Научная литература
booksshare.net -> Добавить материал -> Биология -> Кондрахин И.П. -> "Методы ветеринарной клинической лабораторной диагнотики" -> 57

Методы ветеринарной клинической лабораторной диагнотики - Кондрахин И.П.

Кондрахин И.П., Архипов А.В., Левченко В.И., Таланов Г.А., Фролова Л.А., Новиков В.Э. Методы ветеринарной клинической лабораторной диагнотики: Справочник. Под редакцией Сайтаниди В.Н. — М.: Колос, 2004. — 520 c.
ISBN 5-9532-0165-6
Скачать (прямая ссылка): metodvetkllabdia2004.djvu
Предыдущая << 1 .. 51 52 53 54 55 56 < 57 > 58 59 60 61 62 63 .. 246 >> Следующая


В пробирку вносят 5 мл прозрачного фильтрата (центрифугата) крови, 5 мл реактива Сомоджи, тщательно перемешивают и помещают на 15 мин (точно) в кипящую водяную баню. Охлаждают до комнатной температуры. После охлаждения содержимое пробирки подкисляют 2,5—3,0 мл 2 н. раствора серной кислоты. Чтобы под-кисление пробы произошло одновременно, рекомендуется добавлять кислоту быстро, встряхивая пробирку. Затем в пробирку вносят 2—3 капли 1 %-ного раствора крахмала, перемешивают. Титруют из микробюретки 0,005 н. раствором гипосульфита до

120

исчезновения синей окраски. Контроль делают как опыт, но вместо фильтрата крови берут 5 мл дистиллированной воды. Расчет ведут по формуле

X=(A-B)- 30,

где X — концентрация глюкозы, мг%; А — количество 0,005 н. раствора гипосульфита, затраченного на титрование контрольной пробы, мл; В — количество 0,005 н. раствора гипосульфита, затраченного на титрование опытной пробы, мл; 30 — коэффициент для пересчета в мг%.

При пересчете мг% в ммоль/л полученную величину умножают на 0,0555. Ошибка метода составляет ±5 %. Источник: 52.

Клиническое значение. Глюкоза — главный источник энергии для клеток организма. На ее долю приходится более 90 % всех низкомолекулярных углеводов.

Относительно постоянный уровень глюкозы в крови поддерживается благодаря сахароснижающему свойству инсулина и сахаропо-вышающему свойству адреналина, глюкогона и глюкокортикоидов.

Концентрация глюкозы в венозной крови на 10 % меньше, чем в капиллярной, она быстро снижается благодаря гликолизу. Поэтому глюкозу в крови определяют сразу после ее взятия или проводят осаждение белков трихлоруксусной кислотой непосредственно на ферме или добавляют ингибитор.

Нормативы глюкозы в крови животных приведены в приложениях 4—7.

Снижение сахара в крови (гипогликемия) бывает при кетозе, вторичной остеодистрофии, послеродовом парезе, некоторых формах ожирения, токсических поражениях печени. Часто оно следствие недостатка в кормах легкоусвояемых углеводов, большой потребности в глюкозе при высококонцентратном типе кормления, преобладании в рационах кислых кормов. К гипогликемии приводят передозировки инсулина.

Повышение сахара в крови (гипергликемия) может быть стойким и непродолжительным — при скармливании скоту больших количеств сахаристых кормов, а также при испуге, высокой температуре, стрессовом состоянии. Стойкая гипергликемия бывает при сахарном диабете. Однако следует иметь в виду то обстоятельство, что при сахарном диабете, сопровождаемом выраженной глюкозу-рией, содержание глюкозы в крови может быть в пределах нормы. Это обусловлено понижением почечного порога (ослабление реаб-сорбции глюкозы в почечных канальцах).

В моче здоровых животных глюкозу, как правило, не обнаруживают. Появление ее в моче (глюкозурия) бывает при сахарном диабете, когда уровень глюкозы в крови превышает пороговую концентрацию. Почечный порог глюкозы в крови у собак 6,66 ммоль/л.

Почечную глюкозурию отмечают при снижении почечного порога вследствие дистрофии почечных канальцев даже при нор-

121

мальной концентрации глюкозы в крови. Это так называемый «почечный» диабет.

Определение пировиноградной кислоты по модифицированному методу Фреедмана и Хаугена. Принцип. Пировиноградная кислота при добавлении 2,4-динитрофенилгидрозина превращается в 2,4-динитрофенилгидрозон пировиноградной кислоты, который очищается от примесей гидрозонов и других кетокислот последовательной экстракцией содовым раствором. 2,4-динитрофенилгидрозон образует со щелочью соединение коричнево-красного цвета, интенсивность которого определяют на фотометре.

Реактивы: 7,5%-ный раствор трихлоруксусной кислоты. Готовят небольшое количество, хранят в холодильнике. Старые растворы использовать нецелесообразно;

толуол чистый (перегнанный);

0,1 %-ный раствор 2,4-динитрофенилгидрозина в 2 моль/л растворе соляной кислоты. 100 мг 2,4-динитрофенилгидрозина растворяют в 100 мл 2 моль/л раствора соляной кислоты. Кислоту добавляют небольшими порциями и нагревают на водяной бане до полного растворения 2,4-динитрофенилгидрозина. Раствор фильтруют и хранят в холодильнике в склянке из темного стекла;

10%-ный раствор трихлоруксусной кислоты;

10%-ный раствор натрия карбоната;

1,5 моль/л раствор натрия гидроксида;

2 моль/л раствор соляной кислоты;

основной раствор пировиноградной кислоты. 20 мг пировиноградной кислоты или 25 мг натрия пировинограднокислого растворяют дистиллированной водой в мерной колбе на 100 мл;

стандартный 1 мг%-ный раствор пировиноградной кислоты. Готовят перед анализом из основного раствора; 5 мл основного раствора пировиноградной кислоты или натрия пировинограднокислого в мерной колбе доводят дистиллированной водой до 100 мл.

Оборудование: ФЭК; химические пробирки с притертой пробкой; водяная баня.

Ход определения. Осаждение белков крови. Для получения цельной крови в качестве стабилизатора (антикоагулянта) используют натрия фторид из расчета 100 мг на 10 мл крови. 3 мл только что взятой стабилизированной крови вносят в центрифужную пробирку, затем медленно (по каплям) прибавляют 3 мл 10%-ного раствора трихлоруксусной кислоты. Содержимое пробирки тщательно перемешивают стеклянной палочкой. Пробирку помещают на 10 мин в баню со льдом для лучшего осаждения белка, после чего центрифугируют 10 мин при 3000 мин-1. Надоса-дочную жидкость осторожно сливают в чистую пробирку и используют для определения пировиноградной и молочной кислот. Хранят в банке со льдом.
Предыдущая << 1 .. 51 52 53 54 55 56 < 57 > 58 59 60 61 62 63 .. 246 >> Следующая

Реклама

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed

Есть, чем поделиться? Отправьте
материал
нам
Авторские права © 2009 BooksShare.
Все права защищены.
Rambler's Top100

c1c0fc952cf0704ad12d6af2ad3bf47e03017fed