Иммунологические методы исследований - Лефковитса И.
ISBN 5-03-0011-70-6
Скачать (прямая ссылка):
OS-B3 IT. IN H 15
UR PK 1, c 15 с а
G-B3 AT H 15
H.BI5. V BA, ТГ 11, R 15
ixu поз DA I 17
ген да: DA I IS
О'пк-Н Р EL H 19
Н.В1Ч ED, BA H, R 19
С ч:]и!1 N EL H 21
H.B2I ED, B-\ H, B, R 21
^ АТ — Department of Avian Medicine, College of Veterinary Medicine, University of Georgia, Athens (L. W. Schierman); BA — Basel Institute for Immunology, Basel (E. Ackerley); CO — Institute for Experimental Immunology, University of Copenhagen (M. Simonsen); DA — Department of Avian Science, University of California at Davis (H. Abplanalp); ED — Department of Immunology, University of Alberta, Edmontjon (В. M. Longenecker); EL—Regional Poultry Research Station, East Lansing, Michigan (L. D. Bacon); HO — Houghton Poultry Research Station, Huntingdon (N. Bumstead); IN — Institute for General and Experimental Pathology, University of Innsbruck (K- H51a); IT — Department of Poultry and Avian Science, Cornell University, Ithaca (R. Dietert); PA — Department of Experimental Medicine, College de France, Paris (D. Gllmour); PR — Institute of Molecular Genetics, CSAV, Prague (J. Plachy); TU — Department of Medical Microbiology, University of Turku (P. Toivanen).
2 }
' 1 — инбредная сингенная; H — гомозиготная по В-генам; С — существуют варианты, конгенные по МНС (Briles et al., 1982); R—существуют варианты, рекомбинантные по МНС (Briles et al., 1982); А — существуют варианты линии Н.В14, имеющие различные аллотипы (Foppoli et al., 1979); В — существуют варианты лннни H.B2I, несущие различные аллоантигены иа В-клетках (Pink, Rijnbeek, 1983).
ных несушек можно получить из источников, перечисленных в табл. 23-1, а также от Hyline International Farms (Dallas Center, IA)—фирмы, которая поставляет Fi-гибридные яйца, полученные при скрещивании инбредных линий (например,
424 Глава 23
s fi.Bi5XH.B2!).' Дивотные, к оторых .разводят р большинстве хозяйств, включая и те, которые перечислены 3 23-1, яв-
ляются носителями вируса лейкоза птиц. Яйца, не содержащие chf-антигена вируса лейкоза птиц, можно заказать у В. Loh-mann (Cuxhaven, ФРГ) и Spafas Farms (Norwich, США). Для дополнительной информации о генетически охарактеризованных популяциях цыплят рекомендуется обращаться к соответствующим руководствам (см. Festing, 1979; Altman, Katz, 1979).
Б. Генетические маркеры и моноклональные антитела
Помимо антигенов групп крови и аллоантигенов лейкоцитов цыплят (перечень см. Altman, Katz, 1979) наибольший интерес для иммунологов представляют продукты МНС (Briles et al.,
1982) и аллотипы иммуноглобулинов (Foppoli et al., 1979) (табл. 23-1). Другие потенциально полезные генетические маркеры— это антигены групп крови А и С, которые также присутствуют на лимфоцитах (Gilmour, 1984), и локусы, кодирующие Т- и В-клеточные аллоантигены (см. Altman, Katz, 1979). Частичный список моноклональных антител к антигенам клеточной поверхности гемопоэтических клеток кур представлен в табл. 23-2.
III. МЕТОДЫ
А. Получение, инкубация и просвечивание яиц
Куры линий, которые перечислены в табл. 23-1, несут приблизительно по 50—150 яиц в год с вылупляемостью около 60—85%. Частично инбредные популяции более продуктивны, чем высокоинбредные линии. Для поддержания разводимой популяции удобно, как правило, получать одно новое поколение птиц в год в тот момент, когда петухи и курицы достигают зрелости (в возрасте около 7—9 мес). Большинство линий можно поддерживать на основе ядра популяции, составляющего примерно 20 куриц и 10 петухов; для гарантированного сохранения линии требуется около 100 яиц в год, а остальные могут быть использованы в экспериментах. Подробную информацию о ведении птицеводческого хозяйства можно найти у Харри и Купера (Harry, Cooper, 1972).
Оплодотворенные яйца хранят до двух недель при 10— 15°С и относительной влажности 75—85%. После приблизительно 10 дней хранения вылупляемость яиц начинает умень-шаться (Payne, 1972). Инкубировать яйца следует при 38,5 °С и относительной влажности по крайней мере 80% в вентилируемом инкубаторе в соответствии с инструкцией его изготовителя. Многие фирмы выпускают инкубаторы, вместимость
Зародыши птиц в иммунологии
425
Таблица 23-2. Специфичность некоторых моноклональных антител к гемопоэтическим клеткам птиц
Специфичность Источник данных
Антигены МНС эритроцитов (В---G) Longenecker et al., 1979
Антигены МНС эритроцитов (В---G) Miller et al., 1982
Антигеи эритроцитов зародышей
