Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Химия -> Березин И.В. -> "Практический курс химической и ферментативной кинетики" -> 31

Практический курс химической и ферментативной кинетики - Березин И.В.

Березин И.В., Клёсов А.А. Практический курс химической и ферментативной кинетики — Москва, 1976. — 324 c.
Скачать (прямая ссылка): praktkurshimkinetiki1976.djvu
Предыдущая << 1 .. 25 26 27 28 29 30 < 31 > 32 33 34 35 36 37 .. 117 >> Следующая

б. Влияние взаимонезавнсимых конкурентных ингибиторов на кинетические параметры реакций. При наличии двух взаимоне-зависимых конкурентных ингибиторов схему двухстадийной ферментативной реакции можно записать в виде
Е*г.
еС X + S^ES-b-E + P (5.34)
«К А
Eli
Кинетическая обработка схемы (5.34) приводит к выражениям для кинетических параметров ферментативной реакции:
^кат = ^2> (5.35)
^т(каж, = ^8(1+ И-) f 1 + (5.36)
Значения констант Кг и Кг' можно определить с помощью построения зависимости (5.36) в координатах (/Ст(каж), [Ii]), как и в случае анализа действия взаимозависимых конкурентных ингибиторов (рис. 35). Однако на рис. 35 не только отрезок, отсекаемый на оси ординат, но и тангенс угла наклона, равный Ks/Ki(l + [h\!Ki')> зависят от концентрации второго ингибитора [12]. Значение Ks может быть найдено из опытов, проведенных в отсутствие ингибиторов, и тогда величины Кг и Кг могут быть найдены из отрезков, отсекаемых на осях.
в. Влияние взаимозависимых неконкурентных ингибиторов на кинетические параметры реакции. Кинетическая обработка схемы
ei2 + s^z^:ei2s
E + S
I
jl
^ 1 ki ES---------E + P.
[El'S
(5.37)
приводит к выражениям для кинетических параметров ферментативной реакции в присутствии двух взаимозависимых неконкурентных ингибиторов:
(5.38)
*i
К
т (ка ж)
(5.39)
Графический анализ выражения (5.38) следует проводить в координатах (1/Лкат, [Ii]), подобно обработке зависимости (5.33). В этом случае из графика, аналогичного рис. 34, можно найти численные значения констант Ki и Кг'-
г. Влияние взаимонезависимых неконкурентных ингибиторов на кинетические параметры реакции. В присутствии двух взаимонезависимых неконкурентных ингибиторов схему двухстадийной ферментативной реакции можно представить в виде
Е 12-^_тг. ,iSI5
* -^ESI,Ia Л,’
?
(5.40)
Обрабатывая схему (5.40) обычным способом, найдем выражения для кинетических параметров реакции:
к' (5.41)
Ъ — . Лкат
1 +
К т( каж)
К S.
(5.42)
Вычисление значений Кг и Кг в этом случае может быть проведено анализом зависимости (5.41) в координатах (1/Акат, [Ii]), подобно анализу зависимости (5.36) (см. рис. 35).
Задачи
/5-1. /Определить значения кинетических параметров (kKaT и Kmprxig)) гидролиза метилового эфира N-ацетил-Ь-валина, катализируемого а-химотрипсином [7], исходя из данных табл. 1.
Таблица I
Зависимость начальной скорости ферментативной реакции от концентрации субстрата для гидролиза метилового эфира N-ацетил-Ь-валина, катализируемого а-химотрипсииом. Условия опыта: pH 7,8; 25° С; иоиная сила 0,1М (КС1), [Е]0 = 3,8-10-5М
[Sle. М К.-10*, м.сек-1
0,200 4,57
0,124 3,83
0,124 3,84
0,091 3,33
0,091 3,31
0,071 2,97
0,071 2,93
0,060 2,67
0,060 2,74
5-2. Определить значения kKaT и Кт(Каж) Для гидролиза метило-ього эфира N-бензоил-Ь-аминомасляной кислоты, катализируемого «-химотрипсином [7], исходя из данных табл. 2.
5-3. Исходя из данных табл. 3, определить кинетические параметры гидролиза метилового эфира Ы-ацетил-Ь-норвалина, катализируемого а-химотрипсином [7].
сэ-%) Определить значения кинетических параметров гидролиза метилового эфира М-ацетил-Ь-аланил-Ь-фенилаланина, катализируемого а-химотрипсином [7], исходя из данных табл. 4.
5-5. Определить кинетические параметры гидролиза этилового эфира М-транс-циннамоил-Ь-тирозина, катализируемого а-химо-трипсином, исходя из данных табл. 5.
Зависимость начальной скорости ферментативной реакции от концентрации субстрата для гидролиза метилового эфира ^бензоил-Ь-аминомасляной кислоты, катализируемого а-химотрипсином. Условия опыта: pH 7,8; 25° С; ионная сила 0,1М (KCI), [ЕJо = 2,16- 10_6М
[Slo-KP, М
V0- Ю7, М -сек
4,25
4,31
3,52
3,60
3,10
3,12
2,71
2,77
2,45
2,40
2.24
2.24
1.49
1.49 1,12 1,12 0,90 0,90 0,75 0,75
Таблица 3
Зависимость начальной скорости реакции от концентрации субстрата для гидролиза метилового эфира ^ацетил-Ь-норвалина, катализируемого а-химотрипсином.
Условия опыта: pH 7,8; 25° С; ионная сила 0,1М (КС1); [Е]0 = 2,62.Ю-7М
ISlo-'O’, М Ко'Ю7, М.сек 1
Предыдущая << 1 .. 25 26 27 28 29 30 < 31 > 32 33 34 35 36 37 .. 117 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed