Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Химия -> Березин И.В. -> "Практический курс химической и ферментативной кинетики" -> 77

Практический курс химической и ферментативной кинетики - Березин И.В.

Березин И.В., Клёсов А.А. Практический курс химической и ферментативной кинетики — Москва, 1976. — 324 c.
Скачать (прямая ссылка): praktkurshimkinetiki1976.djvu
Предыдущая << 1 .. 71 72 73 74 75 76 < 77 > 78 79 80 81 82 83 .. 117 >> Следующая

Акат [Е]о [S]0 ^ _|_____[Е]„
(каж) "Ь [S]o (Кт (каж)
Гр 1 __ Акат [Е]0 [S]0 , |_____________[Е]„___________ / k3 [S]„ \г
1 Кт (каж) + [S], (Кт (каж) + [S]0)2 \ k2 -f k3 J
X
[l_e Us+?si„ +*•)']_ (9 37)
Рис. 96. Кинетика гидролиза о-ни-трофенил-а-мальтозида, катализируемого а-амилазой, в начальный период реакции
Рис. 97. Обработка предстационарно-го участка кинетической кривой гидролиза и-нитрофенилтриметил ацетата, катализируемого эластазой
Из рис. 96 видно, что [Pj] линейно зависит от t, причем [PJ - О при t = 0. Это может быть лишь в случае
Ио________у 11 _ е- +*3)' L о
(^(Ka»)T-tS]o)S U,+A. ) L J
(см. 9.37) Из рассмотрения полученного равенства очевидно, что оно будет выполняться лишь в случае k%<gikz, что формально соответствует двухстадийной схеме протекания ферментативной реакции.
9-7. Для изучаемой реакции &офф=&и[5] 0-|-/г3 (см. решение задачи 9-5), поэтому график зависимости &Эфф от [S] о должен иметь вид прямой линии, из угла наклона и точки пересечения которой
с осью ординат можно найти численные значения кинетических констант (рис. 97).
Ответ: k\\= 157 М _1-сек~ •; ks—5-10-3 сек-1.
9-8. В случае трехстадийной схемы ферментативной реакции (9.7) зависимость концентрации продукта реакции [Pi] от времени (в условиях [S]o3>[E]o) определяется следующим выражением (см. решение задачи 9-6):
ID 1 __ ^кат [Е]о [S]„ , _|______[Е]р_______
111 К„ I |S\, + (SJ.)2 А
<9-38»
При больших временах t выражение (9.38) переходит в
гр 1 _______k2k3 [Е]0 [S]0 , .______[Е]0 (fe2 [S],,)2__ /q oq\
1 l] k3Ks + [S]0(k2 + к3)1~*~ [k3Ks , [S]„(fe2 4 k3W ’ K }
так что отрезок, отсекаемый на оси ординат экстраполированным участком прямой в координатах ([Pj], t) (см. рис. 92), определяется выражением
*2 \2
X
^т(каж) + [S]o
¦[Е]0. (9.40)
В рассматриваемых нами случаях
а) Кт(каж)=4,54-10-s М; ?2=44 сек-1; k3=8,5 сек-1; [S] 0 = = 10~4 М;
б) Кт(каж)— 1,28-10-4 М; k2=7,8 сек-1; kz= 13,9 сек1; [S]0= = ю-4 М.
Подставляя эти значения в формулу (9.40), можно рассчитать, какую долю концентрации фермента составит «выброс» л-продукта реакции Р].
Ответ: а) 33%; б) 2,5%.
9-9. Рассматривая уравнение (9.30), видим, что экстраполяция линейного участка кинетической кривой в координатах ([Pi],0 на ось ординат (см. рис. 92) отсекает отрезок, равный
гс — [Е]о (^и [S0)a (9 41)
№i[S]„ + fe3)2 •
Преобразовывая выражение (9.41), получаем
_1 ^ 1 fe3 1
/iT /[Wo + fe,1tsb /Шо
Отсюда график в координатах (1/^7г, 1/[S]0) должен иметь ьид прямой линии с отрезком на оси ординат, равным I/)7 [Е], (рис. 98). Ответ: [Е]0= 1,97.1C-6 М.
9-10. Для решения задачи необходимо найти аналитическое выражение для эффективной константы скорости первого порядка
вытеснения профлавина из комплекса с ферментом под действием субстрата. Общую схему реакции (9.42—9.43), выражение для констант диссоциации комплексов фермент-субстрат (9.44) и фер-мент-профлавин (9.45), а также уравнение материального баланса по ферменту (9.46) можно записать в следующем виде (при условии [S]o»[E]o, [F]o»[E]o):
Е + S ES -4^ ЕА е + р2 ( 9.42)
E + F^=iEF’ (9-43)
(9-44)
(9-45)
[Е]0 - [Е] + [ES] + [ЕА] + [EF], (9.46)
Кинетика ферментативной реакции в нашем случае регистрируется по изменению концентрации комплекса фермент-краситель (EF), поэтому необходимо концентрации всех веществ, принимающих участие в реакции, выразить через концентрации [EF]:
KF [EF1
[Е]= F
[ESj
[F]o ’ KF [EF] [S]0 Ks [Ho
о „ KF[S]0
.заменяя постоянный член ------rj?r- через а, получим
/<Cs l^Jo
[ES] = o[EF], (9.47)
Из уравнения материального баланса (9.46) найдем
[ЕА] = [Е]0 b [EF], (9.48)
КР
где & = 1 + о + тр!—• Подставляя выражения (9.47) и (9.4Й)
[Г Jo
в уравнение скорости ферментативной реакции
^!|hmes] - МЕА],
получаем
- ^ а + k^ tEFl - k* fEJ«- <9-49)
Предыдущая << 1 .. 71 72 73 74 75 76 < 77 > 78 79 80 81 82 83 .. 117 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed