Практический курс химической и ферментативной кинетики - Березин И.В.
Скачать (прямая ссылка):
^(рК^-рКъ)- 1/С,'162 + 0,Ц2 = 0,13. (11-16)
С учетом найденной величины ошибки (11.16) выражение (11 15)
будет выглядеть следующим образом:
2,3^(0,64 + 0,13)
¦” игл 11"
Т7 — Т7
Из теории ошибок известно также [10], что средняя ошибка произведения независимой переменной на постоянную величину равна средней ошибке независимого переменного, помноженной на эту постоянную величину. Исходя из этого, получаем
АЯИ0Н = (27,9 + 5,7) ккал/моль.
Ответ: А//1Юн= (28±6) ккал/моль.
И-2. Из выражения (11.12) следует, что график зависимости в координатах (рКа, 1 /Т) должен иметь вид прямой, тангенс угла наклона которой равен ДЯИ0Н/2,3 R (рис. 113).
Ответ: Д#Ион=22,4 ккал/моль.
11-3. Решается аналогично задаче 11-2.
Ответ: Д#ИОн=7,3 ккал/моль.
11-4. Для решения задачи воспользуемся уравнением Вант-Гоффа (11.1) в виде
log К,
Ш
2,3/?
- + const.
(11.17)
Откладывая экспериментальные данные (табл. 3) В КООрДИНатаХ (log Лаос, 1/Т), найдем ДН комплексообразования (рис.
114). Да лее, определив по формуле (11.3) величину стандартной свободной энергии ДF (при 25°С), найдем 'величину стандартной энтропии комплексообразования по формуле (11.4).
Ответ: Д//°=—15,1 ккал/моль, AS°=
= —26,2 э. е.
11-5. Для расчета активационных параметров прямой и обратной реакций (схема 11.11) следует провести анализ зависимостей (табл. 4) в координатах (In k/T, ЦТ), тангенс угла наклона которых равен — ^—(см. гл. 4). Далее, найдя значения стандартных
свободных энергий активации прямой и обратной реакций, рассчитываем ветчины ASф по формуле
Рис. 113. Определение теплоты ионизации а-аминогруппы активного центра а-химотрипсина
ДЯ“=— д/^
Так как константа равновесия изомеризации фермента равна отно~
шению kj/k,
kf-
kBT
*sf
RT
*,=
ktir
Д5
e~R
-
¦bsf
mj
RT
ь-Hl
kr
RT
(11.18)
то из соотношения (11.18) находим &H° и AS0.
Ответ: Ш^= 30,4 ккал/моль; \Hf = 19,9 ккал/моль; ASf = = 43,6 э. е.; Д5’|ь= 6,2 э. е.; Д//°= 10,5 ккал/моль; Д5’°= 37,4 э. е.
.,AS,*3e.
Рис. 114. Определение стандартных энтальпии и свободной энергии комплексообразования лизоци-ма с N-ацетилхитотриозидом
Рис. 115. Определение изокинети-чеекой температуры для гидролиза ряда ацил-химотрипсинов, производных М-ацетил-Ь-аминокислот
11-6. Решается аналогично задаче 11-4.
Ответ-. ДН° — —16,3 ккал/моль; AS0 = — 34,9 э. е.
11-7. Решается аналогично задаче il-5.
Ответ'. Д//=^ = 30,8 ккал/моль; AS=? = 24,2 э. е.
11-8. Решается аналогично задаче 11-5.
Ответ: AHf =21,7 ккал/моль; 13,9 ккал/моль; b-Sf =
= 15,1 э. е.; ASf= - 13,0 э.е.
11-9. Ответ: Е = 20,9 ккал/моль.
11-10. Решается аналогично задаче 11-5.
Ответ: Д//^= 15,1 ккал/моль; yS^=—7,7 э. е.
11-11. Решается'аналогично задаче 4-13 (см. также §2 гл.4) (рис. 115).
Ответ: Тизок --= 482° К.
11-12 Для решения задачи см. §2, гл. 11. Из рис. 116 можно найти ft2— ft, = 6,9-Ю-2 мин-1, tc = 27° С, = 9,3 X
X 1C-3 мин-1 - град-1 (в точке t - tc). Подставляя полученные значения в выражение (11.10), найдем Д//=96,5 ккал/моль. Далее, используя формулу (11.4) и полагая AF—0 при t=tc (в этой точке константа равновесия равна единице), найдем Д5=320 э. е.
Ответ: Тс—300°К (27°С); Д#=96,5 ккал/моль; AS=320 э. е.
/ С
Рнс. 116. Определение температуры конформационного перехода активного центра а-химотрипсина по температурной зависимости эффективной константы скорости инактивации фермента под действием ультразвука
Рис. 117. Определение температуры конформационного перехода активного центра а-трипсина по температурной зависимости эффективной константы скорости ультразвуковой инактивации фермента
11-13. Решается аналогично задаче 11-12 (рис. 117).
Ответ: Гс=313°К (40°С) Д#=61,9 ккал/моль; AS=198 э. е.
11-14. Решается аналогично задаче 11-12.
Ответ: для р трипсина Д#=50,3 ккал/моль; AS=163 э. с.; Тс= = 309° К (36°С); для -у-трипсина Д#=37,2 ккал/моль; А5= = 121 э. е.; ГС=308°К (35°С).
ЛИТЕРАТУРА
1. Клибанов А. М., Мартин ек К., Березин И. В. „Биохимия”, 39,
878, 1974.
2. D у s о n J. Е. D., N о 1 t m а п п Е. A. „J. Biol. Chem.“, 243. 1401, 1968.
3. К i m Y., Lumry R. „J. Amer. Chem. Soc.“, 93, 5882, 1971.
4. В a n e r j e e S. K., R u p I e у J. A. „J. Biol. Chem.“, 248, 2117, 1973.
5. H v m e s A. J., С u p p e t t С. C., Canady W. J. „ J. Biol. Chem.“, 244, 637,
