Методы ветеринарной клинической лабораторной диагнотики - Кондрахин И.П.
ISBN 5-9532-0165-6
Скачать (прямая ссылка):
рабочий стандартный раствор с содержанием 2 мг% магния. Берут 1 мл основного раствора магния хлорида с содержанием 100 мг% и доводят в мерной колбе дистиллированной водой до 50 мл. При использовании в качестве основного раствора 0,01 н. раствора магния сульфата его разводят 1 : 6 (1 мл раствора с содержанием 12,15 мг% магния + 5 мл дистиллированной воды) и получают раствор с содержанием 2,02 мг% магния;
2 н. (2 моль/л) раствор натрия гидроксида. 80 г натрия гидроксида растворяют в мерной колбе и доводят дистиллированной водой до 1 л.
Оборудование: фотоэлектроколориметр; центрифуга; пробирки центрифужные.
Ход определения. В центрифужную пробирку вносят 1 мл сыворотки (плазмы), 1 мл раствора ТХУ, тщательно перемешивают стеклянной палочкой и через 10 мин центрифугируют при 5000 мин-1 в течение 15 мин или при 3000 мин-1 в течение 20 мин. Над осадочная жидкость должна быть прозрачной. С помощью шприца и пипетки, на затрагивая осадка, берут 0,5 мл прозрачного цент-рифугата, добавляют 1 мл раствора титанового желтого, 1 мл раствора поливинилового спирта и 2 мл натрия гидроксида, перемешивают.
86
Таким же образом готовят стандартную пробу. В пробирку вносят 1 мл стандартного рабочего раствора магния (2 мг%), 1 мл ТХУ, перемешивают. К 0,5 мл этой смеси добавляют 1 мл раствора титанового желтого, 1 мл раствора поливинилового спирта и 2 мл раствора натрия гидроксида, смешивают.
Параллельно готовят контроль на реактивы. В пробирку вносят 1 мл дистиллированной воды, 1 мл раствора ТХУ, 1 мл раствора титанового желтого, 2 мл раствора поливинилового спирта и 2 мл раствора натрия гидроксида, перемешивают. Через 10 мин опытную и стандартную пробы колориметрируют в кювете с толщиной слоя 1 см при длине волны 500—600 нм (зеленый светофильтр) против контроля на реактивы.
Расчет ведут по формуле
где х— количество магния, мг%; А — экстинкция опытной пробы; Б — экстинкция стандартного рабочего раствора магния; 2 — коэффициент для пересчета в мг%.
При использовании стандартного раствора с содержанием 2,02 мг% магния в качестве коэффициента используют эту величину. При расчете содержания магния в ммоль/л в качестве коэффициента берут 0,822 при содержании в стандартном растворе 2 мг% магния или 0,830 при содержании в стандартном растворе 2,02 мг% магния. При переводе мг% в ммоль/л полученную величину умножают на 0,411 (см. приложение 4).
Источники: 29, 76.
Примечание. Самым точным и чувствительным методом определения общего кальция и общего магния в биологических жидкостях считается атомная абсорбционная спектрофотометрия.
Клиническое значение. Циркулирующий в крови магний существует в трех формах: около 55 % находится в ионизированной биологически активной форме; от 12 до 15 % образует комплексы с низкомолекулярными анионами; от 30 до 33 % связано с белками крови. Около 25 % магния взаимодействует с альбуминами и около 8 % — с глобулинами. Концентрация магния в клетках в 10—15 раз выше, чем во внеклеточной жидкости. Метаболическая роль магния определяется его участием как кофактора более чем в 300 экзиматических реакциях. Магний практически участвует во всех обменных процессах организма. Ионы магния активируют АТФ-фа-зу, обеспечивают работу К—Na-насоса клеточных мембран. Магний и кальций в различных тканях могут действовать и как синергисты, и как антагонисты. В гладких мышцах сосудов миокарда отмечают их антагонизм. В то же время дефицит как магния, так и кальция повышает нервно-мышечную возбудимость. Магний усиливает расщепление ацетилхолина путем активации холинэстеразы.
При снижении уровня магния в крови увеличивается концентрация ацетилхолина, достигая предельной величины, при которой
87
блокируется передача нервного возбуждения, наступают тетания и судороги. Магний тесно связан с обменом кальция, фосфора и калия. Более 50 % его находится в костях и зубах.
Гипомагниемию отмечают при диарее, полиурической стадии острой почечной недостаточности вследствие потери магния с калом или мочой, при циррозе печени, гиперпаратиреозе, гипотиреозе, хроническом панкреатите, усиленной лактации.
Снижение содержания магния в крови бывает при пастбищной тетании, алиментарной остеодистрофий, послеродовом парезе, транспортной болезни у коров. Гипомагниемия наступает вследствие поступления в организм избытка калия (с молодой травой) или азота с концентрированными кормами, а также азотсодержащими небелковыми средствами.
3.3.4. МЕТОДЫ ОЦЕНКИ СОСТОЯНИЯ БЕЛКОВОГО ОБМЕНА
Для оценки состояния белкового обмена, а также функций отдельных органов проводят определение в сыворотке крови общего белка и его фракций, мочевины, креатинина и других составляющих остаточного азота.
Для определения общего белка сыворотки крови используют методы сжигания (къельдалеметрические), рефрактометрические, спектрофотометрические и др. В лабораториях ветеринарной медицины преимущественно пользуются рефрактометрическим и колориметрическим (биуретовым) методами. При определении белковых фракций сыворотки крови используют электрофоретиче-ские (на агаровом геле, в полиакриламидном геле, на бумаге, ацетате целлюлозы), турбидиметрические (высаливание нейтральными солями), седиментационные (разделение белков на фракции ультрацентрифугированием) методы и др.
