Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Конев С.В. -> "Фотобиология" -> 95

Фотобиология - Конев С.В.

Конев С.В., Волотовский И.Д. Фотобиология — Мн.: БГУ, 1979. — 385 c.
Скачать (прямая ссылка): fotobiologiya1979.djvu
Предыдущая << 1 .. 89 90 91 92 93 94 < 95 > 96 97 98 99 100 101 .. 144 >> Следующая

энергии с триптофана на краситель и сокращение времени жизни
возбужденного состояния. Параллельно степень поляризации флуоресценции
казеина возрастает с 10 до 15-16%.
3. В гемоглобине, флуоресценция которого затушена, по крайней мере, на
два порядка по сравнению с глобином благодаря эффективной миграции
энергии с триптофанилов на гем, степень поляризации составляет около 20%.
В то же время отрыв гема сопровождается ее уменьшением до 10%.
Наконец, в модельных соединениях (например, поли-/-триптофане), в которых
хромофоры максимально сближены, флуоресценция полностью деполяризована.
Вполне понятно, что все поляризационные измерения проводились в условиях,
при которых исключалась релаксационная деполяризация флуоресценции.
При pH>7 происходит ионизация фенольного гидроксила (R-ОН R-О-), что
приводит к длинноволновому сдвигу (А,тах = 297 нм) спектра поглощения
тирозина. В результате этого становится возможной миграция энергии с
тирозина и триптофана на тирозинат. В эксперименте подобная миграция
энергии регистри-
256
Глава XIII. Действие УФ-света на белки
руется по тушению флуоресценции донора. Такой эффект был обнаружен при
рН=9-11 у инсулина, рибо-нуклеазы, лизоцима, папаина. По данным
Эдельхоха, эффективность миграции в дипептиде триптофанил-тиро-зине от
триптофана к тирозинату составляет 85%. В соответствии с теорией
индуктивно-резонансного переноса в серии олигопептидов триптофанил-
(глицил) "-тирозин тушение триптофановой флуоресценции уменьшалось с
увеличением п. При п>4 из-за увеличения расстояния между донором и
акцептором энергии миграция энергии с триптофана на тирозинат полностью
прекращается и тушение флуоресценции триптофана уже не наблюдается.
Наряду с рассмотренными внутримолекулярными процессами миграции энергии
белковым системам свойствен также межмолекулярный перенос энергии. Такой
перенос может осуществляться между ароматическими аминокислотами белков и
простетическими группами НАДН2, ФАДом, гемом, ретиналем, билитрие-нами,
витаминами, пигментами, хлорофиллом, кароти-ноидами и т. д.
Следует подчеркнуть, что миграция энергии между ароматическими
аминокислотами может увеличивать поперечное сечение ключевой
фотохимической реакции и разобщать в пространстве место поглощения кванта
и место реализации его действия. Наоборот, межмолеку-лярная миграция
энергии белок - внешний хромофор уменьшает квантовый выход
фотохимического повреждения белкового носителя и может сенсибилизировать
в акцепторах фотохимические реакции, ответственные за многие
фотобиологические эффекты.
5. ТРИПТОФАНОВАЯ ФОТОИНАКТИВАЦИЯ
Триптофановая фотоинактивация белков в растворе и в пленке при облучении
УФ-светом с длиной волны 260-320 нм осуществляется по одноквантовому,
одноударному механизму. В пользу этого свидетельствуют экспоненциальный
характер дозных кривых и взаимозаменяемость интенсивности и времени
облучения (соблюдение закона Бунзена - Роско). Триптофановая инактивация
белков инициируется не триплетными, а синглет-ными электронно-
возбужденными состояниями хромо-
5. Триптофановая фотоинактивация
257
форов. Этот вывод следует из пропорциональности между концентрацией
синглетных возбужденных состояний и степенью инактивации. Миграционная
"откачка" энергии с синглетных уровней триптофанилов у трипсина на
краситель флуоресцеин, а у фибриногена - на диметил-
аминонафталинсульфанилхлорид сопровождается соответствующим уменьшением
квантового выхода инактивации белков. В противоположность этому изменение
заселенности триплетных уровней триптофанилов белка в результате
индуктивно-резонансной миграции энергии триптофанил-э-хризоидин и
сульфонамид->-триптофанил не влияет на фоточувствительность белков.
Более того, даже при низких температурах (77К), при которых стационарная
концентрация "триплетов" и, следовательно, вероятность триплетной
фотоинактивации на несколько порядков выше, чем при комнатных,
сохраняется одноквантовость процесса. В этих же условиях равные дозы
прерывистого и непрерывного облучения оказываются одинаково эффективными,
хотя в последнем случае условия более благоприятны для триплетной
фотохимии.
Характерно, что и сам фотолиз триптофанилов (их фотовыцветание,
регистрируемое по тушению флуоресценции) в белках также протекает по
одноквантовому одноударному механизму.
Для некоторых белков, однако, полулогарифмическая зависимость степени
фотолиза триптофанилов от дозы УФ-облучения описывается не одной, а двумя
прямыми с изломом на начальных стадиях фотолиза. Это указывает на
.гетерогенность триптофанилов по фоточувствительности - "быстрые" и
"медленные" трипто-фанилы (Л. X. Эйдус, Т. Н. Калабухова).
Итак, при физиологических условиях именно синг-летное возбужденное
состояние триптофанила в белках является, по-видимому, непосредственным
предшественником фотопродуктов, которые приводят к инактивации
макромолекулы.
В опытах Ю. А. Владимирова с сотр. убедительно показано, что триптофан
Предыдущая << 1 .. 89 90 91 92 93 94 < 95 > 96 97 98 99 100 101 .. 144 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed