Молекулярная биология гена - Уотсон Дж.
Скачать (прямая ссылка):
он
Уридиндифосфатглюкоза
Гликоген (длина цепи п'
ГОСНЙ
он
’1
О—@~(Ф) — Уридин
Гликоген (длина цепи п + I )
носн2
Уридин —|
НОСНо
носн,
Рис 6-6 Стгоетгатев гликогена из глюкозы
г~н
Гм-Ше-Вал-Га^Ш-фсЦис-Ала-Сер-Вал-Цис-Сер-МейТир-Гмн-ЛеиГлу-Аси-Тир-Ци^-Лсн S ^
I /
феН‘Вал^сН'-Ш-ГШ'Яей-Шс-Гли-Сер-Гис-Ш-ВаЛ'Гл1/-Ала-Леи-Тир-Лей-Ва^ис-Гли-Ш-^г-Ш-Феыу
Фен
Тир
Ала-Лиз-Про-Тре
Гис. 0-7 Последовательность амицокпслот в бычьем инсулине.
кислот. Химотринсиноген превращается в хиыотрипспн которым катализирует гидролиз определенных пептидных связей. ТТад определением последовательности аминокислот в молекуле химотрппсиногена (рис. (3-8) несколько талантливых химиков работали па протяжения ряда лет (в общей сложности около 15 человеко-лет) В наше время усовершенствование аналитических методов делает подобные исследования значительно более легкими. Теперь для определения структуры относительно неболь шого белка может быть достаточно (при удачном стечении обстоятельств) менее одного года работы.
Помимо вопроса о порядке чередования аминокислот, встает также проблема укладки иолниептидной цени в уникальную трехмерную структуру Нормальное функционирование почти всех белков зависит пе только от правильного чередования аминокислот в цепи, но также и от точной укладки полинептидной цепи в пространстве. Как мы уже отмечали в гл. 4, полипептидный остов не является совершенно жестким; многие атомы остова сохраняют способность к свободному вращению н могут занимать различное положение. Однако в силу тенденции к образованию максимальною числа слабых связей данный белок обычно принимает вполне определенную уникальную конформацию Существуют достаточно убедительные косвенные доказательства того, что в одинаковых условиях все молекулы белка, имеющие то/кдественные последовательности амииокислот, имеют также и тоисдестветше шатнввые» конфигурации. Эти представления получили и прямое подтверждевие в экспериментах по определению полиой трехмерной структуры белка миоглобина. Па рис. 6-9 представлена структура миоглобина, установленная при помощи рентге-нострунтуриого анализа. Несмотря на то что молекула миоглобина невероятно сложна, при детальном изучении ео структуры можно уловить однуг важную особенность, которая определяет собой ее общую конформа-пию пептидная цепь уложена таким образом, что группы, способные приталиваться друг к другу, оказываются рядом.
1__________________________________________ ю ______________________ 1 ____________
НзЫ^Ц^Гг/г,; f{gg/r}[ фо \[лло ^ Иле. [] Глн |-| Про |-| Вал ]-р7сД~Ц Сер ^?т7}] Ль^ ||~Сер jffi'pffil и^е Н Вая]\ Гт |-
4
zv ______________ ___ ои_________________________ . ¦» _____ ____ ____
М™ N ГЧ N Валюте Н Гаи Сер \\Tpu Н Про \jTpu [(ПиГ^ ВдлЦ Сер tfjleS ЦПи (рйГ^ДИ^ Тре]\Гли ЦФен Ц Пл\\ Фен [
Рис 6-8. Последовательность аминокислот в химотрипснногопе
Решающим отапом в установлении таких белковых последовательностей является получение небольших хорошо охарактеризован
пмф тшчттплтппттт AnarMfluwin ТТ -___ _____ ~~иптчпттлп Лтлиппч тгишмттт НЯ^.ГПЙПЛЯЙТ ПАДТЙЛТТКЙ Г-РITНГТ
вешающим птпппм в установлении таких fip.TiT.-nni.iy последовательностей является получение яеоош.шлх лириши пых полипептпдпых фрагментоп. Для этой цели используется, папрпмер, фермент трипсин который расщепляет пептидные свяаи рядом с остатками аргинина и лизина со стороны их карбоксильных групп, образующиеся при этом так называемые втрпптн ш-ские фрагмента» сыграли неоценимую роль при установлении почти всех расшифроиаишлх последовательностей белков Ьолре крупные фрагменты оЗычно плучгог при ио.инцк о5работки бр эм циан ом, который расщепляет пептпдпые связи со сторопы кар<'о ксильпой группы значитецьчэ более редко встречающейся в белках аминокислоты метионина
Рис. 6-9. Трехмериая структура мпоглобпна, установленная при помощи реитгеностру к турыого ana шза (Kcndrev,, Sci Лщ,, 205 100—101, 1961).
Нотипептндиый остов показан косой штрп ховкой, группы гома — перекрестной.
ПЕРВИЧНАЯ СТРУКТУРА БЕЛЬ А.
Многлобии, содержащий 153 аминокислоты, относится к числу тех весьма многочисленных белков молекула которых состоит из одной полипентид-иой цепи. Многие другие белки состоят нз двух или нескольких цепей.
