Иммунологические методы исследований - Лефковитса И.
ISBN 5-03-0011-70-6
Скачать (прямая ссылка):
30*
468 Глава 25
(ФГА, Кон-А), активны в реакции в смешанной культуре лимфоцитов (СКЛ) и могут дифференцироваться в эффекторные цитотоксические клетки.
2. Спектр антиген-узнающих структур лимфоцитов
Детальные исследования спектра антиген-узнающих структур Т-клеток Xenopus пока не проводились, тогда как о разнообразии этих структур у В-клеток (отражением чего является гетерогенность молекул антител) имеется достаточно обширная информация. Данные изоэлектрического фокусирования, изучение идиотипов и результаты секвенирования, полученные при исследованиях изогенных животных, свидетельствуют о том, что В-клетки Xenopus характеризуются более ограниченным спектром антиген-узнающих структур, чем В-клетки млекопитающих, и что они являются в основном продуктами экспрессии генов зародышевой линии (Du Pasquier, WabI, 1978).
3. Лимфоидные органы
(обзор и ссылки см. Manning, Horton, 1982)
а. Тимус. Этот орган развивается из дорсального энтодер-мального эпителия второго жаберного кармана и у Xenopus образуется первым из всех лимфоидных органов. Билатеральный тимус, заключенный в капсулу из соединительной ткани, четко дифференцирован на кору и мозговое вещество. У головастика он расположен между глазом и барабанной полостью и хорошо виден через прозрачную кожу. У взрослых животных его локализация несколько иная: он располагается прямо за барабанной полостью. Клеточное строение и функции тимуса у Xenopus те же, что и у млекопитающих. После инволюции при метаморфозе тимус проходит второй гистогенез и окончательно дегенерирует примерно через год после достижения половой зрелости (Du Pasquier, Weiss, 1973). Тимус является первичным лимфоидным органом, который продуцирует Т-клет-ки; от него они поступают на периферию. Его нельзя рассматривать как реальный источник Т-хелперов или эффекторных клеток для реакции «трансплантат против хозяина» (РТПХ). Немногочисленные тимусные В-клетки, по-видимому, обладают повышенной способностью дифференцироваться в IgY-проду-цирующие клетки при адекватном хелперном влиянии Т-клеток селезенки (Hsu et al., 1983).
б. Селезенка. Как и у высших позвоночных, у Xenopus селезенка состоит из белой и красной пульпы. Каждый участок
Изучение иммунной системы Xenopus
469
73 Ы
белой пульпы окружен пограничным слоем клеток, контактирующим с тимусзависимыми лимфоцитами, образующими перифолликулярную зону. Селезенка становится видимой на пятидесятой стадии развития.
У взрослых животных селезенка — хороший источник зрелых Т-хелперов, эффекторных клеток для РТПХ и реакции в СКЛ, а также В-клеток.
в. Почки. Интертубулярная ткань мезонефроса содержит очень много лимфоцитов.
г. Лимфоидная ткань, ассоциированная с кишечником.
В вентральной части глотки Xenopus на личиночных стадиях развития обнаруживаются так называемые тельца вентральной полости, классифицируемые как лимфоэпителиальные органы, однако их лимфопролиферативная активность невелика. В кишечнике Xenopus найдены скопления лимфоидных клеток, похожие на одиночные узелки пейеро-вых бляшек млекопитающих.
Встречается также локальная инфильтрация лимфоцитами кишечного эпителия и lamina propria.
д. Костный мозг. Костный мозг развивается после метаморфоза и является местом
выраженной пролиферации лимфоидных клеток. По тесту на пролиферативную активность (проба с мигогенами) зрелых Т-или В-клеток в костном мозге не обнаружено.
е. Печень. В отличие от других бесхвостых лягушек у Xenopus в печени после метаморфоза сохраняются «переживающие» субкапсулярные гематопоэтические очаги, которые содержат клетки, продуцирующие иммуноглобулины. В процессе онтогенеза Ig-синтезирующие лимфоциты впервые обнаруживаются в печени.
ж. Кровь. Как показано в многочисленных экспериментах in vitro (MLR, синтез антител in vitro, опыты по гемолизу на-
28,7
(L)
26,9
Рис. 25-1. Иммуноглобулины Xenopus. Молекулярные массы приведены в килодальтонах.
470 Глава 25
груженных белком А эритроцитов, образование цитотоксиче-ских лимфоцитов), среди лимфоцитов крови встречаются зрелые В- и Т-клетки.
Б. Иммуноглобулины (рис. 25-1)
До настоящего времени у Xenopus описаны два изотипа иммуноглобулинов (Ig): высокомолекулярный IgM и низкомолекулярный Ig, который иногда в литературе называют IgY. Свойства легких и тяжелых цепей этих иммуноглобулинов приводятся ниже (Hsu, Du Pasquier, 1984а):
Тяжелая цепь IgM (ц)
Тяжелая цепь IgY (v)
Легкие цепи
(не содержат аспарагинсвя-занных углеводов)
Мол. масса
Гликозилированная форма
Негликозилировакная форма Мол. масса
Гликозилированная форма
Негликозилированная форма Мол. масса а:
73000 60 000; 62000
69000
66 400
28700
26900
Легкая цепь, обладающая большей молекулярной массой, чаще ассоциируется с IgY.
В процессе онтогенеза IgM впервые выявляются в печени личинок на стадии 46, а в сыворотке крови примерно на стадии 49. IgY обнаруживаются позднее—между стадиями 50 и 53 (Hadji-Azimi et al., 1984b; Hsu, Du Pasguier, неопубликованные данные).
