Биология развития млекопитающих - Манк М.
ISBN 5-03-001333-4
Скачать (прямая ссылка):
матерей, оборудования и материалов, изложены в гл. 1 н 2. Перенос
эмбрионов описан в гл. 13, разд. 6.4.
химер метода инъекции клеток в бластоцисту появляется возможность
анализировать судьбу более поздних эмбриональных стадий, чем это
позволяют агрегаты морул. И наконец, с помощью инъекций в бластоцисту
можно маркированные клетки ввести в линию клеток зародышевого пути.
3. Клеточные маркеры в химерных системах
Набор используемых маркеров и их характеристики суммированы в табл. 6.2.
(Описание потенциальных маркеров и маркеров для видов, не относящихся к
млекопитающим, можно
Таблица 6.2. Маркеры, используемые при работе с химерными мышами1)
Маркер Метод Ткани Выбор ЛИНИН2" (см. (101) Литературный источ-
ник
А. Дающий информацию о топографии
Пигмент
Меланин Прямое дение наблю- Пигментный эпителий сетчатки,
мембрана лабиринта внут- Широкий; альбиносы/не- альбиносы 16, 11]
реннего уха Широкий; [6]
Меланин/воло- Прямое наблю- Волос
сяиой фолли- денне ряд генов,
кул (эффек- действующих
ты генов ок- на ме шноци-
раски покро- гы или воло-
вов) сяной фолликул
Полиморфизм I р.че •¦'(о
р-глюкуронпда- Гистохимиче- Печень, другие Широкий [11, 12]
за ский3) тканн смешанного
состава [11, 131
р-галактозида- Г нстохнмиче- Клетки Пур- Широкий
за скнй3) кинье в мозжечке, ядра черепно-мозговых, нервов,
эпителий молочной желе-
зы 11]
Яблочный фер- Г нстохимиче- Внезародыше-
мент скнй3) вые оболочки, другие
ткани [11, 14]
Глюкозофосфа- Гистохимиче- Многие Широкий
тизомераза ский и имму-
(ГФИ) ногистохнми- ческин
Маркеры клеточной поверхности Н-2-антнгены
1а-антигены Thy-1-антигены
Иммуиогисто-
хнмическнй
Иммуногисто-
химическнй
Иммуногнсто-
хнмический
Не у эмбриона,, или новорожденного Лимфомиэло-ндные Тимоциты (?),
аибробласты, НС, мноэпи-телиальные клетки; может не иметь клеточной авю-
liOM'IH (?)
Широкий
Широкий
Ограничен
[15]
Данных нет
[16]
Продолжение табл. 6.2
Мэ.ркер Метод Ткаин Выбор линии-1) (см. [101) Литературный источник
Полиморфизм углеводов, узнаваемый лектннамн Гистохимия связывания
лекгииов Эпителий кишечника н эндотелий сосудов после 12-го дня
беременности Ограничен (см. табл. 6.7) [17-19]
Морфологические маркеры Мутация "Beige"
Гистохимия Грану лоциты, Ограничен
внутрикле- тучные клет-
точных гра- ки, остеокла-
нул сты
"Специфическая дегенерация клеток
[11, 20, 21)
Дегенерация Морфология на Сетчатка Ограничен [22]
сетчатки мы- гистологиче-
ши ских срезах
Дегенерация Морфология и а Клетки Пур- Ограничен [5]
клеток Пур- гистологиче- кинье моз-
кинье ских срезах жечка
Специфические различия в ДНК
Различия в са- Гибридизация Любые Ограничен в на- [23]
теллит ной in situ на стоящее вре-
ДНК между срезах мя
видами мы- Mus muscu-
ши lus/Mus caroli
Б. Не дгющйй информации о топографии
Полиморфизм, выявляемый с помощью электрофореза
Глюкозофосфа- Электрофорез Любые, в том Широкий [1, ю,
тизомераза тканевого го- числе ранний
могената эмбрион
Нзоцитратде- Электрофорез Печень, почки, Широкий [ 5]
гидрогеназа тканевого го- селезенка,
могената мышцы
Главный белок Моча Печень живой Широкий [26]
мочи (см. мыши
ПО, и])
Хромосомные маркеры
Тб Морфология в Любая митоти- Широкий [10, 11,
клеточных ческая ткань; Гл. 5
культурах из может потре-
ткани боваться
кратковре-
менное куль-
тивирование
Методы маркирования клеток и их применение
159
Продолжение табл. 6.2'
Маркер
Тканн
Выбор линии:) (см. [101)
Литературный источник
Y-хромосома
Тетраплоидия
Другие
Морфология
клеточных
культурах
ткани
Морфология
клеточных
культурах
тканн
Морфология
клеточных
культурах
ткани
из
Любая митотическая гкань; может потребоваться кратковременная культура
Любая митотическая ткань; может потребоваться кратковременная культура
(разьи тие аномальное)
[11, 28]
[29]
Ю]
*) Продолжение обсуждения клеточных маркеров у химер см. в работах [1, 6,
7,.
Щ.
2) Сведения об имеющихся ннбредных линиях мышей можно найти в работе [101
и в периодических выпусках "Mouse News Letter". Б любую пару линий,
выбранных для получения химер, удобно ввести маркер окраски шерсти для
того, чтобы с легкостью отобрать в потомстве химерных особей.
3) Эти ферменты не обязательно во всех клетках нормальной (не химерной)
ткани дают устойчивое позитивное окрашивание. Поэтому прежде, чем
приступать к интерпретации результатов, рекомендуется сделать
соответствующий положительный и отрицательный контроль окрашивания
(предпочитаются срезы, расположенные рядом с химерными срезами на одном и
том же предметном стекле).
найти в обзоре Веста [11].) Для практического применения наиболее
существенное значение имеют маркеры двух типов: выявляемые визуально на
гистологических срезах или на тотальных препаратах, и те, для обнаружения
которых необходима процедура электрофореза. Преимущества и недостатки
маркеров каждого типа при анализе химерных тканей обсуждаются в разд. 5.
