Антибактериальные лекарственные средства. Методы стандартизации препаратов - Хабриев Р.У.
ISBN 5-255-04072-1
Скачать (прямая ссылка):
2.2.77. Оксихинолины
Производные 8-оксихинолина реализуют бактерицидное действие путем комплексирования ЛС с ионами металлов, необходимых для активации ферментных систем микроорганизмов. Избирательно ингибируют синтез нуклеиновых кислот и репликацию ДНК. Нарушают окислительно-восстановитель-ные процессы в клетке, синтез мембранных белков и дыхательных ферментов.
2.2.72. Нитроимидазолы
Нитроимидазолы относятся к ДНК-тропным ЛС с избирательной активностью в отношении микроорганизмов, имеющих ферментные системы (нитроредуктазы), способные восстанавливать нитрогруппу. После проникновения в микробную клетку нитроимидазолы под влиянием клеточных редук-таз превращаются в высокотоксичные метаболиты, разрушающие нуклеиновые кислоты. Характеризуются бактерицидным типом действия, проявляют ПАЭ (до 3 ч в отношении анаэробных бактерий).
2.2.73. Фузидины
Фузидиевая кислота ингибирует в микробной клетке синтез белка на уровне рибосом; ЛС взаимодействует с так называемым фактором элонгации микробной клетки, который необходим для процесса транслокации на рибосоме при образовании пептидных связей. В высоких концентрациях фузидиевая кислота ингибирует также процесс связывания тРНК с донорскими участками рибосом. Фузидиевая кислота не нарушает синтез белка в клетках эукариоцитов.
Обладает бактериостатическим типом действия, в высоких концентрациях проявляет бактерицидный эффект в отношении наиболее чувствительных микроорганизмов.
3*
35
2.2.14. Фе ни колы
Хлорамфеникол угнетает синтез белка бактерий на уровне рибосомы 70S, связываясь с белком субъединицы 50S. Оказывает бактериостатическое действие на большинство чувствительных микроорганизмов.
2.2.15. Рифамицины
Рифамицины подавляют ДНК-зависимый синтез РНК-по-лимеразы с формированием стабильного комплекса ЛС — энзим. Клетки полимеразы млекопитающих менее чувствительны к действию антибиотиков. ЛС, угнетающие синтез белков микробной клетки, обладают клинически значимым постан-тибиотическим эффектом (ПАЭ) в отношении чувствительных микроорганизмов, что, по-видимому, связано с их фиксацией в течение определенного времени в местах связывания на рибосомах.
Клиническое значение ПАЭ заключается во влиянии на режим дозирования АМП.
Глава З
МЕТОДЫ ДИАГНОСТИКИ И КОНТРОЛЯ БАКТЕРИАЛЬНЫХ АГЕНТОВ
3.1. Методы бактериологического контроля
Для выявления возбудителей болезни используются классические методы бактериологической диагностики:
— бактериоскопия нативного материала;
— бактериоскопия окрашенного мазка по Граму;
— бактериологическое исследование (посев на твердые и жидкие среды с определением величины контаминации и чувствительности
возбудителя к антимикробным ЛС).
Из всех методов определения чувствительности бактерий к антибиотикам дис-ко-диффузионный метод (ДДМ) является наиболее распростаненным [7] (рис.
З.1.). При определении чувствительности ДДМ на поверхность агара в чашке Петри наносят бактериальную суспензию тестируемого микроорганизма определенной плотности, затем помещают диски, содержащие антибиотик. Диффузия антибиотика в агар приводит к формированию зоны подавления роста микроорганизмов вокруг дисков [7]. Результаты учитываются по величине диаметра зоны подавления роста.
Рис. 3.1. Определение чувствительности микроорганизмов дис-ко-диффузионным методом.
Нет зоны подавления роста микроорганизма вокруг диска с антибиотиком — микроорганизм резистентен к антибиотику (3). Зона подавления роста микроорганизма вокруг диска с антибиотиком — микроорганизм чувствителен к антибиотику (1) или умеренно резистентен (2).
37
Е-тест — стандартизированный метод определения чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препара-тоам in vitro на чашке Петри с агаром. Основан на определении минимальной подавляющей концентрации (МПК) в точке пересечения эллипсовидной зоны подавления роста микроорганизма вокруг пластиковой полоски Е-теста.
На основании полученных диаметров зон подавления роста микроорганизмов вокруг дисков с антибиотиками и Е-теста тестируемые штаммы подразделяются на чувствительные, умеренно-резистентные и резистентные. Для разграничения этих трех категорий чувствительности (или резистентности) между собой используют так называемые пограничные значения (breakpoints) диаметров зон подавления микроорганизмов. Пограничные значения не являются неизменными величинами. Они могут пересматриваться с течением времени в зависимости от появления новых данных о механизмах резистентности [21].
Таким образом, размер зоны подавления роста позволяет косвенно судить о концентрации антибиотика, подавляющей рост данного штамма микроорганизма.
3.1.1. Оценка противомикробной активности in vitro
Чувствительность возбудителя к антибактериальному препарату характеризуется минимальной концентрацией антибиотика в питательной среде, подавляющей рост микроорганизмов. Минимальная подавляющая концентрация (МПК) — это наименьшая концентрация противомикробного препарата, которая через определенный период времени приостанавливает рост специфических микроорганизмов in vitro. Результаты определения чувствительности анализируются по отдельным видам микроорганизмов и их штаммов. Данные представляют как концентрацию препарата, необходимую для подавления 50 % штаммов (МПК50) и концентрацию, необходимую для подавления 90 % штаммов (МПК90).
