Биохимия мембран. Рецепторы клеточных мембран. Том 4 - Кульберг А.Я.
Скачать (прямая ссылка):
доменов полипептидных цепей иммуноглобулинов могут быть получены
антитела, так как эти участки формируют антигенные детерминанты. Эти
детерминанты получили наименование вариотипических (или framework), а
антитела к ним обозначают как антивариотипические (или anti-framework).
49
Установлено, что антивариотипические антитела реагируют с вариабельными
районами антител самой разнообразной специфичности одного и того же
видового происхождения. Кроме того, антитела против вариотипических
детерминант иммуноглобулинов одного биологического вида реагируют с
аналогичными детерминантами иммуноглобулинов другого биологического вида.
Эти результаты полностью согласуются с результатами анализа первичных
структур вариабельных районов, которые, как указывалось выше,
свидетельствуют о сходстве строения FR-участков вариабельных районов у
различных антител одного биологического вида и у аналогичных районов
иммуноглобулинов различного видового происхождения.
Структура вариабельных районов полипептидных цепей иммуноглобулинов
включает гипервариабельные участки. Именно эти участки определяют
специфичность связывания антителами лигандов и именно с ними связаны
находящиеся в активных центрах лиганды (гаптены, детерминантные группы
антигенов). Что касается консервативных участков, то они образуют как бы
"рамку" активного центра антитела, не участвуя в то же время в связывании
лиганда.
К гипервариабельным участкам также можно получить антитела. Совокупность
гипервариабельных участков, характерных для антитела определенной
специфичности, обозначают как идиотип, а направленные к ним антитела
называют антиидиоти-пическими. Существуют прямые экспериментальные
доказательства в пользу того, что антиидиотнпические антитела способны
распознавать гипервариабельные участки вариабельных районов
иммуноглобулинов (С. Kohler et al., 1985; А. Я. Кульберг, 1986).
Таким образом, два вида антител - антивариотипические и
антиидиотипическне - можно использовать для того, чтобы установить,
существуют ли в активных центрах клеточных рецепторов структуры, подобные
таковым в активных центрах антител. При этом антиидиотипическне антитела
служат для сравнения активных центров антител и рецепторов, распознающих
одни и те же лиганды. Антивариотипические антитела применяют для
обнаружения сходных с консервативными участками К-районов
иммуноглобулинов отрезков цепей во внеклеточных доменах любого по
специфичности рецептора.
Ряд выполненных к настоящему времени исследований свидетельствуют в
пользу того, что антиидиотнпические и антивариотипические антитела
реагируют со структурами в активных центрах рецепторов, не имеющих
иммуноглобулиновой природы. С использованием в качестве антигена антител
против инсулина были получены антиидиотнпические анти-антитела, способные
реагировать не только с активным центром антител против инсулина, но и
активным центром рецептора инсулина на клетках бурого жира (адипоциты).
Инкубация адипоцитов с указанными антиидиотипическими антителами
приводила к утрате клетками
50
способности связывать инсулин посредством рецепторов указанного гормона.
Блокирование активного центра рецептора в этих условиях может означать,
что в нем присутствуют структуры, подобные идиотипспецифическим
детерминантам антител против инсулина. А так как идиотип антитела
определяется прежде всего гиперва-риабельными участками F-районов его
полипептидных цепей, то, следовательно, иммунологическими методами можно
показать существование в активном центре клеточного рецептора и антитела
к одному и тому же лиганду сходных по строению участков, определяющих
специфичность сравниваемых белков (К. Sege, P. Peterson, 1981).
Эксперименты, аналогичные описанным выше, были выполнены с использованием
антител против аналогов (агонисты) p-адренергических лигандов, в
частности алпренолола. Антитела против алпренолола служили антигеном для
получения анти-идиотипических антител. Эти анти-антитела обладали
свойством связываться с Рг-адренергическими рецепторами клеток
(эритроциты индюка) и препятствовать взаимодействию с указанными
рецепторами алпренолола. Кроме того, анти-антитела указанной выше
специфичности имитировали действие алпренолола, усиливая активацию
аденилатциклдзы в клетках с помощью катехоламинов (A. Schreiber et al.,
1979; Ch. Homey et al., 1981).
Влияние антиидиотипических и антивариотипических антител на
лигандсвязывающие свойства рецепторов испытывали также на рецепторах
одного из компонентов системы комплемента - Clq. Рецепторы к этому белку
продуцируют в том числе перитонеальные макрофаги, способные по этой
причине связывать на холоду меченный радиоактивным иодом Clq Fab-
фрагменты анти-антител к Clq, предварительно добавленные к макрофагам, в
значительной степени подавляют связывание Clq этими клетками. Аналогичные
фрагменты антител против вариотипических детерминант P-района тяжелой
цепи полностью отменяли связывание указанными клетками Clq (А. Я.
