Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Лефковитса И. -> "Иммунологические методы исследований" -> 133

Иммунологические методы исследований - Лефковитса И.

Лефковитса И., Перниса Б. Иммунологические методы исследований — М.: Мир, 1988. — 530 c.
ISBN 5-03-0011-70-6
Скачать (прямая ссылка): immunologicheskiemetodi1988.djvu
Предыдущая << 1 .. 127 128 129 130 131 132 < 133 > 134 135 136 137 138 139 .. 239 >> Следующая

Б. Усиление сигнала и его перевод в цифровую форму
На рис. 20-3 показана упрощенная схема процесса получения и накопления данных. Свет попадает в фотодетектор и генерирует соответствующий электрический импульс. Этот импульс усиливается на усилителе и попадает в блок перевода
Импульс Усиленный Номер
импульс канала
Детектор Усипитель БПЦЗ Блок накопления и
обработки данных
Рис. 20-3. Схема последовательности этапов процесса накопления данных. Для простоты в схеме опущен процесс дискриминации сигналов между усилителем и блоком перевода в цифровое значение (БПЦЗ).
в цифровое значение (БПЦЗ), который выдает число (на нашем приборе от 1 до 1024), соответствующее амплитуде импульса света, попавшего на детектор. Цель усиления сигнала состоит в том, чтобы привести амплитуду импульсов в подходящий для работы БПЦЗ диапазон. Если импульсы будут слишком слабые, то числа, выдаваемые БПЦЗ, будут также небольшими и значительная часть рабочего диапазона этого блока не будет использоваться. Эту ситуацию иллюстрирует график, приведенный на рис. 20-4, А, где большая часть импульсов располагается в левой части шкалы (описание графика см. в разд. VIII). В результате существенные различия в величинах ответа детектора будут приводить к небольшим различиям в числовом значении каналов. Вместе с тем, если усиление будет слишком большим, многие импульсы будут выходить за пределы рабочего диапазона. На приборе FACS есть устройство, которое дает команду БПЦЗ присваивать номер канала 1000 всем импульсам, обладающим слишком большой амплитудой для измерений в рабочем диапазоне. Эти «подрезанные» импульсы видны на рис. 20-4, Б в виде пика, соответствующего каналу с номером 1000. На рис. 20-4, В показаны результаты, получаемые при линейном (правильно подобранном) режиме усиления.
Методы сортировки клеток в иммунологии
343
0>01-
Слишком низкий
коэффициент
усиления
i 0.01-
Слишком высокий
коэффициент
усиления
ё
I 0,01
Многие проточные цитометры оборудованы усилителями двух типов — линейными и логарифмическими. Режимы работы этих усилителей описаны ниже.
1. Линейное усиление
При линейном усилении сигналы, попадающие на усилитель от фотодетектора, увеличиваются в постоянное число раз, т. е. исходное значение сигнала умножается на постоянное число, которое называется коэффициентом усиления (к у.). Значение коэффициента усиления выбирает экспериментатор. При линейном усилении интенсивность сигнала, который будет отнесен к каналу 50, например, составляет 1/10 интенсивности сигнала канала 500.
На рис. 20-5, Б—Г представлены данные, полученные для одного и того же образца при разных коэффициентах
усиления, значения которых приведены на каждом рисунке. Соотношения между установленными коэффициентами усиления можно определить делением. Например, это соотношение для данных на рис. 20-5, Г (к. у. 32) и рис. 20-5, Б (к. у. 8) составляет 32/8=4. Другими словами, усиление на рис. 20-5, Г в четыре раза выше, чем на рис. 20-5, Б.
В
Коэффициент усилении подобран правильно
500 Номер канала
1000
Рис. 20-4. Пример установки усиления таким образом, чтобы большинство сигналов попадало в диапазон шкалы БПЦЗ.
2. Логарифмическое усиление
При использовании логарифмического усилителя величина сигнала на выходе логарифмически зависит от величины вводимого сигнала. В результате к БПЦЗ приходит логарифм каждого значения.
Чтобы понять, что означают данные, получаемые при логарифмическом усилении, необходимо иметь четкое представление о том, к чему приводит замена регистрации переменной на регистрацию ее логарифма. На обычной (линейной) шкале рас-
344 Глава 20
0,005- А - Б
Логарифм ическое Линейное усиление.
усиление коэффициент 8
X
1---
о
о
си --;л -
X Г
о.
i---
о
ffi
го “ 1 I" 1 " 1 I I - 7 “ -Г
о
| 0,005- в - - Г
сс Линейное усиление. Линейное усиление,
X коэффициент 16 коэффициент 32
J3
с;
1-
о ‘ -
Предыдущая << 1 .. 127 128 129 130 131 132 < 133 > 134 135 136 137 138 139 .. 239 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed