Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Уотсон Дж. -> "Молекулярная биология гена" -> 275

Молекулярная биология гена - Уотсон Дж.

Уотсон Дж. Молекулярная биология гена — М.: Мир, 1978. — 706 c.
Скачать (прямая ссылка): molekulyarnayabiologiyagena1978.djvu
Предыдущая << 1 .. 269 270 271 272 273 274 < 275 > 276 277 278 279 280 281 .. 317 >> Следующая

11НДХ КЦИЯ ФЕРМ ГИТОВ КЛЕТКИ ХОЛЯИНА,
УЧАСТВУЮЩИХ В СИНТЕЗЕ ДПК
Отсутствие четких представлений о том, каким образом Т-антигену удается контролировать почти все поздпие процессы, в настоящее время является, по-видимому, основным препятствием на пути к пониманию реплик,шнн вируса SV40. Ключом к разгадке этого вопроса могут стать данные о том, что количество ряда ферментов клетки-хозяина, участвующих в синтезе ДНК, резко увеличивается после заражения вирусом. Это происходит, в частности, тогда, когда вирусом SV40 заражают клетки, блокированные на стадии (1,, синтез ДИК в которых прекратился. Рост вируса в таких
f -My глция
I
I
Plie. 20-14. Локализация температурочувстви-тельнои мутацпи вируса SV40 путем трансформации клеток под влиянием частичных гетеродуплексов, образованных из мутантной кольцевой одноцепочечной ДНК и специфического фрагмента ©дноцепочечпом ДНК дикого типа, полученного под действием рестриктаэы. .4. Темпера гуроч^вствптельньт м\танг вириа SV40. Он образует бляшкд в культуре клеток, растущих при 32, но це при 40 °С. Б. Одно-цепочечное кольцо образуется в резульш разрыва в одной из цепей двухцепочечпош кольца. В. Двъхцепочсчпая ДНК вируса SV40 дикого типа (ДТ). Г. Фрагмент дв\\-цепочечной ДПК ДТ образуется под действием рестриктааы. Д. При нагреваннп получаки одноцепочечный фрагмент ДНК ДТ. С. Гибридизация (отжиг) приводит к образованию гетеродуплекса. Ж. 11рп неперлтсснвной температуре (40 °С) клетки заражают частичным гетер о дуплексом. 3. В результате репарации гетеродуплекс превращается в двухценочеч-поо кольцо. //. В дочерней ДНК вируса SY'iO ts-дефскт сохраняется; при 40 °С бляшьп не образуются. Я. В зтои дочерней ДНК ls-дефект исправляется и при 40 °С образуются бляшки
клетках происходит несмотря на то, что до инфекции и них отсутствуют многие ферменты (например, ЦДФ-редуктаза, дТМФ-синтетаза и ДПК-полимераза), катализирующие образование различных нуклеотидов — предшественников ДНК и синтез полинуклеотидов. Следовательно, эффективное заражение вирусом SV40 должно каким-то образом деблокировать механизмы клеточного контроля, которые в норме выключают синтез ферментов, необходимых для образования ДНК, если их присутствие более
гм
О I носителыюе си.и.*рж«ииг
\
20----------------------------------------
-------K.icrowH 1Я ДН К
all М Ф-лезамнпа !.i
Г ММ ПД11НМ1Н.1 м
-------ДНК -попнм срази
Опухолевый ядер-ны и ант in сн
10 -
5 -
N________________________
_________1_________I_________I_______
0 10 20 30 40
Время, ч
1’ис. 20-15. Индукция ферментов, участвую-Ш1* в синтезе ДНК после лараженпя иермис-ивннх клеток обезьяп вирусом SV40 (Dulbec-bcientific American, апрель 19G7).
Б
Ире' и пчс I мра-ьинпя, ч
До появления клеточных ферментов начинает-ся еннгез вярус-спецпфичсско! о белка —ядер ного Т-антцгепа.
А. Незаражепшяе клетки. Б Заражсипыс клсткн.
ие требуется. Скорее всего Т антшен участвует в процессах индукцпн, так как количество различных ферментов начинает увеличиваться с pan у же после появления Т-антигена в ядре (рис. 20-1Г)).
Ипдукцпя ферментов, необходимых для образования ДНК, приводит не только к синтезу ДПК вируса SV40, но также к усиленному синтезу ДНК клетки-хозяина. Те определенные сигналы, считывание которых обусловливает начало репликации кольцевой хромосомы ияруса SVM0, ден ствуют также и на многие клеточные хромосомы. Это явление, представляющееся на первый взгляд странным, приобретает определенный смысл, если принять во внимание генетическое происхождение ферментов, необходимых для образования ДПК. Они должны кодироваться клеточными хромосомами, так как хромосома вируса SV40 слишком коротка, чтобы справиться с этой задачей. Информация для все\ этих ферментов потребовала бы значительно большей величины ДНК — такой, папрпмер, как у ДНК фага X (т е с 10 раз больше, чем у ДНК вируса SV40)
Индукции нс происходит, если блокирован синтез РНК; следовательно, Т-ангиген либо прямо, либо опосредованно влияет на специфичность транскрипции. Как показывают недавно полученные данные, он прочно связывается с ДПК в стартовых точках синтеза ДНК и PIIK (илп вблизи от них), что свидетельствует в нольяу прямого эффекта. Возможно, Т-антиген действует подобно белку, активирующему катаболитные гены (ПАК) (стр. 374), и изменяет состояние ДНК таким образом, что она становится более легко транскрибируемой (или реплицируемой). Вместе г тем он может быть пе чем иным, как сг-подобным фактором специф 1чностн, который связывается непосредственно с РНК-полимеразой и определяет порядок транскрипции генов. Исключительно высокая скорость седиментации нативного Т-антигена может быть результатом его связывания с тон формой эукариотической РНК-полимеразы, которая ответственна за синтез мРНК (а также инициацию синтеза ДНК).
Предыдущая << 1 .. 269 270 271 272 273 274 < 275 > 276 277 278 279 280 281 .. 317 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed