукоева 3.3., 2006; Макаров О.В., Хашукоева 3.3., Хашукоева А.З. и др., 2007).
В настоящее время успех лечения дисбактериоза влагалища зависит от точной постановки диагноза, который основан на тщательном анализе данных анамнеза, клинических и лабораторных методов исследования. Поскольку до недавнего времени БВ рассматривался как неспецифический вагинит, а H.L.Gardner и C.D.Dukes еще в 1955 г. причиной неспецифического вагинита назвали Haemophilus vaginalis, то и предложенные методы лечения были направлены против макроаэрофильного микроорганизма. Использовали перорально тетрациклин и интравагинально содержащий серу крем. Последующими исследованиями было показано, что применение таких антибиотиков, как тетрациклин, ампициллин, эритромицин, офлоксациллин для лечения БВ эффективно лишь в 14—45% случаев, а использование ампициллина было эффективным лишь у 43% больных (Newton E.R., Piper L., Peairs W, 1997; Priestley C.J., Kinghorn G.R., 1996). Отмечена высокая эффективность в отношении анаэробных микроорганизмов таких антибиотиков, как уназин и аугментин (лактам-ные антибиотики с ингибиторами в-лактамаз. Препараты назначают по 2 г в День в течение 7 дней (Rai R., Clifford К., Regan L., 1996; Rosenstein I.J. et al., 1996). Применение этих антибиотиков на практике оказалось менее эффективным, чем использование метронидазола и клиндамицина — антибиотиков, активных в отношении облигатно-анаэробных микроорганизмов.
