Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Лобанок А.Г. -> "Микробный синтез на основе целлюлозы: белок и другие ценные продукты" -> 31

Микробный синтез на основе целлюлозы: белок и другие ценные продукты - Лобанок А.Г.

Лобанок А.Г., Бабицкая В.Г., Богдановская Ж.Н. Микробный синтез на основе целлюлозы: белок и другие ценные продукты — Мн.: Наука и техника, 1988. — 261 c.
ISBN 5-343-00283-8
Скачать (прямая ссылка): microbniysinteznaosnovecelulozi1988.djvu
Предыдущая << 1 .. 25 26 27 28 29 30 < 31 > 32 33 34 35 36 37 .. 131 >> Следующая

1982). Целлюлолитическая активность у бактерий чаще связана с клеткой, чем у грибов.
По данным Ramasamy, Verachtert (1980), Pseudomonas sp. продуцирует две внеклеточные эндоглюканазы. Часть эндоглю-каназной активности связана с клеткой. Установлено, что источник углерода влияет на локализацию эндоглюканазы, при росте бактерий на среде с целлюлозой клеточносвязанная эндо-глюканаза локализована ближе к наружной поверхности клеточной стенки, чем на среде с целлюлозой. Обнаружена цитоплазматическая эндоглюканаза, которая отличается от периплазма-тической эндоглюканазы.
Ghosh et al. (1982) сообщают, что у двух мутантов Trichoderma reesei — сверхпродуцентов целлюлаз, устойчивых к катабо-литной репрессии, в стадии активной секреции целлюлазы эндо-плазматический ретикулум более развит, чем у исходного штамма. Авторы полагают, что мутации дезактивируют регуляцию биогенеза эндоплазматического ретикулума и создают таким образом потенциал для усиления синтеза и секреции внеклеточных целлюлаз. Получены прямые доказательства ассоциации целлюлаз с эндомембранной системой Trichoderma reesei. Локализация целлюлаз внутри органелл, ответственных за синтез ферментов, его модификацию и секрецию, указывает на то, что целлюлазный комплекс является активно секретируемым ферментом. После секреции целлюлазный комплекс может ассоциироваться с клеточной стенкой (Chapman et al., 1983).
Иммуноцитохимическими и цитохимическими методами пока-
63
зано, что целлобиогидролаза и (3-1,4-глюканаза Trichoderma reesei локализуются в цистернах эндоплазматического ретикулу-ма и в мембранных комплексах гиф гриба, растущего на целлюлозе. Оба фермента обнаруживаются также в культуральной среде. В гифах, выращенных на среде с глюкозой, специфические реакции на фермент отсутствуют (Chapman et al., 1983). На основании результатов фракционирования в градиенте плотности сахарозы мицелия гиперпродуцента целлюлазы Trichoderma reesei Rut 30 сделан вывод о том, что в отличие от легких везикул значительная часть карбоксиметилцеллюлазы в тяжелых везикулах находится в неактивной форме (Glenn et al., 1985).
Aspergillus terreus 17p — продуцент целлюлаз при росте на твердом нерастворимом субстрате (соломе)—секретирует вещество полисахаридной природы, образующее на поверхности густую фибриллярную сеть. Методом электронномикроскопической цитохимии выявлена связь целлюлаз с внеклеточными полисахаридами (Агабекян и др., 1982).
Отмечается, что секреция эндоглюканазы у гриба Aspergillus terreus происходит вследствие ее активного транспорта в культуральную жидкость и она является истинным экзоферментом. Морфофизиологические особенности продуцента зависят от природы целлюлозного субстрата (Иванова, 1984).
Результаты, полученные Kubicek и Pitt (1982), показывают, что значительное усиление секреции |3-глюканазы у Trichoderma aureoviride обусловлено выраженными изменениями метаболизма клеточной стенки гриба. В зависимости от скорости разбавления изменяется состав клеточной стенки. Предполагается, что повышение секреции (З-глюкозидазы вызвано увеличением активности литических ферментов, связанных с клеточной стенкой. Клеточные стенки гиф, полученных при низких скоростях разбавления, имеют более высокую литическую активность.
Грибные глюканазы разнообразны не только по свойствам и механизму действия, но и различны по регуляции. Так, образование [3-1,3-глюканазы не репрессируется глюкозой. Такой тип регуляции, возможно, является отражением функции глюканаз в процессе морфогенеза, выражающейся в ограничении гидролиза компонентов клеточной стенки (Delrey et al., 1979). Сравнение секреции (З-глюкозидазы и р-1,3-глюканазной активности трех различных штаммов Trichoderma подтверждает гипотезу о том, что появление (З-глюкозидазы в культуральной жидкости вызвано увеличением активности |3-1,3-глюканазы, связанной с клеточной стенкой (Kubicek, 1983).
На среде с целлюлозой (но не глюкозой), глицерином или лактозой в культуральную жидкость Penicillium funiculosutn выделяется фактор, стимулирующий секрецию целлюлолитических ферментов у Penicillium janthinellum, выращенного также в присутствии целлюлозы. По-видимому, этот фактор (Rao et al.,
1986) является специфической протеазой. Отмечено значительное
64
увеличение синтеза внеклеточных целлюлаз и гемицеллюлаз в смешанной культуре- Trichoderma reesei D 1-6 и Aspergillus wentii PI 2804. Маннаназа Aspergillus wentii влияет на продукцию целлюлозы Trichoderma reesei в смешанной культуре. С одной стороны, маннаназа необходима для высвобождения целлюлазы из мицелия, с другой — она оказывает ингибирующее действие на целлюлазу, но не на ксиланазу и (З-глюкозидазу. Скорее всего, маннаназа инактивирует целлюлазу, действуя на маннаны полисахаридного остатка и изменяя таким образом специфическую конформацию, необходимую для проявления активности (Ghose et al., 1985).
Многие грибы, особенно рода Trichoderma, выделяют внеклеточные целлюлазы в значительных количествах. Вероятно, специфические протеазы влияют на выделение и активность целлюлазы. Eriksson и Petterson (1982) отмечают значительное увеличение целлюлазной активности Sporotrichum pulverulentum при инкубации с иротеазами и предполагают существование этого фермента в зимогенной форме. Альтернативным объяснением является посттрансляционная модификация целлюлаз. Deshpande et al. (1984) установили, что эндо-р-1,4-глюканазная активность в фильтратах двухдневной культуры Penicillium janthinellum увеличивается в 4 раза после инкубации с фильтратом 10-дневной культуры этого гриба на той же среде. Неактивный белок, выделенный из двухдневной культуры Penicillium janthinellum, после инкубации с фильтратом старой культуры гриба проявляет значительную целлюлазную активность. Он был назван процеллю-лазон.
Предыдущая << 1 .. 25 26 27 28 29 30 < 31 > 32 33 34 35 36 37 .. 131 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed