Синдром диссеминированного внутрисосудистого свертывания крови - Макацария А.Д.
ISBN 5-8249-0078-7
Скачать (прямая ссылка):
Нами в подобных случаях используется тромбоэластографическая проба на плазминоген со стрептазой (по 100-200 ЕД на 1 пробу). Выполнение этого теста достаточно быстрое, а при наличии параллельных нескольких каналов тромбоэластографа может быть осуществлено одновременно с другими тромбоэластографическими тестами.
Для выполнения пробы со стрептазой пригоден любой материал (кровь или плазма), в который вводится непосредственно в кювете
343
тромбоэластографа стрептаза и производится (если необходимо) ре-кальцификация 1,29% раствором хлорида кальция. В норме или при сохраненном фибринолитическом потенциале крови после небольшого расширения (на 3-10 мм) амплитуды записи тромбоэластограм-мы до полного исчезновения колебаний пера самописца) (рис. 80). Проба со стрептазой может использоваться для качественного анализа фибринолитического потенциала, для контроля эффективности применения ингибиторов фибринолиза (контрикал, трансамин, гор-докс и т.д.). О достаточности дозы препарата можно судить по отсутствию или замедлению индуцированного фибринолиза при исследовании в аналогичных условиях теста (рис. 81).
1
2
Рис. 80. Проба со стрептазой в норме
1. донор; 2. больной
До назначения ингибиторов протеаз
После введения ингибиторов протеаз (траисачча 500 мг/вв)
Рис. 81. Проба со стрептазой при назначении
транексановой кислоты
Для потребления компонентов фибринолитической системы после образования сгустка и наличия записи тромбоэластограммы на ленте, амплитуда не убывает длительное время или продолжает уве-личиваться.
Для верификации пробы необходимо на следующем этапе поставить контрольное исследование активности используемого раствора стрептазы с донорской плазмой или кровью. При достаточной активности стрептазы отмечается быстрый фибринолиз в кювете тромбоэластографа, что соответствующим образом регистрируется самописцем (увеличение и затем уменьшение амплитуды вплоть до полного исчезновения записи - прямая линия). Этим же методом можно затем проконтролировать степень эффективности
344
заместительной терапии дефицита плазминогена. Проба со стрепта-зой может быть также использована для контроля терапии фибри-нолитиками и тромболитиками, активирующими плазминоген или проактиваторы плазминогена. Мы считаем, что тромбоэластогра-фия может с успехом применяться как для целей детального изучения системы гемостаза в условиях клиники, так и в практических лечебных учреждениях для диагностики тромбофилического состояния, угрозы геморрагического диатеза и правильного контроля ан-тикоагулянтной терапии.
6.2. Тесты определения патологической
активации системы гемостаза
6.2.1. Определение растворимых комплексов
мономеров фибрина (РКМФ)
Этаполовый тест по GodalH.C. и Abidgaard U. (1966)
Принцип метода состоит в том, что при добавлении к плазме крови, содержащей РКМФ, мономеры фибрина дают спонтанную полимеризацию (эффект паракоагуляции).
Выполнение теста: в силиконированную пробирку производят забор необходимого количества крови в соотношении с цитратом 9:1. Центрифугируют в течение 15 минут при 3000 об/мин при 4°С К1 мл плазмы добавляют 0,15 мл 50% этанола Полученную смесь помещают в водяную баню при температуре 37°С и инкубируют в течение 5 минут.
Тест считается положительным, если выпадают фибриновые нити или образуется плотный гель.
Протамин-сульфатный тест no Niewiarowski S. и Gurewich
V.(1971)
Принцип метода: протамин-сульфат разрушает растворимые комплексы мономеров фибрина с фибриногеном и ФДП, что вызывает спонтанную полимеризацию фибрина.
Выполнение теста. Помещают 5 пробирок 10 х 75 мм для титров разведения 1% протамин-сульфата 1:5,1:10,1:20,1:40,1:80. Для каждого разведения 1% протамин-сульфата в физиологическом растворе следует использовать отдельную пипетку. Необходимо для контроля использовать два набора пробирок с титрами разведения 1:5,1:10,1:20, 1:40,1:80. Один набор «пациент», другой - «контроль». Для этого с помощью пипетки добавляют 0,2 мл соответствующего протамин-суль-фатного реагента в каждую пробирку фибрин-мономерного контроля
*
по 0,2 мл и в каждую пробирку с плазмой пациента по 0,2 мл.
Оставляют пробирки в течение 30 мин при комнатной температуре или 5 мин в бане при температуре 37°С.
345
В конце инкубации проверяют образование сгустка; там, где его нет, встряхивают пробирки и смотрят присутствие фибриновых нитей.
Результаты: проба считается положительной, если в любой из пробирок образовался сгусток или нити фибрина. Помутнение раствора можно учитывать как +, выпадение мелких хлопьев - как ++, наличие мелких нитей фибрина - как +++, а образование плотного геля - как
^ ^ ^ •
Отклонения от нормальных показателей при протамин-сульфатном тесте может колебаться от ++ (помутнение раствора во 2-ом разведении), до +++++ (образование плотного сгустка или выпадение геля в 5-ом разведении).
Полуколичественное определение растворимых комплексов мономеров фибрина (РКМФ) в плазме с помощью теста гемагглютинации человеческихэритроцитов, покрытых очищенными мономерами фибрина по методу Largo К и соавт. (1976)
