Химия привитых поверхностных соединений - Лисичкин Г.В.
ISBN 5-9221-0342-3
Скачать (прямая ссылка):
Рис. 8.21. Хроматографическая очистка вируса гриппа Л2/Ленинград/ 385/80 (H3N2)R на модифицированном макропористом стекле (ПВП-МПС-2 ООО, d„ = = 200 нм, dp = 0,1—0,3 мм). Колонка 100х х 280 мм, линейная скорость подачи элюента 6 см/мин. Элюент — 0,05 М трис-НС1, 0,15 М NaCl, pH 7,5. Исходный титр То, 16000 ед.
ГА. Выход вируса 85 %
Рис. 8.22. Хроматографическая очистка вируса бешенства на модифицированном макропористом стекле (ПВП-МПС-2 000, dn = 200 нм, dp = 0,1—0,3 мм). Колонка 100 х 1200 мм, линейная скорость подачи элюента 2 см/мин. Элюент — 0,1 М трис-НС1, pH 7,8. PD — протективная активность. Выход вируса 85 %
Рис. 8.23. Хроматографическая очистка вируса клещевого энцефалита на сорбенте «Диасорб-750-Диол» (d„ = 75 iim, dp = = 0,15—0,35 мм). Колонка 100 х 500 мм, линейная скорость подачи элюента 1,5 см/мин. Элюент — 0,1 М фосфатный буфер, pH 7,8.
Выход вируса 90 %
V, мл
полиомиелита и вирусных энцефалитов РАМН, на Уфимском предприятии вакцин и сывороток, на Омутнинском комбинате с середины 80-х гг. реализована технология очистки вируса гриппа и бешенства. Технология очистки вируса клещевого энцефалита в 2001 г. внедрена на предприятии «Вирион», г. Томск, на колоннах диаметром 10 см.
462
Применение поверхностно-модифицированных материалов
[Гл. 8
Результатом процесса хроматографической очистки является снижение на три порядка содержания белковых примесей, вызывающих побочные действия вакцин. Обширные научные исследования, проведенные в данной области в течение последних тридцати лет, позволяют эффективно подобрать оптимальные по структурным характеристикам носители и метод модифицирования [311, 312].
Возрастающий в последние годы интерес отечественных производителей к современным хроматографическим методам получения высокочистых препаратов позволяет надеяться на его широкое использование в практике производства фармпрепаратов на основе соединений синтетического, природного и биотехнологического происхождения, специальных пищевых добавок, компонентов для парфюмерной промышленности и т. п.
Можно полагать, что широкое внедрение этого метода в практику российских предприятий позволит в ближайшие годы вернуть утраченные позиции России как одного из ведущих мировых производителей субстанций.
8.3. Гибридные сорбционно-инструментальные методы анализа
Как правило, сорбционное концентрирование микроэлементов и различных органических соединений подразумевает повышение чувствительности последующего инструментального определения. В простейшем случае после концентрирования получают концентрат в том или ином агрегатном состоянии и применяют к нему подходящий аналитический метод. Поскольку стадия концентрирования и собственно инструментальное определение мало связаны между собой, то, согласно классификации [318], несколько выполненных операций составляют комбинированный аналитический метод.
Существует также группа так называемых гибридных аналитических методов, в которых определенное физическое и химическое состояние концентрата и аналитической формы того или иного ее компонента строго «привязаны» к возможностям и особенностям инструментального метода, составляя с ним единое целое. Классическим примером является симбиоз разделения, которое можно рассматривать как вариант концентрирования путем отделения ненужных частей, и проточного детектирования в различных хроматографических методах. Основным преимуществом гибридных методов является увеличение селективности и снижение пределов обнаружения, которое достигается за счет концентрирования нужного компонента, его целенаправленного распределения в коллекторе, усиления аналитического сигнала за счет свойств матрицы.
В настоящем разделе будут рассмотрены те гибридные методы, в которых использование поверхностно-модифицированных материалов в качестве коллектора микроэлементов или органических соединений имеет ряд интересных особенностей, улучающих аналитические характеристики последующего определения. В качестве инструментальных методов можно использовать фотометрию, спектроскопию диффузного отражения, люминесценцию, рентгенофлуоресцентную и фотоакустиче-скую спектроскопию и другие методы.
Сорбционно-спектральный метод. Интересный эффект усиления аналитического сигнала при определении золота, сконцентрированного на кремнеземе с ковалентно закрепленными группами тетраэтиленпентамина, был обнаружен в работе
8.3]
Гибридные сорбционно-инструментальные методы анализа
463
[319]. Вероятно, усиление сигнала связано с более однородной и равномерной ато-мизацией золота с высокоразвитой поверхности кремнезема, модифицированного относительно летучими органическими полиаминами. Нижняя граница определяемых содержаний золота составила 2,5 ? 10-7 % в пересчете на массу сорбента.
Сорбционно-люминесцентный метод. Люминесцентный метод определения органических соединений, а также неорганических комплексных соединений с органическими лигандами отличает высокая чувствительность. В зависимости от строения и свойств привитого слоя возможно три варианта определения металлов.
1. Сорбция люминесцирующих комплексов на поверхности, например фенан-тролинатов рутения. Использование ПММ в качестве концентрирующих сорбентов помимо повышения селективности определения дает дополнительные преимущества. Так, основная проблема концентрирования благородных металлов с использованием комплексообразующих сорбентов заключается в кинетической инертности, которая на практике приводит к существенному увеличению времени, требуемого для количественной сорбции даже при повышенной температуре. Практически важный эффект каталитического действия сорбентов на основе кремнезема был обнаружен при комплексообразовании рутения (II) с 1,10-фенантролином [320]. Обычно комплексы рутения (И) с фенантролином в растворе получают восстановлением соединений рутения (IV) гидразином или гидроксиламином при pH = 6-г 8 в присутствии 100-кратного избытка фенантролина; для полного протекания реакции требуется 1-2 часа при 100 °С. В присутствии кремнезема с привитыми 4-бутил-
