Иммунологические методы исследований - Лефковитса И.
ISBN 5-03-0011-70-6
Скачать (прямая ссылка):
Открытие в последние 10 лет новых видов и экспериментальное создание генетически охарактеризованных линий и клонов Xenopus способствовали более широкому использованию этих амфибий в модельных иммунологических исследованиях. Ниже приводится список видов животных и некоторые их характеристики, существенные для иммунологических экспериментов.
474 Глава 25
Таблица 25-1. Связывание моноклональных антител против иммуноглобулинов Xenopus с сыворотками крови различных видов Xenopus, а также Ratia и Вк/о'>
Вид Число 6V0I < С 1ID5 со I0C10 14DS Г-: 6FI0 14F11
хромо СО CQ
сом со
X. laevis laevis 36 + + + + + + + + + +
X. laevis sudanen- 36 + + --- --- + + + + + +
sis
X. laevis victorianus 36 + + --- --- + + + + + +
X. borealis 36 --- --- --- + + + + + + +
X. mUll'erl 36 --- --- --- + + + + . + + +
X. gilli 36 + + --- + + + НИ > ни ни ни
X. fraseri 36 + + --- + + + + + + +
X. clivii 36 --- --- --- --- + + + + + +
X. amieti 72 НИ + --- + + + + 4* +
X. wittei 72 + + --- + + + + ни ни ни
X. vestitus 72 + + --- + + + ни ни ни ни
X. ruwenzoriensis 108 + + --- + + ни ни ни
X. tropicalis 20 НИ ?»> ? + + --- ни ни
R. catesbeiana НИ --- --- --- + --- + --- + ---
R. pipiens НИ --- --- --- --- --- --- + --- + ---
B. marinus НИ --- --- --- --- --- --- + --- + ---
^ Все моноклональные антитела не связываются с сыворотками кровв каймана, аксолотля, черепахи и форели.
НИ — не исследовано.
Знак вопроса (?) — не установлено. Белок неиммуноглобулиновой природы связывается с сефарозой н мигрирует в ту же зону, что н Н-цепи ннзкомолекулярных иммуноглобулинов.
В табл. 25-1 представлен перечень моноклональных антител, взаимодействующих с иммунологлобулинами этих видов.
Xenopus tropicalis: 20 хромосом, масса 5—15 г, животные, как правило, слабые и их трудно сохранять после метаморфоза. Имеются в продаже (Xenopus I, Англия). Характеризуется чрезвычайно низкой гетерогенностью антител [6 полос при изоэлектрофокусировании (ИЭФ) антител против динитрофенола (ДНФ) у одного животного].
Xenopus laevis laevis: 36 хромосом. Наиболее часто используемый вид Xenopus. Животные крупные (массой до 300 г >и более). Исследования МНС и иммуноглобулинов проводились в основном на этом виде. Имеются реагенты для соответствующих иммунологических исследований, такие как алло- и ксено-антисыворотки, а также моноклональные антитела к антигенам МНС, поверхностным лимфоцитарным антигенам, иммуноглобулинам. Антитела более гетерогенны, чем у X. tropicalis (12 полос при ИЭФ антител против ДНФ). Имеются в продаже (Snake Farm, Fishhoek, Кейптаун, ЮАР).
Xenopus gilli: 36 хромосом, масса животного 25—30 г, вид под угрозой исчезновения, отсутствует в продаже. Животных
Изучение иммунной системы Xenopus
475
гибридизуют с X. lacvis для получения клонов LG (X. laevis — X. gilli) (см. далее). У гибридов экпресснруются антигены МНС и иммуноглобулинов X. gilli, и к ним получены соответствующие антитела.
Xenopus miilleri, Xenopus borealis: 36 хромосом, масса животного 30—40 г. Оба вида скрещиваются с X. laevis. Легко получить и клонировать гибриды LM (X. laevis — X. miilleri). Соответствующих типирующих антител нет, хотя некоторые моноклональные антитела перекрестно реагируют с иммуноглобулинами этих лягушек.
Xenopus fraseri: 36 хромосом, масса животного 10 г. В продаже нет.
Xenopus vestitus, Xenopus wittei, Xenopus amieti: 72 хромосомы, масса животного 15—25 г. В продаже нет. Эти три «тет-раплоидных» вида имеют более высокую гетерогенность антител, чем X. tropicalis. На гаплоидный геном экспрессируется один МНС.
Xenopus ruwenzoriensis: 108 хромосом; масса животного 10 г. Вид с самой высокой полиплоидией. На гаплоидный геном экспрессируется более чем один локус, ответственный за реакцию в смешанной культуре лимфоцитов. Антитела более гетерогенны, чем у какого-либо другого вида (до 40 полос при ИЭФ у одной особи). В продаже нет.
Линии животных. В настоящее время имеются четыре частично инбредные линии X. laevis. Некоторых из них доводили до гомозиготности по аллелям fug МНС. Линии происходят от семьи лягушек (лаборатория в Базеле), работа с которыми была начата в 1973 г. За счет многократного скрещивания и гиногенеза несколько семей гомозиготных лягушек были получены инбредными до четвертого поколения.
