Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Химия -> Березин И.В. -> "Практический курс химической и ферментативной кинетики" -> 68

Практический курс химической и ферментативной кинетики - Березин И.В.

Березин И.В., Клёсов А.А. Практический курс химической и ферментативной кинетики — Москва, 1976. — 324 c.
Скачать (прямая ссылка): praktkurshimkinetiki1976.djvu
Предыдущая << 1 .. 62 63 64 65 66 67 < 68 > 69 70 71 72 73 74 .. 117 >> Следующая

выход 6-АПК составит 297 молей или 64,5 кг.
8-16. Если [Е*]0 — общая текущая концентрация активного фермента, то из схемы (8.23) следует, что
-*h„[ES], (8.42)
Так как скорость превращения субстрата определяется выражением
-^ = ?2[ESj, (8-43>
то, разделив уравнение (8.42) на (8.43), получим
d [Е*]0 кяп
d [S] k2 '
или
d[E*]0«^d[S]. (8.44)
Интегрируя выражение (8.44) с начальными условиями [S] - [S]0 при [Е*]0 = [Ё]0, получим
[E*]-[E*10=^([S]0-[S]).
При полной инактивации фермента ([Е*]0 = 0)
_ kt[ EJp ,,н [S]o-[S]'
Ответ: kan = 2,5-10-5 сек-1.
8-17 [11]. Из схемы (8.24) следует, что скорость инактивации фермент-субстратного комплекса равна
(8.45)
Интегрируя выражение (8.45) с начальными условиями [ES] = [Е]0 при t = 0 (так как [S]^>/Cs), получим
[ES] = [Е]0 (8.46)
Рис. 89. Определение кинетических параметров ферментативной реакции при наличии быстрой инактивации фермент-субстратного комплекса (на примере гидролиза нитрокатехол-сульфата, катализируемого арилсульфатазой А)
Исходя из схемы (8.24) и выражения (8.46), скорость образования продукта реакции равна
d[ Р]
— k2 [Е]0 . (8.47)
Интегрирование выражения (8.47) приводит к зависимости концентрации продукта реакции от времени
[Р] = JEk - -Ж (8.48)
Преобразуем выражение (8.J8) к виду
1 а
[Р] [Е]„(1 - *-“*»')
и далее
_1________а_ _а_'
Так как а 1, то, разлагая экспоненциальные члены в ряд Макло-рена, получим
[Р] = ЙГ + [Е]о< • (8'4^
Очевидно, что зависимость (8.49) в координатах (1/ [Р], 1 It) должна быть прямолинейной, с тангенсом угла наклона, равным )/^2[Е]о, и отрезком, отсекаемым на оси ординат, равным а/[Е]0 (рис. 89).
Ответ: ^2=1,27-10~2 М-мл/мг-мин; а=30 мг/М-мл; kvm= = 0,381 мин-1.
ЛИТЕРАТУРА
1. Walker А. С., Schmidt С. L. A. „Arch. Biochem.“, 5, 445, 1944.
?25 К лесов А. А., Березин И. В. „Биохимия", 37, 170, 1972.
ЗТ Foster R. J, Niemann С. „Ргос. Nat. Acad. Scl.“, 39, 999, 19оЗ.
Jennings R. R„ Niemann C. „J. Amer. Chem. Soc.“, 75, 4687, 1953.
5.'Lawrence A. J.t Moores O. R. „Eur. J. Biochem.“, 24. 538 1972.
ФН in berg I., Laidler K. J., ,Can. J. Biochem.", 50, 1360, 1972.
Snoke J. E., Neurath H. „J. Biol. Chem.“, 181, 789, 1949.
Stinshoff K. „Biochim. Biophys. Acta“, 276, 475, 1972.
9. В a n f 1 e 1 d J. E. „J. Chem. Soc.“, 383. 1964.
10. FI el she г О. A. „J. Amer. Chem. Soc.“. 75. 4487, 1953.
11. Roy A. B. „Biochim. Biophvs. Acta“, 276. 488, 1972.
Глава 9
НЕСТАЦИОНАРНАЯ КИНЕТИКА ФЕРМЕНТАТИВНЫХ РЕАКЦИЙ
Превращение субстрата под действием фермента проходит обычно через ряд короткоживущих промежуточных соединений, изучение реакционной способности которых помогает выяснить механизм ферментативного катализа. К настоящему времени разработаны такие методы, которые позволяют определять значения констант скоростей промежуточных стадий ферментативных реакций при изучении кинетики их протекания в стационарном режиме (см. гл. 7). Однако наиболее прямую и надежную информацию о кинетике промежуточных стадий можно получить, изучая ферментативные реакции в нестационарном режиме их протекания (с применением методов изучения быстрых реакций в растворах).
Рассмотрим общую схему ферментативной реакции, включающей образование п промежуточных соединений:
*1 *2 kl к1 +1
E + SZZi X, X, IZZZZT ...
ft-l *-2 h-l *-(< + !)
*/; + !
XnZZ=-E + P. (9.1)
*-n ft- (« + !)
Для каждого из п промежуточных соединений, а также для фермента, субстрата и продукта можно на основе законов химической кинетики записать дифференциальное уравнение, описывающее изменение концентрации вещества во времени. С учетом материального баланса по ферменту и субстрату, полное изменение концентраций всех веществ во времени будет представлено системой (п-j-l) дифференциальных уравнений с постоянными коэффициентами и двух алгебраических уравнений:
[Е] [S] + А_2 [Х2] - (A_j + k2) [Xj],
Щг~ [Х?_,] -Ь Л_(?+1, [Х?+1] - (k-i + kl+1) [Хг],
................................................... (9.2)
^Г1 = К [Х^] + [Е] [Р] - (*_„ + kn+l) [Х„],
-*-(«+.)|Е] [Р|,
[Е]0 = [Е] + [Х1]+[Х„], (9.3)
Предыдущая << 1 .. 62 63 64 65 66 67 < 68 > 69 70 71 72 73 74 .. 117 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed