Иммунологические методы исследований - Лефковитса И.
ISBN 5-03-0011-70-6
Скачать (прямая ссылка):
Г. Раствор полнэтиленглнколя (ПЭГ)...........................282
Д. Нормальная среда для культивирования......................282
Е. Среда, содержащая фактор роста Т-клеток (ФРТК) . . 283
Ж. Селективная среда.........................................283
III. Методы......................................................284
A. Иммунизация in vivo.......................................284
Б. Получение цитотокснческнх Т-лимфоцитов (ЦТЛ) в массовых культурах..........................................284
B. Выделение клонов ЦТЛ......................................285
Г. Отделение прикрепившихся клеток от подложки . . . 286
Д. Получение цитолитическнх Т-клеточных гибридом . . . 286
Е. Функциональные тесты...................................... 290
Ж. Выявление заражения микоплазмой и ее ликвидация . . 291
3. Замораживание клонов ЦТЛ..................................292
Оглавление
525
IV. Применение......................................................293
A. Отбор антиген-специфических цитолитических Т-клеток
in vitro.........................................................293
Б. Клоны ЦТЛ.....................................................294
B. Цитолитические Т-клеточные гибридомы.........................296
Литература.......................................................299
Глава 18. УСЛОВИЯ ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ in vitre МЫШИНЫХ ЛИНИЙ ПРЕДШЕСТВЕННИКОВ В-КЛЕТОК. ЗАВИСИМЫХ ОТ ИНТЕР-ЛЕИКИНА-3 (Р. Паласиоз) ........................................301
I. Введение...................................................301
II. Материалы..................................................302
III. Надосадочная жидкость из культур клеток WEHI-3 . . 304
IV. Определение активности ИЛ-3................................304
V. Приготовление клеток.......................................306
А. Клетки костного мозга....................................306
Б. Клетки селезенки.............................. 306
VI. Получение ИЛ-З-зависимых линий предшественников В-клеток 307
A. Удаление прикрепляющихся клеток..........................307
Б. Размножение клеток.......................................310
B. Подавление миелоидного н эритрондного ростков . . . 310
Г. Замораживание клеточных линий............................311
VII. Клонирование ИЛ-З-завнснмых предшественников В-клеток 311
VIII. Характеристика клеточных линий...........................312
IX. Заключительные замечания...................................313
Литература..................................................314
Глава 19. МЕТОДЫ ОПРЕДЕЛЕНИЯ КЛЕТОК, СИНТЕЗИРУЮЩИХ РЕВМАТОИДНЫЙ ФАКТОР (Дэвид А. Нимэйзи)..................................315
I. Введение....................................................315
II. Метод определения зон гемолиза..............................315
A. Антнтела-мншенн .........................................316
Б. Восстановление и алкилнрование антител-мишеней . . . 316
B. Выбор гаптенной системы..................................316
Г. Конъюгирование арсоната с эритроцитами...................317
Д. Приготовление комплемента................................317
Е. Гемолитический тест для скрининга гибридом . . . . 317
Ж. Количественный гемолитический тест........................318
III. Метод определения зон гемолиза..............................319
А. Метод Ерне...............................................320
Б. Метод Каннингема.........................................320
IV. Радионммунологическнй анализ................................321
A. Очистка мышиного IgM из асцитной жидкости .... 322
Б. Приготовление антител к ц-цепям..........................322
B. Иодирование антител к ц-цепям с помощью хлорамннового
метода............................................ 323
Г. Очистка мышиного IgG на ДЭАЭ-целлюлозе .... 323
Д. Адсорбция на пластике....................................324
Е. Инкубация проб...........................................324
Ж. Инкубация с мечеными антителами к ц-цепям .... 324-
Литература................................................ 325-
S26 Оглавление
Глава 20. МЕТОДЫ ПРОТОЧНОЙ ЦИТОФЛУОРИМЕТРИИ И СОРТИРОВКИ КЛЕТОК в ИММУНОЛОГИИ (Уильям Лейзерсон) . . 326
I. Введение...................................................326
II. Описание клеточного сортера................................327
A. Оптическая скамья........................................327
Б. Обработка сигналов.......................................329
