Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Крицман М.Г. -> "Индукция ферментов в норме и патологии" -> 9

Индукция ферментов в норме и патологии - Крицман М.Г.

Крицман М.Г., Коникова А.С. Индукция ферментов в норме и патологии — М.: Медицина, 1968. — 316 c.
Скачать (прямая ссылка): indukciyafermentovipatologii1968.djvu
Предыдущая << 1 .. 3 4 5 6 7 8 < 9 > 10 11 12 13 14 15 .. 121 >> Следующая

Авторы ^сторонники унитарной теории полагали, что все ферменты образуются
в результате индукции. Разница
23
лишь в том, что для "конститутивных" ферментов индуктором являются
метаболиты клеток, а в возникновении индуцированных ферментов принимают
участие различные экзогенные факторы. Позже авторы теории указывали, что
их концепция представляет собой лишь очень удобную рабочую гипотезу (Кон,
Моно, 1956).
Для изучения механизма индуцированного образования ферментов были
привлечены методы, получившие широкое распространение при исследовании
процесса биосинтеза белка: ингибирование ферментных реакций различными
веществами.
Так, имеются данные, что 2,4-динитрофенол в несколько меньшей
концентрации, чем при изучении механизма ферментативного действия,
оказывает тормозящее (Monod, 1944), так же как азид натрия (Spiegelman,
Reiner, Cohnberg, 1947; Fitzgerald, Bernheim, Fitzgerald, 1949), действие
на индуцированное образование ряда ферментов у микроорганизмов.
Аналогичное явление установлено и при использовании 8-оксихинолина,
монойодуксусной кислоты, ауроми-цина и метиленовой сини (Wainwright,
Pollock, 1949; Wagner, 1950; Stokes, 1952).
Принимая во внимание различную химическую природу ингибиторов, авторы
допускают, что упомянутые вещества действуют на различные процессы,
принимающие участие в осуществлении индуцированного образования
ферментов.
Обнаруженное ингибирующее действие таких ферментных ядов, как азид
натрия, 2,4-динитрофенол и других известных ингибиторов окислительного
фосфорилирования, привело к исследованиям, направленным на выяснение
источника энергии, обеспечивающего образование индуцированных ферментов;
в ряде работ подробно изучалось участие кислорода в этом процессе.
Stephenson, Yudkin (1936) наблюдали, что образование индуцированных
ферментов происходит со значительной интенсивностью как в аэробных, так и
в анаэробных условиях, т. е. этот процесс якобы не зависит от аэрации.
Однако Schultz, Atkin, Frey (1940) получили противоположные результаты.
Spiegelman (1946) по аналогии с другими синтетическими процессами считал
вероятным, что при индуцированном образовании ферментов используется
энергия макроэргн-ческих фосфатных связей. Для подтверждения этого пред-
24
положения им были проведены исследования при помощи радиоактивного
фосфора (Р32). Оказалось, что в условиях активного образования субстрата,
но при отсутствии образования фермента происходил обмен только
кислоторастворимого фосфора на фосфор среды; при этом практически без
изменения оставалась удельная активность фосфора нуклео-протеидной
фракции. При добавлении экзогенного источника азота, т. е. при условиях,
наиболее благоприятных для синтеза ранее упомянутых ферментов, имело
место резкое падение .удельной активности фосфора нуклеопротеид-иой
фракции. Было обнаружено также, что азид натрия и динитрофенол, которые
тормозят синтез белка и индуцированных ферментов, ингибировали обмен
фосфора нуклео-протеидной фракции. Автор полагал, что полученные данные
указывают на взаимосвязь между образованием индуцированных ферментов и
макроэргических фосфатных связей.
Таким образом, роль белкового предшественника в образовании
индуцированных ферментов обсуждалась в достаточном количестве работ и
были приведены некоторые доказательства в пользу именно такого механизма.
Наряду с этим ряд авторов подверг критике это представление (Monod,
Pappenheimer, Cohen-Bazire, 1952; Rotman, Spiegelman, 1954; Hogness,
1959; Hogness, Cohn, Monod, 1955). Хогнесс (1961), использовав в качестве
единственного источника серы радиоактивную серу S35, культивировал
микробные клетки без индуктора, затем клетки вторично инкубировал в
присутствии индуктора в среде, не содержавшей радиоактивного изотопа, до
прироста массы клеток на 15% . Было сделано допущение, что в условиях
этих экспериментов при наличии белка-предшественника индуцированного
фермента активный фермент будет содержать радиоактивную метку. Отсутствие
радиоактивности в изолированном ферменте является доказательством
образования индуцированного фермента путем его синтеза de novo из
свободных аминокислот.
В указанной работе из меченых клеток после повторной инкубации выделяли
р-галактозидазу посредством осаждения соответствующими антителами. В
полученном преципитате определяли радиоактивность. При этом оказалось,
что около 5°о серы предобразовапных белков находилось в исследуемом
ферменте. На основании этих результатов был сделан вывод, что
предобразованные белки клеток не
25
утилизируются или используются только в незначительном количестве для
построения индуцированного фермента.
Аналогичные по существу опыты были поставлены тем же автором при
выращивании клеток в присутствии индуктора в условиях лимитированного
содержания нерадиоактивной серы в среде. После удаления индуктора
микроорганизмы были вторично инкубированы в среде, содержавшей S35 до
увеличения массы клеток в 2 раза. Допускалось, что при этом не происходит
Предыдущая << 1 .. 3 4 5 6 7 8 < 9 > 10 11 12 13 14 15 .. 121 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed