Феромоны насекомых - Лебедева К.В.
Скачать (прямая ссылка):
В определенной степени преодолеть влияние одного и другого неблагоприятных факторов помогает правильное построение эксперимента. Используются в зависимости от конкретных условий и возможностей экспериментаторов различные схемы экспериментов: полная рендомизация, рендоми-зированные блоки, парные сравнения, латинский квадрат и т.п. [398, 402, 403]. При полной рендомизации для получения удовлетворительных результатов необходимо большое число повторностей [398]. Парные тесты также требуют большого числа ловушек, хотя и дают хорошие результаты (402]. Наиболее распространено построение с использованием рендомизированных блоков, в этом случае проще выбрать более или менее выравненные условия для размещения сравнительно небольшого числа ловушек одного блока. Как можно более частая повторная рендомизация (например, ежедневная) способствует преодолению неоднородности условий внутри блока, а также взаимодействия вариантов [398]. В некоторых
254
опытах, например со стеклянницами, при использовании неингибирующих друг друга соединений подобное построение давало хорошие результаты даже при размещении блока из четырех ловушек на одном дереве [402]. Коэффициент вариации между повторностями (27%) оказался равным таковому при построении олыта по схеме латинского квадрата. Однако иногда использование рендомиЗированных блоков неэффективно из-за сильного взаимодействия испытываемых веществ [403].
Организация эксперимента в форме обычного латинского квадрата более сложна и трудоемка (необходима большая однородная территория и много времени для обслуживания ловушек). Поэтому латинский квадрат в опытах с ловушками применяется редко. Недавно предложена до сих пор не применявшаяся в работе с ловушками схема использования латинского квадрата, которая оказалась пригодной для разных экспериментов [403]. Суть ее в том, что выбирают необходимое для испытаний вариантов число мест (например, для пяти приманок пять мест), выставляют там по ловушке с приманкой и меняют в них приманки через определенное время (например, через сутки) также пять раз (случаи). Столбцами латинского квадрата являются места, а строками — случаи. Это позволяет исключить оба основных источника варьирования — влияние местоположения ловушки и влияние особенностей случая (например, погоды). Это построение опыта позволяет решить проблемы, связанные с неравномерностью распространения насекомых и взаимным влиянием ловушек.
Во многих ловушках в опыте может не быть улова, в то время как в других он может быть значительным. Уловы менее десяти или нулевые указывают на желательность преобразования полученных данных перёд вариационным анализом, например по фopмyлeV(x + 0,5), для устранения зависимости дисперсии от средней [398].
Обзор применения поведенческих биотестов
Поведенческие тесты в лаборатории или чаще в природе позволяют обнаружить у насекомых феромоны. Они используются также при изучении феромонов как средства коммуникации.
В принципе одними поведенческими тестами можно обойтись при выделении и идентификации феромонов. Однако целесообразнее использовать их в комбинации с ЭАГ-методом. ЭАГ-методом выявляют все компоненты, доступные для этого метода. После идентификации их синтезируют и проверяют на эффективность в поведенческих тестах в лаборатории и в поле в сравнении с живым источником феромона. При недостаточной аттрактивности синтетической приманки очевидна необходимость поиска дополнительных компонентов, не выявленных методом ЭАГ. Поведенческие методы тестирования наряду с тестированием на уровне отдельных рецепторов являются ключом к таким веществам, которые либо содержатся в феромоне в очень малом количестве и поэтому не могут вызвать ЭАГ, либо действуют на ЭАГ-неактивные рецепторы и также не дают ЭАГ. При выделении и идентификации феромонов чаще всего используют тесты в ольфактометрах, в которых можно обойтись небольшими количествами веществ.
Подходы при использовании ЭАГ- и поведенческих тестов для выделения и идентификации феромонов весьма различны. Причины различия подходов в том, что отдельные компоненты феромонов могут быть поведенчески неактивными, и для вызова реакции часто необходим весь "букет”, выделяемый феромонной железой. Из-за этого приходится тестировать не только, как при ЭАГ-методе, каждую фракцию, но и комбинации фракций,
255
причем ни одну фракцию нельзя отбросить без тестирования в комбинации с другими. На необходимость такого тестирования комбинаций фракций указывали на основе опыта идентификации тоехкомпонентного феромона короеда Ips confusus [404]. Поведенческие тесты позволяют найти все активные на внутривидовом уровне компоненты феромонов. Однако они трудоемки, более сложны и требуют значительного количества насекомых как для получения экстрактов, так и для самих тестов. Примером работы с использованием разных методов биотестирования, в том числе лабораторных поведенческих тестов, тестов в ловушках в полевых садках и ЭАГ-метода — является выделение и идентификация минорных компонентов четырехкомпонентного феромона листовертки Adoxophyes
