Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Медицина -> Хабриев Р.У. -> "Антибактериальные лекарственные средства. Методы стандартизации препаратов" -> 20

Антибактериальные лекарственные средства. Методы стандартизации препаратов - Хабриев Р.У.

Хабриев Р.У. Антибактериальные лекарственные средства. Методы стандартизации препаратов — М.: Медицина, 2004. — 994 c.
ISBN 5-255-04072-1
Скачать (прямая ссылка): antibakterialniesredstva2004.djvu
Предыдущая << 1 .. 14 15 16 17 18 19 < 20 > 21 22 23 24 25 26 .. 470 >> Следующая

47
ных препаратов в процессе длительного культивирования микроорганизмов.
Исследование молекулярных механизмов лекарственной устойчивости М. tuberculosis и некоторых других возбудителей позволило разработать методы на основе ПЦР для быстрого выявления генетических маркеров резистентности (см. примеры в табл. 3.1).
Для подобного анализа обычно используется ДНК или РНК возбудителя, выделенного в чистой культуре. Однако в некоторых случаях имеется возможность прямого ПЦР-анали-за на антибиотикорезистентность без предварительного культивирования возбудителя. Исследуемый образец клинического материала при этом используется как источник ДНК-мишени для ПЦР, а откопированный ПЦР-продукт подвергается анализу с целью выявления мутаций, связанных с антибиотико-резистентностью. Разработан, например, метод, позволяющий с помощью ПЦР обнаружить у пациентов, страдающих туберкулезным менингитом, устойчивость возбудителя к рифампи-цину [25].
Существуют, однако, естественные ограничения для использования генетических методов оценки лекарственной устойчивости микроорганизмов:
• данные о конкретных генетических механизмах резистентности могут отсутствовать;
• резистентность к определенным препаратам часто бывает связана с различными механизмами и мутациями в разных генах, которые независимо влияют на фенотип.
Например, резистентность грамотрицательных бактерий к аминогликозидным антибиотикам может быть вызвана продукцией различных аминогликозидмодифицирующих ферментов или изменением проницаемости клеточной стенки. В этом случае результаты ПЦР-анализа, который всегда характеризует строго определенный специфический участок ДНК, не могут служить основанием для оценки чувствительности микроорганизма в целом.
Кроме того, отсутствие международных стандартов и рекомендаций по использованию ПЦР для определения чувствительности к антимикробным препаратам является дополнительным фактором, ограничивающим возможность широкого применения этого подхода в практической диагностике.
3.3.2. Преимущества и недостатки метода ПЦР
Многие преимущества использования ПЦР по сравнению с традиционными микробиологическими методами уже названы. Такие свойства ПЦР, как скорость и высокая производительность (т. е. возможность параллельного анализа большого количества образцов), являются бесспорными преимущества-
48
Таблица 3.1. Примеры использования ПЦР для выявления резистентности к антимикробным препаратам у различных видов микроорганизмов
Микроорга Антимикроб Генетические механизмы Методы обнаруже
низм резистентности ния

Стафило Метицил- Наличие гена тесА, ПЦР---электро
кокки лин (окса- кодирующего допол форез [32],
(обычно S. циллин)и нительный пеницил- ПЦР---гибридиза
aureus и S. другие р- линсвязывающий бе ция [18]
epidermidis) лактамы лок (ПСБ-2а)
Энтеробак ЦС III*, Мутации в генах ПЦР-ПДРФ
терии Другие р-лактамаз ТЕМ-, [20], ПЦР-SSCP
(обычно Е. р-лактамы, SHV-, и ОХА-типа, [И]
coli и К. кроме кар- расширяющие спектр
pneumoniae) бапенемов активности этих фер
ментов
М. tuberculo Изониазид Мутации в гене ката- ПЦР-ПДРФ
sis Рифампи лазы-пероксидазы [13], ПЦР-SSCP
цин (katG), реже в генах [30], ПЦР-сек-
Этамбутол inhA и ahpC венирование [12],
Стрептоми Мутации в гене субъе другие методы
цин диницы РНК-полиме-
Пиразин- разы (гроВ)
амид Мутации в гене етЬВ,
Фторхино кодирующем синтез
лоны арабиногалактана
Мутации в генах 16S
рРНК (rrs) и рибосом-
ного белка S12 (rpsL)
Мутации в гене пира-
зинамидазы (рпсА)
Мутации в гене А
субъединицы ДНК-
гиразы (gyrA)
Вирус про Ацикловир Мутации в гене тими- ПЦР---секвениро-
стого герпе динкиназы (tk), реже вание [27]
са (ВПГ) в гене ДНК-полиме-
разы
Вирус им Ингибито Мутации в гене поли ОТ---ПЦР**---сек-
Предыдущая << 1 .. 14 15 16 17 18 19 < 20 > 21 22 23 24 25 26 .. 470 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed