Заболевание парадонта - Грудянов А.И.
ISBN 978-5-9986-0002-9
Скачать (прямая ссылка):
• определение количества В-лимфоцитов (CD22+) проводят по методу А. Н. Чередеева (1976);
• определение уровня циркулирующих иммунных комплексов в сыворотке крови по методу Л. С. Косицкой и соавт. (1983).
Некоторые ученые, в частности К. Armitt и Н. Firatly, считают, что соотношение хелперных и супрессорных популяций лимфоцитов в крови пациентов с ВЗП является показателем активности процесса в пародонте. Иммуногистохимиче-
Глава 3. Методы диагностики заболеваний пародонта
97
ски выявлен повышенный уровень в тканях десны этих пациентов субпопуляций Т-хелперов и понижение Т-супрессоров.
У пациентов с хроническим генерализованным пародонтитом выявлены выраженные изменения иммунной системы: угнетение Т- и стимуляция В-клеточного звеньев иммунной системы, которая не завершается адекватным накоплением плазматических клеток и возникновением эффективного гуморального ответа. Увеличение содержания в периферической крови лимфоцитов, экспрессирующих рецепторы индукции апоптоза CD95 L (Fas-L), может приводить к усилению апоптоза лимфоцитов и, возможно, является причиной развития Т-клеточного дефицита.
Получены доказательства, что у больных с типичными формами ВЗП в крови снижается содержание Т- и В-лимфоцитов, а также Т-хелперов. При этом резко возрастает число естественных киллеров (CD 16+) и цитотоксических Т-лимфоцитов (CD8+). Это указывает на повышенную агрессивность клеток иммунной системы, что может способствовать развитию клеточных иммунопатологических реакций. Повышение супрессорной активности может рассматриваться как реакция организма, направленная на подавление воспалительных процессов.
В 1979 г. G. J. Seymour на основании иммуногистологических исследований подразделил заболевания пародонта на «стабильные» и «прогрессирующие» в зависимости от преобладания в воспалительном инфильтрате Т- или В-лимфоцитов. В дальнейшем R. Page С. и Н. Schroder подтвердили гипотезу о том, что Т-лимфоцитарный очаг поражения является стабильным, преобладание же В-лимфоцитов свидетельствует об активности процесса. Некоторые ученые считают, что соотношение хелперных и супрессорных популяций (CD4+, CD8+) в крови пациентов с ВЗП является показателем активности процесса.
В настоящее время появились работы, посвященные изучению иммунологических показателей у лиц с атипичными формами поражения пародонта: ювенильный и быстропрогрессирующий пародонтит (БПП) [1]. Результаты исследований, проведенные у больных с БПП, позволили установить определенную связь между некоторыми иммунологическими и клиническими показателями. Так, соотношение хелперных и супрессорных популяций коррелировало с подвижностью зубов, которая отражала либо обострение явления воспаления, либо нарастание тяжести воспалительно-деструктивного процесса. Во всяком случае, при повышенной подвижности зубов это соотношение увеличивалось. Это явление могло быть случайным либо коррелировать не напрямую с индексом гигиены, а с учетом того, что индекс, в свою очередь, соотносился с клиническим состоянием пародонта. Напротив, связь между содержанием в крови CD3+ и индексом гигиены полости рта оказалась отрицательной: при ухудшении гигиены полости рта количество Т-лимфоцитов уменьшалось. Выявлена зависимость между уровнем CD 19+ (В-лимфоцитов) и длительностью ремиссии: чем длительнее продолжалась ремиссия, тем меньше было В-лимфоцитов [1].
Важным фактором местной иммунорезистентности тканей пародонта является функциональная активность ПМЯЛ. Фагоцитарную активность ПМЯЛ оценивают с использованием биохемилюминесцентного анализа по люминолзави-симой хемилюминесценции. Это метод регистрации активных форм кислорода, образующихся в процессе фагоцитоза. Данный метод позволяет оценить резерв-
98
Заболевания пародонта
ные возможности фагоцитов и опосредованно судить об эффективности лечения и прогнозе заболевания.
Материалом для исследования служат лейкоциты десневой крови (цельная кровь). Пробы крови в объеме 1 мл смешивают с 0,1 мл раствора люминола (конечная концентрация Ю-4 М). Все манипуляции выполняют в силиконизированной посуде.
В каждой порции крови, взятой из десны, оценивают спонтанную и активированную (зимозаном) хемилюминесценциию. В контроле (спонтанная реакция) во флаконы вносят 0,1 мл раствора Хенкса без фенолового красного. Для стабилизации спонтанной хемилюминесценции (сХЛ) пробы крови выдерживают 15 мин при температуре 37 °С. Для изучения индуцированной хемилюминесценции (иХЛ) в каждый флакон с кровью вносят по 0,1 мл стимулятора (опсонизирован-ныйзимозан). Измерения интенсивности хемилюминесценции (в тыс. имп./мин) проводят через каждые 5 мин (в течение 4 с) и заканчивают через 20 мин после прохождения пика хемилюминесценции.
Результат определяют как отношение между максимальной интенсивностью стимулированной и спонтанной хемилюминесценции в условных единицах.
Одновременно определяют количественное содержание лейкоцитов по общепринятой методике. Процентный показатель форм лейкоцитов, участвующих в фагоцитозе, определяют путем подсчета их в мазках крови (окраска по Романовскому—Гимзе). Расчет фагоцитарной активности лейкоцитов проводят на 1 млн клеток.
