Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Уотсон Дж. -> "Молекулярная биология гена" -> 231

Молекулярная биология гена - Уотсон Дж.

Уотсон Дж. Молекулярная биология гена — М.: Мир, 1978. — 706 c.
Скачать (прямая ссылка): molekulyarnayabiologiyagena1978.djvu
Предыдущая << 1 .. 225 226 227 228 229 230 < 231 > 232 233 234 235 236 237 .. 317 >> Следующая

Глутамин 2 0 Фолиевая кислота 10-э NallgPOi ИоО 1 Стрептоми 0 005%
Гистидин 0,05 Никотинамид Ю-з ЬаПСОз 20 цин1)
Мзолейцин 0,2 Паптотеновая 10-з СаС!, 1 Днализован- 5\
Лейцин 0,2 кислота Mgcr2 0 5 ная сыворот
Лизин 0.2 Пирндоксаль Ю-а ка человека
Метионин 0,05 Тиамин 10~3
Фенилатанин 0,1 Рибофлавин 10-4
Треонин 0.2
Триптофан 0.02
Тирозин 0.1
Валин 0,2
Ц Для пречотпращения бактериального ааражлшя
потому, что при клонировании происходит отбор на повышенную «гер неточность» клеток
Добавление сыворотки необходимо дочти для всех клеточных линий, полученных от позвоночных. Это позволяет предполагать, что один или несколько сывороточных факторов играют ключевую роль в регуляции деления клеток ш vivo. In vitro конечная плотность клеток в культурах той или иной клеточной лннии часто определяется концентрацией сыворотки Некоторые клеточные линии, образующие в 1%-ной сыворотке мопослои, в 10%-ной сыворотке дают газоны толщиной в 3—4 клетки. Большое значение имеет и величина pH Для разных клеточвых липни оптимум pH может быть различным, по большинство нормальных клеток лучше всего растет при pH около 7,6.
ЛИНИИ «НОРМАЛЬНЫХ» КЛЕТОК
В ранний период работы с культурами клеток высказывалось подозрение, что клетки приобретают способность расти в культуре только после определенных мутаций, которые Делают их способными к неограниченному росту и тем самым похожими на раковтте клетки. Такое мнение возникло не только потому, что линии раковых клеток, как правило, получать было гораздо легче, по также и потому, что клетки многих так называемых «нормальных» линий своей округлой формой и неорганизованным ростом напоминают раковые клетки (рис. 18-7). К счастью, эти предположения оказались ошибочными. Выяснилось, что у линлн мышиных клеток особенности роста зависят от плотности, при которой выращиваются вторичиые клетки. Если вторичные культуры всегда выращивать до высоких конечных плотностей, то получающиеся линии образуют газоны дезорганизованных клеток толщиной в несколько слоев. Такие клетки, будучи «нормальными» по происхождению, обычно выглядят как раковые и при введении иммунологически идентичным мышам образуют опухоли. Если же вторичиые культуры таких клеток выращивать только при пизких плотностях, когда межклеточные контакты редки, то образующиеся клеточные лннии морфологически сходны с нормальными фибробластами и растут в виде тонких организованных монослоев, характерных для нормальных клеток (рис. 18-8) В соответствии со своен морфологиен они редко вызывают образование опухолей при введении мышам.
Осознание того факта, что в «критических! период» действуют мощные факторы отбора, дало возможность относительно легко выделять клеточные линии с желаемыми особенностями роста. Поддерживая число клеток па низком уровне, молено исключить отбор в пользу одухолеподобных клеток, способных хорошо расти даже при высокой плотности культуры В настоящее время имеется ряд клеточных линий (например, З'ГЗ), рост которых во многом сходен с ростом «нормальных» ктеток и которые можно поэтому использовать для сравнения с аналогичными раковыми клетками
ТРАНСФОРМАЦИЯ КЛЕТОК
Внезапное превращение клеткн нормального типа в клетку, которой при сущи многие особенности ракового роста, называется трансформацией Снонтапно это явлепие происходит очень редко, но, как мы увидим в от,лои из последующих глав, частота трансформации резко возрастает поело заражения клеток опухо хевымл вирусами, воздействия канцерогенных веществ и облучения. Независимо от своего происхождения трансформированная клетка не только часто оказывается способной давать начало опухолям, но и характеризуется обычно более округлой формой (из-за менее упоря
Риг 18- I Сравнение морфологии норма-ношх (линия 9) а транс фнрмприванных: (лпнни 14L) клеток из эмбрионн хомячка {Goldman et al , CoUl bpnng Harbor Чутр . XXXIX, 601, 1975) H.'t фазово-контрастных микрофотографиях A и /.i( 250) видно, что нормальные клетки при
pot tv на илоскоп поверхности имеют унло щешгую фохшу. Клетка в центре движется направо причем ее веерообразный передний к [«и снабжен волнистыми выступами (у на да
но стрелкой) Эти две фотографии сделаны с интервалом 5 ч. На фото В п Г показали раковые клетки хомячка (X ЗОН), возникши» к результате трансформации аденовирусом 2 Они имеют значительно более округлую фор-м> и очень малоподвижны (стрс.шамп показаны клмKit ni сдвинувшиеся с места за 1!) чв совой ннтерва i между двумя фото) Дочерние клетки обычно не расходятся и мсльчапшие клеточные островки
Предыдущая << 1 .. 225 226 227 228 229 230 < 231 > 232 233 234 235 236 237 .. 317 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed