Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Лебедева К.В. -> "Феромоны насекомых" -> 20

Феромоны насекомых - Лебедева К.В.

Лебедева К.В., Миняйло В.А., Пятнова Ю.Б. Феромоны насекомых — М.: Наука, 1984. — 269 c.
Скачать (прямая ссылка): feromoninasekomih1984.djv
Предыдущая << 1 .. 14 15 16 17 18 19 < 20 > 21 22 23 24 25 26 .. 150 >> Следующая

К 5 г сконцентрированного сырого экстракта феромона совки Н. vires-cens добавляют 10 мл пиридина, 10 мл уксусного ангидрида, и раствор оставляют на ночь при комнатной температуре. После ГЖХ анализа продукт омыляют 30%-ным NaOH в метаноле и восстанавливают активность [172].
Активную фракцию после ГЖХ-препаративного разделения экстракта Anarsia lineatella, дающую сигнал ЭАГ в 1,6 мВ, ацилируют ацетилхлори-дом и получают фракцию, дающую ответ ЭАГ в 6 мВ и выходящую с колонки с XF-1150 одновременно с E5DA. Понятно, что фракция ГЖХ содержит E5DOL [105].
Для того чтобы определить одновременное присутствие спирта и ацетата в феромоне, биотестирование проводят и после омыления и после ацилирования. Для этого готовят два раствора по две самки-эквивалента в эфире. Оба раствора упаривают. К одному добавляют 2 мл 0,5н КОН в 95%-ном этаноле, а к другому —только95%-ный этанол (2 мл), выдерживают 10 мин при 85° и охлаждают. Проверяют активность. Если омыленный раствор неактивен, его высаливают несколько раз NaC) в эфире, сушат MgS04 и к упаренному раствору добавляют 1 мл ацетилхлорида. После стояния в течение 1 ч добавляют 10 мл воды и экстрагируют эфи-
33
ром. Эфирный раствор промывают 5%-ным раствором NaHC03, 10 мл воды, концентрируют до 1 мл и биотестируют [108].
Оригинальный метод анализа функциональных групп у феромонов, содержащих спирты и ацетаты, предложили Кувахара и Кэсида для четырех видов огневок. По этому методу спиртовую фракцию экстракта или ацетатную фракцию, омыленную до спиртовой, трихлорацилируют и анализируют ГЖХ с детектором по захвату электронов. Для этого к экстракту от 10 самок, освобожденному от растворителя, добавляют 1 мл пиридинового раствора трихлорацетилхлорида и оставляют стоять при 25° С на 18 ч. Затем добавляют 1 мл гексана, промывают водой, сильно перемешивая 30 сек. По удалении водного слоя гексановый экстракт промывают 1 мл воды, насыщенной NaHC03, затем просто водой и cytiiaT Na2S04. Такая же процедура используется для трихлорацилирования продукта гидролиза ацетатных компонентов метанольным раствором NaOH (0,2 мл) при 25° С в течение 18 ч. Этим методом были найдены и спирт и ацетат в экстрактах ограниченного количества особей четырех видов огневок в виде трихлорацетата с колонки (1,5 м X 0,3 см) с 5% OV-17 на Хромо-сорбе W (60/80 меш) при 190° (инжектор 250°, детектор 250°) с 16 мин [149].
Обнаружение ненасыщенности в феромоне
Наличие в молекуле компонента феромона двойной связи можно установить несколькими способами: гидрированием над катализаторами [6, 55, 105], бромированием и регенерацией двойной связи [8, 10, 42, 100, 104], озонолизом [6, 8, 10, 20, 46, 74, 85, 111, 116, 137, 146, 212, 222, 229], эпоксидированием [43, 58, 74, 125, 144, 230, 231]. Два последних метода применяются также для определения положения двойной связи в молекуле компонента феромона, выделенного в чистом виде.
Гидрирование проводится над катализатором при атмосферном давлении в растворе метанола или гексана, например с 5% Pd на СаС03 или с PdO [105]. Палладиевый катализатор используют при гидрировании таких компонентов феромона, как Z9TDAL, Z11TDAL [154], Z11Z13HDDAL [130]. Платиновый катализатор в виде Pt02 применяли при гидрировании E11TDALB растворе этанола при 20° С [55], минорного компонента феромона С. cautella до TDA [216], а в виде Pt — при гидрировании до TDA феромона S. frugiperda [5].
Для идентификации двойных связей в молекулах феромонов применяется восстановление двойной связи гидразин гидратом. Для этого 1 мкг активного масла после упаривания растворителя обрабатывают 10 мкл раствора NH2NH2 • Н20 (5 мкл) и воды (5 мкл) в 200 мкл этанола (небольшой кристаллик сульфата меди добавляют в качестве катализатора) [111].
Присутствие двойной связи можно установить также бромированием экстракта с последующей регенерацией двойной связи цинком. Для этого 5% брома в CCL4 в "микротестпробирке” (5 мм X 5 см) из пирекса добавляют к раствору феромона и оставляют стоять 5 мин в темноте. Избыток брома упаривают азотом, и остаток для анализа растворяют в 5— 10 мл сероуглерода [63]; 5%-ный раствор брома в CCL4 за 10 мин делает неактивными компоненты феромона, содержащие двойные связи [6, 10, 55, 108].
Присутствие двойной связи можно установить озонолизом сырого экстракта [6]. Процесс проводят в сероуглероде при —70°С [55] или при —80° С [219], или при —70° С в хлористом метилене [58].
34
Обнаружение эпоксидной, карбонильной, альдегидной и кетонной групп
Обнаружение эпоксидной группы компонента феромона проводят действием бромистого водорода в растворе уксусной [58] или фосфорной кислоты [199] с одновременной проверкой исчезновения активности биотестированием.
Обнаружение карбонильной группы проводят восстановлением любых карбонильных групп алюмогидридом лития до спирта (до спирта восстанавливается при этом и эпоксидная группа). Восстановление проводят в среде безводного эфира при комнатной температуре [55].
Обработка алюмогидридом лития сырого экстракта кончиков брюшка Orgyia pseudotsugata приводила к потере активности и тем самым указывала на присутствие альдегида, кетона или эпоксида [125].
Предыдущая << 1 .. 14 15 16 17 18 19 < 20 > 21 22 23 24 25 26 .. 150 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed