Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Крицман М.Г. -> "Индукция ферментов в норме и патологии" -> 107

Индукция ферментов в норме и патологии - Крицман М.Г.

Крицман М.Г., Коникова А.С. Индукция ферментов в норме и патологии — М.: Медицина, 1968. — 316 c.
Скачать (прямая ссылка): indukciyafermentovipatologii1968.djvu
Предыдущая << 1 .. 101 102 103 104 105 106 < 107 > 108 109 110 111 112 113 .. 121 >> Следующая

действия металла на его SH-группы, металл может также действовать как
фиксатор определенной конформации белка, возникающей при флюктуации
структуры его молекулы.
Обнаружено заметное повышение ферментативной активности мышечной
фосфофруктокиназы при образовании комплекса с кристаллическим миогеном А
(М. Ф. Гулый, 1959). Альдолазная активность миогена возрастала в
несколько раз при добавлении к среде кристаллических белков. Динитрофтор
бензол (ДНФБ) при действии на очищенный препарат Ь-фруктозо-1,6-
дифосфатазы повышает активность этого фермента, причем по-разному
изменяются оптимум pH и константа скорости катализа для двух его
субстратов (Pontremoli, Luppis et al., 1965).
Интересные факты установлены Tsutsui, Marks (1962). Показано, что
стабилизирующее и активирующее действие НАДФ на глюкозо-6-фосфат-
дегидрогеназу (КФ 1.1.1.49) сопряжено с увеличением молекулярного веса
фермента, с его конформационными изменениями.
Роль конформациониых изменений при повышении активности фер!ментов под
влиянием субстратов и других веществ in vitro отчетливо видна из серии
работ, отражающих влияние температуры и водной среды на каталитические
свойства ферментов (Grisolia, Raijman, 1961; Grisolia,
1964). Показано, что анетилглутамат активирует карбамоил-фосфатсинтетазу,
после чего фермент становится неустойчивым при 4 С и стабилизируется при
20-30е С, причем
280
активация его происходит очень быстро и степень активации является
функцией концентрации ацетилглутамата. При длительном взаимодействии
фермента с ацетилглутаматом его устойчивость своеобразно меняется и
максимальное проявление неустойчивости имеет место при 42° С. Это
необычное поведение белка авторы связывают с конфор-мационной
перестройкой активного центра фермента под влиянием ацетил глутамата как
кофактора (Fincham, 1960; Pullman и др., 1960; Schukuya и др., 1960).
Характерно, что при низкой температуре через 48 часов карбамоилсинтетаза
приобретает ряд новых свойств. При ультрацеитрифугировании фермент после
указанного воздействия разделяется на два компонента, двигающихся с
разной скоростью, что не имеет места без предварительного охлаждения.
Кроме того, указанный ферментный препарат содержит по сравнению с
исходным белком заметно меньше SH-групп, что, по мнению автора, является
следствием конформационных изменений в ферменте, произошедших при стоянии
на холоду и проявляющихся индуцированным повышением активности и
устойчивости фермента к охлаждению.
На возникновение конформационных изменений, связанных с изменением
активности фермента, указывают также многочисленные данные, отражающие
отклонения от пропорциональной зависимости коэффициента Аррениуса.
Это явление было обнаружено при исследовании температурной зависимости
активности альдолазы (Kosicki, Shere, 1961), рибонуклеазы (Siott,
Scheraga, 1963), химо-трипсина (Havsteen, Labouesse, 1963),
химотрипсиногена (Brandts, 1964). Проведены детальные исследования
зависимых от температуры конформационных изменений (окси-даза-D-
аминокислот) (КФ 1.4.3.3) (Massey, Curli, Ganther,
1966). Выяснилось, что оксидаза-?>-аминокислот(КФ 1.4.3.3) имеет
критическую температуру по ходу кривой Аррениуса, причем на этом
температурном уровне меняется ее конформация. При температуре ниже 14,9°
фермент существует в А-форме с энергией активации 18 300 кал!моль, а выше
- в Б-форме с энергией активации 9500 кал/моль. Обе эти конформациониые
формы стабильны, но обратимы. Авторы показали, что в зависимости от
температуры меняется величина коэффициента седиментации оксидаза-?>-
аминокислот; фермент может быть в виде мономера с молекулярным весом 91
000, димера, а также полимера. При изменении темпе-
28,1
ратуры меняются флюоресценция и поглощение в ультрафиолетовой и видимой
части спектра этого фермента, а также его способность к
комплексообразованию с ФАД. Интересно, что при дезаминировании разных
аминокислот критическая температура фермента разная. При дезаминировании
метионина она равна 20° С, в то время как при дезаминировании аланина -
14,9° С.
Все это указывает на доминирующее значение при увеличении скорости
ферментативных реакций изменения химических свойств и пространственного
расположения непосредственно самих компонентов ферментативной реакции.
Роль конформационных изменений, зависящих от температуры, видна из
исследований ферментативной активности мышечной фосфорилазы. Известно,
что для проявления каталитической активности мышечной фосфорилазы В
необходимо присутствие адениловой кислоты (5' АМФ), в то время как
фосфорилаза А активна в отсутствие этого соединения. Однако, как показали
Lowry, Schulz, Passon-neau (1964), 5' АМФ может значительно повышать ее
активность. Особенно это проявляется при низкой концентрации в среде
гликогена, неорганического фосфора и глю-козо-6-фосфата. Количество
5'АМФ, необходимое для половины максимальной активации фосфорилазы А,
зависит от температуры, при которой происходит каталитическая реакция.
Предыдущая << 1 .. 101 102 103 104 105 106 < 107 > 108 109 110 111 112 113 .. 121 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed