Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Крицман М.Г. -> "Индукция ферментов в норме и патологии" -> 33

Индукция ферментов в норме и патологии - Крицман М.Г.

Крицман М.Г., Коникова А.С. Индукция ферментов в норме и патологии — М.: Медицина, 1968. — 316 c.
Скачать (прямая ссылка): indukciyafermentovipatologii1968.djvu
Предыдущая << 1 .. 27 28 29 30 31 32 < 33 > 34 35 36 37 38 39 .. 121 >> Следующая

Г идрокортизон ф-+триптофан:
через 4 часа 28,3 7690 1491
через 12 часов 72,0 7280 1018
86
Одновременное введение гидрокортизона и триптофана сопровождалось
активацией процесса включения С14, как и при введении одного
гидрокортизона.
Полученные данные, по мнению авторов, также свидетельствуют о том, что
введение гидрокортизона сопровождается повышением скорости синтеза
фермента, которое не имеет места при введении триптофана.
Мерой скорости процесса распада белков служило снижение радиоактивности в
предварительно меченных белках.
Авторы наблюдали, что через 1 час после введения С14-лейцина включение
его в белки достигало максимума; при одновременном введении
гидрокортизона и триптофана к этому времени практически в метаболическом
фонде не было свободной аминокислоты.
При изучении скорости процесса распада это время и было ими принято за
нулевое (рис. 20). Контрольным животным вводили хлористый натрий, а
опытным триптофан. Через каждые 3 часа группы опытных и контрольных крыс
забивали, из гомогенатов печени выделяли трипто-фанпирролазу, которую
преципитировали с соответствующей антисывороткой. В полученных препаратах
после соответствующей обработки подсчитывали радиоактивность.
Как выяснилось, у контрольной группы общий уровень ферментативной
активности оставался постоянным, падение общей радиоактивности наступало
быстро: к девятому часу исследования оставалось лишь 7% от исходной
величины радиоактивности. У группы опытных животных активность фермента
возрастала, а радиоактивность оставалась неизменной. Эти данные
показывают, что у контрольных животных обычно происходит постоянный
распад и восполнение фермента. Повышение же ферментативной активности у
индуцированных триптофаном животных обусловлено стабилизацией
триптофанпирролазы на фоне продолжающегося синтеза этого белка с той же
скоростью, что и у контрольных животных.
В продолжение работы по изучению механизма, лежащего в основе
индуцированного образования триптофанпирролазы, Schimke, Sweeney, Berlin
(1965а) провели серию сравнительных исследований in vivo и in vitro в
целях учета скорости кругооборота этого фермента. При этом были приняты
бо внимание данные предшествовавших
87
работ о стабилизирующем действии триптофана в целостном организме
(Schimke, Sweeney, Berlin, 1964, 1965; Dubnoff, Dimick, 1959; Civen,
Knox, 1960).
Исследователями был поставлен вопрос о природе фактора, обусловливающего
распад в организме триптофанпирро-
5-
е> в
160-
I
|
|
S'
Контроль
N. Я
\
\
\
ч
\
\
V
9
Время, vac.
• Ферментативная активность А Удельная радиоактивность белка (рермента в
Удельная радиоактивность тотальных белков
20. Стабилизирующее действие L-триптофана на активность
триптофанпирролазы (Schimke и др., 1965).
лазы, а также о возможности вызвать индуцированное образование указанного
фермента in vitro и о механизме, посредством которого триптофан
стабилизирует активность триптофанпирролазы.
Интересно отметить, что несмотря на быстрый кругооборот исследованного
фермента in vivo, триптофанпир-ролаза оказалась весьма стабильной in
vitro в гомогенатах печени крыс, получавших прижизненно гидрокортизон
83
или триптофан. Разрушение этого фермента наблюдалось в аэробных условиях
только после восьмичасовой инкубации при встряхивании. В анаэробных
условиях за это же время потеря активности триптофанпирролазы практически
не происходила независимо от того, каким способом ее активность была
индуцирована. Поскольку в предыдущих работах было показано соответствие
между ферментативной активностью и количеством иммунологически
реактивного белка, постольку для суждения о процессе распада белка этого
фермента авторы наряду с определением изменения уровня ферментативной
активности измеряли количество иммунологически реактивного белка.
При использовании переживающих срезов печени было обнаружено, что в
аэробных условиях опыта происходит выраженное снижение активности
триптофанпирролазы, индуцированной in vivo гидрокортизоном. В анаэробных
условиях активность этого фермента снижалась незначительно. Параллельно
со снижением активности фермента уменьшалось содержание иммунологически
реактивного белка.
Таким образом, в экспериментах с тканевыми срезами печени в отличие от
гомогенатов этой ткани происходит распад триптофанпирролазы подобно тому,
как это наблюдалось в целостном организме.
Для доказательства специфичности стабилизирующего действия триптофана на
фермент авторы исследовали действие этой аминокислоты на распад тотальных
белков печени. Скорость распада они измеряли по нарастанию
радиоактивности в безбелковом фильтрате после осаждения белков
трихлоруксусной кислотой (ТХУ).
Величины радиоактивности в фильтрате практически не изменялись по
сравнению с пробой в присутствии триптофана.
Авторы интерпретируют эти данные как доказательство того, что
стабилизирующее действие триптофана на исследованный ими фермент является
специфическим, а не обусловлено торможением распада тотальных белков
Предыдущая << 1 .. 27 28 29 30 31 32 < 33 > 34 35 36 37 38 39 .. 121 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed