Анемии - Алексеева Н.А.
ISBN 5-8232-0243-1
Скачать (прямая ссылка):
B.Miller и соавт. (1989), изучая влияние Эпо на колоннеобразование БОЕ-Э, выделенных из крови взрослых людей, установили, что на 7-й день культивирования клеток в ме-тилцеллюлозе образуются колонии больших размеров, состоящие из не-гемоглобинизированных или слабо гемоглобинизированных бластов с высоким пролиферативным потенциалом; на 10-й день культивирования появляются колонии, состоящие из большого количества зрелых, гемоглобинизированных клеток, но обладающих низкой пролиферативной активностью. При добавлении к среде, содержащей Эпо, ИЛ-1а или ИЛ-ір, пролиферация клеток-иред-шественниц эритропоэза ингибируется [Schooley J. et al., 1987].
гНиЕРО стимулирует рост КОЕ-ГЭММ, индуцирует включение 5?Fc в БОЕ-Э и КОЕ-Э. При концентрации
11 МОПОЭЗ
>m> s Міі/мл роет k'OI'.-l M ишнГііі-pVUlC* II!) 40% {Ciiin/cr Л. Ct ill., I989|.
¦Дня созревания человеческих KOI > н эритробласты in vitro трс-оуеіся ') 11 о и нисулиноподобный фнкіор 1. Коли и культуральной сре-/I»1 отсутствует Эпо, то КОЕ-Э иоги-(шюг. 13 культуре тканей КОЕ-Э образуют маленькие колонии, со-»іоніцие из 8—50 эритроблаегон, но him их роста требуется внесение в культуральную среду Эпо, но в мень-НКІІ дозе (от 0,0І до і ME), чем по ціеГіусгся для роста БОЕ-Э [Sawa-.1» К. et al., 1989].
Эпо не только регулирует эритро-ІІОП, но также стимулирует мегака-рионитопоэз. Введение больным с ЧИП рекомбинантного Эпо вызыва-ц\ у них увеличение в костном мозге <алсржания КОЕ-Э, БОЕ-Э, КОЕ-Мсг н КОЕ-ГМ [Stone W. et al., 1988]. In vitro Эно стимулирует мегакариоци-1011033. Введение животным реком-(шнантиого Эпо вызывало у них увеличение числа тромбоцитов. Эпо вызывает дифференциацию бипо-ІСІГМЮЙ клетки-предшественницы ме-гакариоаитов и Эр (UT-7) в эритро-идном направлении: в 4,5 раза увеличивается число клеток, экспрессирующих гликофорин А, происходит повышение синтеза (5- и у-глобинов н несколько раз [McHale С. et al., 1998 J.
Каков механизм действия Эпо, Ышгодаря которому просходит увеличение образования клеток эригро-, идного ряда? Изучением гемопоэтических клеток-предшественниц в культуре тканей установлено, что:
1) ключевым моментом действия >110 на молекулярном уровне является стимуляция синтеза РНК с последующим увеличением синтеза ДНК, клеточною деления и созревания (образование гемоглобина) кле-юк, чувствительных к Эпо;
2) через 30 мин после введения мышам Эно в эритроидных клетках селезенки увеличивается активность
РНК-нолимсриїм 11; через 3 ч после введения препарата повышаются активность I'HK-полимеразы 1 и синтез нсгистоновых белков, а через 18 ч увеличивается синтез гистонов;
3) через 4 ч после введения Эпо отмечается увеличение интенсивности синтеза РНК в ранних эрнтроид-ных клетках, находящихся на стадии между КОЕ-Э и пронормобластом; через 4—6 ч происходит транскрипция гена Р-глобина, и через 12 ч интенсивность транскрипции увеличивается в 20 раз [Bondurant М. ct al., 1985];
4) Эпо оказывает значительное, но вариабельное действие на синтез белков мембраны; так, аккумуляция протеина 3 может быть обнаружена в эритроидных клетках лишь после воздействия на них Эпо, тогда как синтез спектрина и рецепторов Тф, которые отмечались в клетках еще до внесения в культуральную среду Эпо, резко увеличивается под действием Эпо;
5) Эпо регулирует экспрессию гена Line-І на пролиферирующих клетках-предшественницах эритроид-иого ряда, играющего важную роль в эритропоэзе [Cui К., et al., 1998].
Эпо регулирует также субклеточную локализацию BcI-3, протоонкогена, участвующего в пролиферации (но не дифференциации) эритроидных клеток-предшественниц. М.-Y.Zhang и соавт. (1998) установили, что иод влиянием Эпо происходит экспрессия Вс1-3, который образует комплекс с ядерными N К-kb-белками, включая р52; этот комплекс индуцирует экспрессию специфических генов, вовлеченных в процесс пролиферации эритроидных клеток, в том числе и c-rnyb, играющего важную роль в эритропоэзе.
Как уже отмечалось, экспрессия гена Эпо, как и других важных генов, индуцируется гипоксией. На транс крнпииошюм уровне эти гены регулируются гипоксия-и и дуцирующим
23
ФИЗИОЛОГИЯ ЭРИТРОПОС) IА
фактором 1 (I I11* -1). 111F-1 это Ot(i-гстсродимсрный транскрипционный фактор. состоящий из 826 аминокис-л»>т, и реіуляция его активности псриично определяется стабильностью ос*субъсдипины [lluang L. et al., 19971. В гене Эпо имеется участок X-lip, к которому прикрепляется HIF-
I. И период гипоксии активация ПИ I первоначально происходит в миле увеличения насыщения его субъединиц без изменения содержания mPIIK 111F -1 а и HIF-I|3 [Gu J. et al.,
1997].
I la поверхности одной эритроид-ной клстки-предшсственницы имеются от Х00 до 1X00 рецепторов [Pego-raro I ct al., 1988]. По мнению
S Kraut/ и соавт. (1984), биологически ii >ффскі от Эпо наступает при снязынании Эпо с 1% рецепторов на КЛСІ КС.
ЭпоР обнаруживается не только на клетках, коммитированных в сторону ірнтропоіза, но и на стромаль-ных и мегакариоцитарпых клетках |1)ацЬу t і., 1994], ни гемопоэтических
