Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Мазин А.В. -> "Методики для работ по генетической инженерии"

Методики для работ по генетической инженерии - Мазин А.В.

Методики для работ по генетической инженерии

Автор: Мазин А.В.
Другие авторы: Кузнеделов К.Д.
Издательство: Новосибирск
Год издания: 1986
Страницы: 61
Читать: 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16
Скачать: metodikidlyarabotgenetiche1986.djvu

АКАДЕМИЯ НАУК СССР СИШРСКОЕ ОТДЕЛЕНИЕ Институт цитологи ж генетта
ВС1ЕОШЮЕ ШОХШШЖОЕ ОБЩЕСТВО Новосибирское отделение
оперативно-информационный материал
MemoquKU
DAfl РАБОТ ПО ГЕНЕТИЧЕСКОЙ ИНЖЕНЕРИИ
НОВОСИБИРСК 1986
ВВЕДШИЕ
Настоящий материал издается по инициативе комплексного творческого молодежного коллектива (ЗШК) и написан в основном его членами. Необходимость написания такого материала связана с очень быстрым развитием методов молекулярной генетики и генетической инженерии и внедрением их во многие отрасли биологической науки. Всего лишь несколько лет назад эти методы были достоянием только двух лабораторий нашего Института, а сейчас их осваивают или уже активно использую в десяти основных лабораториях или грунтах. Молекулярно-генетические методы довольно трудоемки и, чтобы ими овладеть, требуются, как правило, значительные усилия и время. В то же время у нас ощущается острая нехватка методической литератур! по генетической инженерии, и даже недавнее издание на русски! языке замечательной книги Т.Маниатиса, Е.фрича и Дж.Сэмбрука "Молекулярное клонирование" полностью этой проблемы не решило.
Предлагаемый материал был задуман как собрание кратких лаконично написаных методичек. В подборку публикуемого материала мы стремились включить, прежде всего, наиболее широко используемые методики, которые за последние годы были модифицированы; методики, освоение которых связано с определенными трудностями; а также методики, современное описание которых отсутствует в доступных изданиях на русском языке.'
Для написания данного материала были привлечены квалифицированные сотрудники, имеющие опыт работы с рекомбинантными ДНК.хПоэтому многие» если не большинство разделов, содержат усовершенствования или элементы оригинальных авторских разработок.
От имени всех авторов мы благодарим член-корреспбн-дента АН СССР Р.И.Салганика и других сотрудников Института цитологии и генетики СО АН СССР, поддержавших издание этого материала и оказавших помощь в его составлении и опубликовании.
введение
Мы будем признательны за асе замечания 'л нежелания то содержанию и оформлению этого материала.
А.В.Маззн
К.Д.Кузнеделов
СОЛЕРЖЯНИЕ
ВВЕДЕНИЕ
ВВДЕЛЕНИЕ ДНК ПЛАЗМИД И БАКТЕРИОФАГОВ
I. Выделение ДНК фага %................................. I
(Блинов А.Г.)
П. Метод быстрого выделения плазмидной ДНК ........... 4
(Холодилов Н.Г.)
Ш. Выделение плазмидной .ДНК центрифугированием в двухступенчатом градиенте хлористого цезия (Кузьминой А.В.''
A. Выращивание бактерий и амплификация
плазмидной ДНК................................ 6
Б.' Получение осветленного лизата ............. 6
B. Приготовление градиента CeCi и
центрифугирование ................... 7
ГИДРОЛИЗ ДНК ЭНДОНУКЛЕАЗАМИ РЕСТРИКЦИИ ............. 9
(Боровков А.Ю.)
ВВЕДЕНИЕ МЕТКИ В ДНК
I. Введение концевой 'метки в ДНК...................... 14
(Мазин А.В.)
А. Введение метки в ДНК с помощью
псшшухлеотидкиназы фага Т4 ................... 14
содержание_______________ii
Б. Введение концевой метки в ДНК с
помощью фрагмента Кленова ................ 16
П. Ник-трансляция ................................... 18
(Протопопов М.О.)
ЭЛЕКТРОФОРЕЗ ДНК.......................................... 20
(Боровков A.D.)
А. Электрофорез в агарозных гелях ............. 20
Б. Электрофорез в акриламидных гелях ...... 22
ТРАНСФОРМАЦИЯ E.COLI МН-1 ПЛАЗМИДНОЙ ДНК
С ИСПОЛЬЗОВАШЕМ ХЛОРИСТОГО МАРГАНЦА ...................... 27
(Наякшин А.М.)
ДЕТЕКЦИЯ РЕКОМБИНАНТНОЙ ДНК МЕТОДОМ МОЛЕКУЛЯРНОЙ
ГИБРИДИЗАЦИИ ............................................. 30
(Кузнеделов К.Д.)
A. Перенос на фильтры небольшого количества
бактериальных колоний ..................... 31
Б. Перенос на фильтры большого количества
бактериальных колоний ..................... 32
B. Перенос на фильтры бляшек бактериофага 33
Г. Амплификация бактериофага Л- in situ ... 34
Д. Подготовка фильтров для гибридизации ... Ж
Е. Гибридизация ДНК, иммобилизованной на
фильтрах,с меченными зондами .............. 36
ОПРЕДЕЛЕНИЕ НУКЛЕОТИДНОЙ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ ДНК
содержание Ш;¦.
I, *1то$ определения первичной структуры ДШ .
до Максаму-'Гилбер'гу-..................... 40
.(Мазки А.Б-,)
A. Зяоция фрагментов ДНК из геля путем
< 1 > 2 3 4 5 6 7 .. 16 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed