Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Химия -> Березин И.В. -> "Практический курс химической и ферментативной кинетики" -> 90

Практический курс химической и ферментативной кинетики - Березин И.В.

Березин И.В., Клёсов А.А. Практический курс химической и ферментативной кинетики — Москва, 1976. — 324 c.
Скачать (прямая ссылка): praktkurshimkinetiki1976.djvu
Предыдущая << 1 .. 84 85 86 87 88 89 < 90 > 91 92 93 94 95 96 .. 117 >> Следующая

Рпопт 2
Если рКа = 6,4; рКь = 8,8, то рН0гт=7,6.
10-24. Из уравнения (10.20) следует, что истинная константа ингибирования определяется выражением
[ЕН+] [CN-]
Kv
[EHCN]
Для нахождения эффективной (pH-зависимой) константы ингибирования запишем уравнения материального баланса по ферменту и синильной кислоте (пренебрегая во втором случае расходом синильной кислоты на образование фермент-ингибиторного комплекса, т. е. принимая [1]о»[Е]0):
[Е]0 = [Е] + [ЕН+] + [EHCNJ,
[HCNJ0 = [CN-] + [HCN],
или
[E]„-[EHt](l+T^- + l“p), (10,49)
|HCN1„- [CN“] (1 + -Ell j. (lO.fO)
Подставляя (10.50) в (10.49), получим
[Е].
tEH+] =---------Ж
В отсутствие ингибитора
|ЕИ^| ------!Щг
[н+:
и концентрация синильной кислоты, уменьшающая вдвое концентрацию активной формы фермента и численно равная эффективной константе ингибирования (см. решение предыдущей задачи), определяется выражением
[HCN)0 = K**-Kl(l + 1^r)(l + Ll^L). (10.51)
Из выражения (10.51) видно, что эффективная константа ингибирования ухудшается при значениях [Н+]</Се и [Н+]>/(а, приводя к pH-зависимости типа «перевернутого колокола».
Продифференцировав выражение (10.51) по [Н+] и приравняв первую производную нулю, найдем концентрацию водородных ионов, при которой ингибирование является оптимальным (константа ингибирования имеет минимальное значение)
[Н+]опт = УКеКа, (10.52)
или
РКЕ +рКА Рпонт о
Когда /?/(е=6,5 и рКл—9,21, рН0пт=7,85. Наконец, подставив выражение (10.52) в (10.51), найдем формулу для оптимального значения константы ингибирования (в pH-оптимуме реакции)
кг-к,( i + /^)S.
Подставив в полученную формулу значения Къ, Кк и Къ найдем К\т =1,98-10~5 М.
ЛИТЕРАТУРА
I. Березин И. В., Казанская Н. Ф., Клёсов А. А. „Биохимия,,
36, 108, 1971.
2. Bender М. L., Schonbaum О. R., Zerner В. „J. Amer. Chem. Soc.“
84, 2562, 1962.
3. Генов Н., Велчева П., Караджова М. „Известия на отделението
за химически науки, Българска академия на науките", 4, 637, 1971.
4. Fersht A. R., Requena Y. „J. Amer. Chem. Soc.“, 93, 7079, 1971.
5. В e n d e r M. L„ Clemen 1 G. E., К e z d у F. J., Heck H. d'A. „J. Amer.
Chem. Soc“, 86, 3680, 1964.
6. Bender M. L., Brubacher L. J. „J. Amer. Chem. Soc.“, 88, 5880, 1966.
7. Mole J. E., H orton H. R. „Biochemistry", 12, 816, 1973.
8. Malhotra O. P., Philip O. „Biochim. Biophys. Acta“, 309, 97, 1973.
9. Cole P. W., Murakami K., InagamiT. „Biochemistry". 10, 4246, 1971.
10. Kortt’A. A., Liu T.-Y. „Biochemistry", 12, 338, 1973.
II. Frankfater A., Kezdy F. J. ,,J. Amer. Chem. Soc.“, 93, 4029, 1971.
12. Denburg J. L., Nelson R., Silver M. S. „J. Amer. Chem. Soc.“, 90, 479, 1968.
13. Williams A, Lucas E. C., R i m m e r A. R. „ J. Chem. Soc. Perkin II“,
621, 1972.
14. Hunkaplller M. W., Richards J. H. „Biochemistry", 11, 2829,1972..
15. К о e h 1 e r K. A., L i e n h a r d О. E. „Biochemistry", 10, 2477, 1971.
16. Taylor P. W., Bur gen A. S. V. „Biochemistry", 10, 3859, 1971.
ВЛИЯНИЕ ТЕМПЕРАТУРЫ НА КИНЕТИКУ ФЕРМЕНТАТИВНЫХ РЕАКЦИИ
§ 1. Зависимость кинетических и равновесных параметров ферментативных реакций от температуры
Влияние температуры на реакции, катализируемые ферментами, по существу не отличается от влияния температуры на любые другие химические реакции. Поэтому методы обработки температурных зависимостей кинетических и равновесных параметров ферментативных реакций также основываются на классических принципах термодинамики и кинетики (см. гл. 4).
Согласно закону Вант-Гоффа, влияние температуры на константу равновесия химической реакции выражается уравнениями
так что график зависимости в координатах (In К, l/Т) имеет вид прямой с тангенсом угла наклона, равным — АН/R. Зная величину энтальпии АН равновесного процесса и свободную энергию процесса AF при данной температуре, найденную из соотношения
Таким образом можно обрабатывать температурные зависимости констант Михаэлиса ферментативных реакций, констант ингибирования или констант диссоциации ионогенных групп активного центра фермента. Однако при обработке зависимостей констант равновесия ферментативной реакции от температуры следует принимать во внимание, что они могут являться эффективными величинами. Так, константы Михаэлиса в общем случае не являются истинными константами равновесия даже при наличии двухстадий-иого механизма ферментативной реакции (см. выражение 5.10). Даже в том случае, если изучаемый процесс в действительности равновесный, его константа равновесия может оказаться эффективной величиной, зависящей, например, от pH среды (см. гл. 10).
d In К ДЯ
Предыдущая << 1 .. 84 85 86 87 88 89 < 90 > 91 92 93 94 95 96 .. 117 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed