Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Уотсон Дж. -> "Молекулярная биология гена" -> 112

Молекулярная биология гена - Уотсон Дж.

Уотсон Дж. Молекулярная биология гена — М.: Мир, 1978. — 706 c.
Скачать (прямая ссылка): molekulyarnayabiologiyagena1978.djvu
Предыдущая << 1 .. 106 107 108 109 110 111 < 112 > 113 114 115 116 117 118 .. 317 >> Следующая

Прямое доказательство того, что двойные спирали ДНК действительно могут обмениваться цепями, было получено при наблюдении за процессом кроссииговера с помощью электронного микроскопа. Поскольку кроссинговер происходит очень часто в процессе репликации ДНК фагов, электронно микроскопическое изучение систем фагов "К и Г4 предоставляет наилучшие возможности для прямой проверки предполагаемого молекулярного механизма кроссипговера Использование системы фага К для денатурациониого картирования дало наиболее четкие из всех получен ыых до настоящего времени результатов, которые показывают, что гомологичные участки двух спаривающихся молекул ДНК всегда связаны между собой перекрещивающимися мостиками (рис. 10-16) В равной степепи важно и то, что на микрофотографиях удается различить индивидуальные цепи в тех участках молекул ДНК, которые связаны между собой мостиками, что однозначно свидетельствует о возможности перехода этих цепей из одной двойной спирали в другую.
ГЕТЕРО ДУПЛЕКСЫ
Образование гетсродуплексных участков ДИК, нередко наблюдающееся во время кроссииговера, представляет собой еще одно экспериментальное подтверждение гипотезы, согласно которой главным событием рекомбипа
Рве 10-16 Визуальное наблюдение аа щю- образная тиаграмма кроссииговера при пово-
цкеом кроссин говора мегьду /шумя i омологич роте на 180° превращается в прямоугольную
пюш участками ДПК фага А. с помощью элек- диаграмму (С иобеацого разрешения д-ра
•ровного микроскопа Инмана, Висконсине.кип университет.)
/ Электропная микрофотография ТТ Схема, показывающая, каким образом обычная кресто-
ции является спариваиис одноцедочечных участков ДНК. Гетеродуплексы — это такие участки рекомбинантных молекул ДНК, в которых обе цепи не полностью комплементарны друг другу Они возникают в том случае, если основной спаривающийся участок вместе с соседним участком, образовавшимся в результате миграции ветви, включает сайт (или сайты), по которому все родитольские хромосомы различаются между собой генетически. Гетеродуилекспые участки были обнаружены у всех вирусов, для которых был проведен детальный генетический анализ На одну молекулу ДНК фага Т4 приходится в среднем одип гетеродуплекс-ный участок длиной в несколько тысяч нуклеотидпых пар У фага к гетеро-дуплексы также были хорошо охарактеризованы, и было показано, что и в этом случае их длина значительно больше, чем можно было бы ожидать, если бы они возникали только в результате обычного спарипа ния основапий. Таким образом, можно думать, что гетеродуплексы в основном образовались благодаря миграции ветви — процесса, при котором происходит перемещение цепей из одной двойной спирали в другую
Гетеродуплексы могут существовать только в точение очень короткого промежутка времени, так как нрн дупликации рекомбинантных молекул ДНК происходит расщепление альтернативных аллелей (рис. 10-17) Это впервые было показало па фаговых системах, использование которых дает возможность с помощью простого визуального обследования стерильных иятеи выявить смесь двух генетически различных типов рекомбинантов Когда ДНК родительского фага Т4 содержит гетеродуплекс но участку rll, образуются неоднородные но своему внешнему виду (мозаичные) сторильные пятна одни участки этих пятеи характерны для фенотипа штамма rll, в то время как другие—для фепотина дикого штамма г* (рис 10-18).
НА УЧАСТКЕ КРОССИНГОВЕРА РЕКОМБИНАЦИЯ НЕ ВСЕГДА БЫВАЕТ РЕЦИПРОКНОЙ
В раииих исследованиях было устаповлеш, что при кроссинговере между различными генами происходит, казалось бы, обязательное образование реципрокных рекомбинантов (рис. 10-19). Однако при изучении рекомби-пантов, образовавшихся между близкими сайтами одного и того же гена, были выявлены исключения из этого правила. После этого обнаружение нереципрокного поведения генетического материала при кроссинговере ста то обычным явлением. Этот феномен, названный генной конверсией, лучше всего изучен у таких организмов, как дролуки или Neurosporu, у которых можно визуальпо различить все продукты, образовавшиеся в результате оцного цикла мейоза Здесь были найдены расщепления с соотношением 3 . 1 вместо обычио наблюдающегося расщепления с рав ным соотношением составляющих аллелей 2 . 2.
Такие исключения из общего правила пе противоречат изложенной выше гипотезе мехапизма кроссинговера. Объяснение этому дано па рис. 10-17, из которого следует, что па окончательный результат расщепления гепов, локализованных вокруг участка кроссинговера, молгет оказывать влияние процесс репарации, так как при этом процессе происходит уаиавание нарушений двойной спирали в гетеродуплексе н удаление какой-либо одной неправильно спаренной пары оснований. В зависимости от того, происходит ли удаление осповапий или рекомбипация осуществляется без репарации, возникает соотношение аллелей либо 2 . 2, либо 3 • 1 Нам до сих пор не известно, какая часть переципрокпых рекомбинантов, образовавшихся вследствие генной конверсии действительно обусловлена репарационным синтезом, гак как сложная серия разрывов под действием эндо- и акзонуклеаз во время рекомбинации также должпа
Предыдущая << 1 .. 106 107 108 109 110 111 < 112 > 113 114 115 116 117 118 .. 317 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed