Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Химия -> Березин И.В. -> "Практический курс химической и ферментативной кинетики" -> 86

Практический курс химической и ферментативной кинетики - Березин И.В.

Березин И.В., Клёсов А.А. Практический курс химической и ферментативной кинетики — Москва, 1976. — 324 c.
Скачать (прямая ссылка): praktkurshimkinetiki1976.djvu
Предыдущая << 1 .. 80 81 82 83 84 85 < 86 > 87 88 89 90 91 92 .. 117 >> Следующая

Таблица 19
pH-Зависимость кинетических параметров гидролиза метилового эфира N-бензоил-Ь-аланина, катализируемого трипсином [3|. Условия опыта: 25° С; иониая сила
0,Ш (СаС12 и NaCl); [SJ0 = (0,167-4,33)- 10-2М
pH h --- I ^т (каж), М
кат, сек
6,5 0,109 0,243
7,0 0,185 0,171
7,5 0,232 0,129
7,8 0,248 0,112
8,0 0,265 0,111
8,5 0,248 0,098
9,0 0,184 0,078
9,2 0,168 0,077
9,5 0,122 0,052
9,7 0,105 0,047
10,0 0,070 0,035
10-20. В таблице 20 приведена pH-зависимость гидролиза п-пи-трофенилацетата, катализируемого папаином [13]. Определить
Таблица 20
Влияние pH на гидролиз гс-нитрофенилацетата, катализируемый папаином. Условия опыта: 25° С; ионная сила 0,Ш (буферные растворы);
[S]0 = (2,0— 10,0)- 10-2М; [Е|0 = 5,Ы0~6М
pH *кат^т (каж)’
М---'-сек-1
4,35 1,41
5,12 4,16
5,50 4,69
5,90 6,45
6,00 6,50
6,35 6,74
7,00 6,62
7,30 6,21
7,90 4,10
8,00 3,05
8,15 3,11
значения рК иокогениых групп активного центра сзободной формы фермента, контролирующих реакцию гидролиза.
10-21. Профиаь pH-зависимости кинетических параметров гидролиза Ы-ацетил-Ь-фенилаланил-Ь-триптофана, катализируемого пепсином, имеет колоколосбразную форму, причем левая ветвь рН-зависимости обусловлена протснирэванием карбоксильной группы активного центра фермента, а правая — депротонированием карбоксильной группы субстрата [12]. На основании данных табл. 21
Таблица 21
pH-Зависимость гидролиза
М-ацетил-Ь-Фенилаланил-Ь-триптофана, катализируемого пепсином. Условия опыта: 35° С; 3% метанола
pH ftnaT-10s, сек 1 Km (каж)-Ю*, М
0,30 1,18 18,1
0,50 1,35 10,9
0,70 2,64 17,1
1,11 2,11 9,3
1,50 5,24 10,1
1,89 6,38 9,6
1,95 5,70 8,2
1,96 5,24 7,0
2,50 5,05 6,6
2,94 4,51 7,6
3,01 6,14 12,3
3,55 3,64 13,1
3,56 3,06 10,3
3,73 4,03 17,1
4,06 2,24 21,1
4,20 3,82 53,9
Таблица 22
pH-Зависимость гидролиза
М-трифторацетил-Ь-фенилаланина, катализируемого пепсином. Условия опыта: 34° С; ионная сила 0,1 М;
[ S]0 = (0,75 —4,0)-10-2М; [EJ0 = 510-"M
pH *кат-Ю3, мин 1 «т (к.ж)'103’ М
1,70 2,4 6,6
2,25 6,0 5,9
2,80 14,3 8,0
3,05 26,8 14,0
3,35 34,1 16,6
3,60 31,7 15,5
4,05 21,7 21,6
4,-50 15,8 28,6
4,65 13,1 29,0
5,40 5,5 81,8
предложить схему pH-зависимости и вычислить значения рК ионо-геш ых групп свободного фермента и субстрата, контролирующих ферментативную реакцию.
10-22. Реакция гидролиза К-трифторацетил-Ь-фенилаланина, катализируемая пепсином, происходит только в том случае, если карбоксильная группа активного центра фермента является прото-нированной, а карбоксильная группа субстрата — депротонирован-ной [14]. Исходя из данных pH-зависимости ферментативной реакции (табл. 22), вычислить значения рК ионогенных групп субстрата и фермента, принимающих участие в реакции.
10-23. В работе [15] была предложена следующая схема ингибирования а-химотрипсина 2-фенилэтанборной кислотой:
/
*1
ен2 + 1
ЕН+ I
EI L I
ЕН1
К у
(10.19)
E4-I
Кн
EI
Были найдены значения рКа=6,4; рКь=8,8; рК'а<4,8; рК'ь> >10,3.
1) Найти выражение для эффективной константы ингибирования фермента.
2) Определить форму pH-зависимости эффективной константы ингибирования.
3) Найти, при каком значении pH ингибирование ферментативной активности будет максимальным, если изучение ингибирования проводится в интервале pH 5,0—10,0 и активной формой фермента является ЕН.
10-24. В работе [16] предложена следующая схема ингибирования карбоангидразы цианид-анионами:
ЕН+ + CN- 7=1 EHCN
+н-
Е
К к j j_H+
HCN
(10.20)
Согласно этой схемы анион ингибитора (/?/(а=9,21) связывается с активным центром фермента, имеющим положительно заряженную группу (рЛе=6,5) .
1) Найти выражение для эффективной константы ингибирования, зависящей от pH.
2) Определить форму pH-зависимости эффективной константы ингибирования.
3) Найти, при каком значении pH эффективная константа ингибирования будет иметь оптимальное значение.
4) Вычислить оптимальное значение эффективной константы ингибирования, если истинное значение константы ингибирования (схема 10.20) равно 3,55 • 10~8 М.
Предыдущая << 1 .. 80 81 82 83 84 85 < 86 > 87 88 89 90 91 92 .. 117 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed