Исследование биологического материала на металлические яды добрым методом - Крылова А.Н.
Скачать (прямая ссылка):
После измерения светопоглощения раствора СНС13 экстракт снова помещают в делительную воронку и энергично встряхивают в течение 60 с с 0,5—2 мл 1 и. HNO3 (в зависимости от объема и интенсивности окраски экстракта): слой СНС13 должен восстановить зеленый цвет. Водный слой отделяют от СНС13. В зависимости от объема водного слоя производят микро- или макро-химические реакции.
Микрохимические реакции. Весь объем (или lU его в случае, если он равен 2 мл) исследуемого водного слоя распределяют на двух предметных стеклах, упаривают капли на небольшом пламени, и исследуют: а) растворяют осадок в 2—3 каплях 30% уксусной кислоты, с одной стороны капли вносят 2—3 кристаллика CsCl, а с противоположной — несколько кристаллов KI; тотчас или через некоторое время наблюдают образование CsPbI3 в виде желто-зеленых игольчатых кристаллов, собранных в сфероиды (рис. 1); б) на остаток наносят 1—2 капли 1% раствора ацетата меди и упаривают досуха, а затем растворяют его в 2—3 каплях 30% уксусной кислоты. С краю капли вносят несколько кристаллов KN02: тотчас или через некоторое время наблюдают образование черных или коричневых кристаллов КгСиРЬ(ЫОг)б в виде кубов (рис. 2).
Границей обнаружения свинца микрохимическими реакциями является содержание его в 100 г органа в количестве 0,02 мг.
29
Рнс. 1. Кристаллы CsPbb Рис. 2. Кристаллы КгСиРЬ(МО)
Макрохимические реакции (при объеме раствора ацетата аммония 2 мл). 3/4 объема оставшегося водного слоя нейтрализуют 10% раствором аммиака до pH 5,0 (по универсальной индикаторной бумаге, делят на 3 части и производят макрохимические реакции: а) к 7з раствора добавляют несколько капель 5% раствора KI. Появляется желтый осадок РЫг, растворимый при нагревании и снова выделяющийся при охлаждении в виде пластинок желтого цвета; б) к V» раствора добавляют по каплям свежей сероводородной воды — появляется муть или осадок черного цвета вследствие образования PbS; в) к Уз раствора по каплям добавляют 5% раствор К2СГ2О7 — выпадает оранжевый кристаллический осадок РЬСгС>4. Границей обнаружения. свинца макрохимическими реакциями является содержание его в 100 г органа в количестве 0,2 мг.
Исследование больших осадков (> 2 мг свинца, объем ацетата аммония 5 мл).
При значительных осадках и соответственно объемах раствора ацетата аммония (5*5 мл) измеряют объем раствора и Ч*—V10 его используют для качественного доказательства свинца по схеме, описанной выше для исследования небольших осадков.
Границей обнаружения свинца при этом является содержание его в 100 г органа в количестве 2 мг.
В оставшейся части раствора производят количественное определение свинца объемным методом.
30
Метод определения выбирают в зависимости от величины осадка сульфата.
Фотоэлектроколориметрическое определение. Измеряют объем раствора Pb(HDz)2 в CHCU, полученного экстракцией (см. Качественное обнаружение), а затем светопоглощение на фотоэлектроколориметре при 520 нм в кювете с толщиной поглощающего слоя 10 мм. Раствором сравнения служит СНС13.
Закон Бера соблюдается в пределах концентраций 1 -10-4 — 5 * 10—3 мг/мл свинца.
Построение калибровочного графика. Из стандартного раствора с содержанием свинца 1 мг/мл готовят растворы, содержащие ЫО-2 и Ы0_3 мг/мл свинца в воде.
Для экстракции готовят растворы с определенным содержанием свинца в 10 мл воды. Устанавливают в растворах pH 7,0—8,0 и экстрагируют Pb(HDz)2, как описано в разделе «Качественное определение». Полученные экстракты разбавляют с таким расчетом, чтобы в конечном объеме растворителя соблюдалась концентрация свинца в пределах подчинения закону Бера, измеряют светопоглощение экстрактов и строят график, исходя из среднего результата трех определений.
Формула расчета:
C.W100
А-- 1 “»
п
где х — количество свинца в пересчете на 100 г органа, мг;
с — концентрация свинца в экстракте, мг/мл;
Va — объем экстракта дитизоната свинца, мл; п — навеска органа, г.
Фотоэлектроколориметрическим методом по Pb(HDz)2 свинец определяют в пределах 0,02—2 мг и более в 100 г органа.
Объемное определение. При содержании больше
1—2 мг свинца в навеске (значительные осадок и объем раствора ацетата аммония) количественное определение производят объемным методом: комплексонометриче-ским или хроматойодометрическим. При условии выделения свинца в виде сульфата определение обоими методами специфично.
31
К о м п л с кс о и о м е т р а ч е с к и и метод. Раствор свинца в ацетате аммония в определенном объеме помещают в колбу, добавляют избыток 0,01 н. раствора комплексона III, 5 мл 3 н. NH4OH, воды до 100—150 мл, 10 мл аммиачно-хлоридиого буфера, 0,1—0,2 г эриохро-ма черного ЕТ-00,_ Избыток комплексона 111 j не вступившего В реакцию со свинцом, титруют 0,01 н. раствором ZnCl2 до перехода синей окраски индикатора в красно-фиолетовую.
1 мл 0,01 н. раствора комплексона III соответствует 1,036 мг свинца.
Формула расчета:
la,K< — a->Ki) -1,036-1400 j7_ , где x — количество свннца в пересчете на 100 г органа, мг;
