Инфекции в акушерстве и гинекологии - Макаров О.В.
ISBN 5-98322-263-5
Скачать (прямая ссылка):
состояние (беременность, день менструального цикла, наличие гормональных нарушений), прохождение антибактериальной или гормональной терапии к моменту забора материала. Мазок высушивают на воздухе, фиксируют 96% спиртом (10 мин), смесью Никифорова (спирт и эфир в соотношении 1:1) или ацетоном. В лаборатории мазок окрашивают и исследуют под микроскопом. Возможности и правильность лабораторного исследования во многом зависят от выбора окраски препарата (табл. 1.14).
Для проведения бактериоскопического исследования материал необходимо брать на 2 предметных стекла: одно для окраски по Романовскому—Гимзе, что позволит оценить состояние эпителиальных клеток, провести дифференциальную оценку нейтрофилов, эозинофилов, лимфоцитов и макрофагов; второе
Генитальные инфекции и факторы противоинфекционной защиты в генезе
воспалительных заболеваний женских половых органов 67
окрашивают по Граму для исследования микробного пейзажа. Широкое распространение окраски 0,01% раствором метиленового синего не оправдывает себя, так как не является достаточно информативным.
Среди микроскопических методов можно выделить исследование натив-ных мазков. Этот метод успешно применяется при диагностики трихомоноза, БВ и кандидоза. Исследование проводится в висячей или раздавленной капле. Наличие в ней подвижных трихомонад, клеток плоского эпителия с адгезиро-ванными на них многочисленными микроорганизмами или спор и мицелия дрожжевых грибов дает возможность определить этиологический агент заболевания. Такие исследования лучше проводить с помощью фазово-контрастной или темнопольной микроскопии. Пользуясь темным полем, можно выявить и Treponema pallidum.
Однако возможности диагностики при бактериоскопическом методе для ряда инфекций ограничены. Невозможно на уровне препарата определить вид инфекционного агента. Несмотря на то что при хламидийной или вирусной инфекции появляется ряд характерных цитологических изменений, которые опытный микроскопист может отметить, эти наблюдения являются только скриниговыми и требуют дальнейшего исследования другими методами. Микоплазменная инфекция вообще не приводит к каким-либо видимым под микроскопом изменениям и не может быть диагностирована на уровне бактериоскопии.
1.5.1.2. Бактериологические методы
Бактериологический метод по-прежнему является «золотым стандартом» в диагностике. С этим методом сравнивают специфичность и чувствительность всех других методов лабораторной диагностики. Он основан на способности микроорганизмов размножаться на искусственных средах и позволяет не только выявить возбудитель, определить его концентрацию, но и выяснить чувствительность данного штамма к антибактериальным препаратам. Чувствительность к антибиотикам определяется методом диффузионных дисков. Для этого предполагаемый инфекционный агент, выделенный в чистую культуру, засевают газоном на чашку с питательной средой и накладывают поверх посева диски, пропитанные соответствующими антибиотиками. Антибиотик диффундирует в агар, препятствуя росту микроорганизма. Чем выше чувствительность возбудителя к данному препарату, тем больше свободная от роста микроорганизма зона вокруг диска. В настоящее время стал очень популярен метод серийных разведений для определения чувствительности к антибактериальным препаратам. Несмотря на его относительную сложность, его популярность объясняется выпуском коммерческих наборов, которые упрощают процесс постановки и стандартизируют результаты. Для каждого штамма при этом методе берутся две концентрации антибиотика, адсорбированные на специальной плате. Приготовленная на солевом растворе суспензия возбудителя, выделенного в чистую культуру, разносится по плате и инкубируется несколько часов. После инкубации отмечается, какие дозы препарата задерживают рост культуры. Благодаря работе с микродозами возбудителя и малыми объемами результаты можно получить быстрее, чем при помощи диффузионного метода.
При получении результатов посева можно столкнуться с рядом трудностей. Поскольку влагалище является открытым органом, в материал могут попасть случайные микроорганизмы с поверхности кожи промежности. Кроме того, влагалище и цервикс даже при нормальном биоценозе населяют много различных микроорганизмов, из которых очень трудно выбрать реаль-
68 Глава I
ный возбудитель, поэтому бактериологическое исследование необходимо проводить под контролем бактериоскопии мазка, окрашенного по Граму. Наличие больших количеств определенных по морфотипу и грамзависимости микроорганизмов, образующих на эпителии ложноключевые или ключевые клетки, незавершенный фагоцитоз этих возбудителей помогут с выбором конкретного агента.
Различные анатомические зоны мочеполовой системы женщин отличаются как по видовому, так по количественному составу микрофлоры. Наибольшее число аэробных микроорганизмов встречается в преддверии влагащища, а по мере продвижения к цервикальному каналу растет число облигатных анаэробных форм. Полость матки в норме стерильна. В связи с этим необходимо указывать, из какого анатомического отдела взят материал для бактериологического исследования. Результаты посева во многом зависят от качества взятия материала. Перед взятием посева необходимо провести санацию наружных кожных покровов. Забор материала в настоящее время осуществляется в специальные коллекторы, снабженные стерильным тампоном для забора материала и транспортной средой. Для того чтобы избежать попадания в пробу тран-зиторных микроорганизмов, необходимо на бактериологический посев брать пристеночный материал, очистив предварительно влагалище или цервикаль-ный канал от слизистых, гнойных или кровяных выделений. Обычно для* исследований микробиоценоза влагалища берут материал из заднего верхнего свода. При взятии материала из цервикального канала зонд вводят на глубину 1—1,5 см и несколько раз проворачивают вокруг оси так, чтобы обязательно захватить клетки по периметру цервикального канала. При исследовании содержимого полости матки при послеродовых эндометритах или острых саль-пингоофоритах (ОСО) материал берут аспиратором, защищенным дополнительной облочкой, для предотвращения неизбежной контаминации влагалищной и цервикальной флорой. При исследовании поражений мочевой системы делается посев мочи, которую получают путем катетеризации, или используют вторую порцию утренней мочи. В последнем случае необходима предварительная санация наружных половых органов.
